补体的溶血反应实验
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补体溶血反应
补体的溶血反应
原理:
当红细胞与相应抗体相结合，在电解质存在时，可使红细胞产生凝集现象;若同时加入新鲜动物血清，则血清中的补体可与红细胞及其抗体(溶血素)形成的免疫复合物结合，从而激活补体导致红细胞溶解，产生溶血现象
材料
1、抗原:2%绵羊红细胞(简称SRBC)。
2、抗体:溶血素(SRBC抗体)。
3、补体，新鲜豚鼠血清。
4、生理盐水。
5、小试管、刻度吸管、试管架、37?水溶箱等。
步骤
1、取小试管3支，编号后按下
表
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加入各物(容量单位均为ml) 管号 2%红血球溶血素(2单位) 补体(2单位) 生理盐水 1 0.5 0.5
0.50.5 2 0.5 0.5 - 1.0 3 0.5 - 0.51.0
2、将试管摇匀后置37?水箱内:15—30分钟，取出观察有无溶血现象;
结果观察
管底无血球沉淀，液体红色透明管为溶血。
注意事项
不要摇荡试管，红细胞离开机体是很容易破裂的。
加样一定要精确，不要漏加
附件13级护理本科补体溶血反应实验物品采购及具体安排。
1.13级护理本科班人数分别为62、64人实验课时(来自:WWw.XieLw.com 写 论 文 网:补体的溶血反应实验报告)2学时实验分组，每班分12组，每组5-6人
2.实验材料请购:
1.绵羊血红细胞10ml 稀释成2%溶液
2.绵羊红细胞抗体 50ml
3.豚鼠 每班4只，共8只
4.生理盐水 10瓶
5(5ml小试管 每班36管，加示教6只，共82管
篇二:实验三 补体溶血实验
实验三 补体溶血实验
一、实验目的:了解溶血反应的原理，掌握溶血反应的基本操作
方法
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二、实验原理:将绵羊红细胞做抗原注射家兔体内，经一定潜伏期，家兔血清中即出现特异
性抗体，此种抗体称溶血素，它可以与绵羊红细胞结合，此时若加入补体，即可激活补体的
经典途径，则呈现溶血现象。
三、实验材料
1、溶血素(1:1000)、补体(1:30)、绵羊红细胞(1%)、生理盐水
2、试管、吸管、试管架等
四、实验方法
1、 按下表将试管4支排成一排，
2、震荡混匀，37?水浴30分钟。
五、实验结果
实验管因发生溶血而变红色透明，其余管为红细胞悬液。
六、注意事项
1、取样品的吸管不可混用;加样力求准确;
2、SRBC吹匀后再加;
3、补体稳定性差:T、pH、连续吹打等都使活性下降，所以置于冰浴中，用时再取;加入补体后轻轻吹打。
篇三:补体溶血反应
溶血反应和补体结合试验
2009-05-24 14:15:36相关论文 相关书籍
Tags:溶血反应 补体结合试验 免疫学 溶血反应和补体结合试验 二(补体结合反应
当抗原与其对应的抗体结合时，所生成的抗原抗体复合物能从溶液中将补体吸着此即谓补体结合。参与补体结合反应的抗原是透明的溶液，故补体结合现象不能被肉眼看出来，因此必须借助
溶血系统(溶血素及相对应的羊血球)作为指示剂，来判定媒质中有无游离的补体，近而推定媒质中未知抗原(或抗体)和已知抗体(或抗原)是否进行了特异性的结合。本反应具有很高的敏感性及特异性，因之常应用于传染病的诊断，特别诊断病毒疾病和梅毒。
由于参与本反应的各种成分间有着一定量的关系，因此在作本试验之前，必须通过一系列的预备实验来确定各成分的使用量，故本反应的实验方法较为复杂。
本次实验以伤寒杆菌免疫血清与其相对应的抗原补体结合试验为例。 材料:
1. 抗原:伤寒的抽出液 2. 抗体:伤寒杆菌的免疫血清 3. 补体:豚鼠血清
4. 溶血素:抗绵羊血细胞的兔血清 5. 2%绵羊红血球
6. 小试管、试管架、水浴锅。 方法:
(一)预备试验(示教说明)
预备试验包括溶血素效价的滴定，补体效价的滴定，抗原效价的滴定及被检血清的处理。
(1) 溶血素效价的滴定 按照下表加入各物
凡最高稀释度的溶血素可呈现完全溶血者为一个单位。依上表结果第10管(即1:4000倍稀释)0.5毫升溶血素为一个单位，在溶血反应中常用0.5毫升中含有2个溶血素单位的溶液，所以试验时应取1:2000倍稀释的溶液。
(2) 补体单位滴定
能引起完全溶血的最小补体量称为准确单位，上表中第3管(即0.3毫升)，但因补体的效价可能有部分损失，故普通稍高的一管为实用单位，实际试验时须用两个实用单位。
上表的结果为: 补体
标准
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单位:0.3毫升 补体实用单位:0.35毫升 补体两个实用单位:0.70毫升
因试验时是两个实用单位的补体0.5毫升，可依下列比例关系换算: 20:0.7=?:0.5 ?= 14.3
即须将补体稀释14.3倍，用0.5毫升则含有两个实用单位。 (3) 抗原的滴定
在用已知抗原测定未知抗体时，必须先滴定抗原效价以决定本试验时所需抗原的最适
如血清对照管呈完全或部分不溶血是为抗补体现象。血清严重污染细菌，混有淋巴液或显著溶血时，常产生很强抗外体作用。又如试管、吸管不清洁，也可出现抗补体。若有抗补体发生，应抽血重试验。
浙公网安备 33021202002483