基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱及其应用
熊少祥
中国科学院化学研究所北京质谱中心
Matrix Assisted Laser Desorption / Ionization Time of Flight Mass Spectrometry (MALDI-TOF-MS)
• Tanaka K,Waki H,Ido Y,Akita S,Yoshida Y,Yoshuda T. Rapid Comm. Mass Spectrom.
1988,2,151-153
Karas M, Hillenkamp F. Anal. Chem. 1988, 60, 2299-2301 •
有机质譜仪的构成
MALDI-TOF的基本公式:
MALDI-TOF质谱仪的发展
• 线性TOF
• 反射TOF
• 离子延时引出(delay extraction)
• 正交式引出(主要用于ESI仪器)
• 源后裂解(PSD, post source decay )
• 源内裂解(ISD, in source decay)
• MS/MS--- (TOF/TOF, Q-TOF,IT-TOF)
MALDI-TOF质谱仪的基本组成
Bruker公司仪器示意图
岛津公司仪器示意图
MALDI 样品制备步骤
基质是如何帮助样品分子电离的,
常用的基质
基质的选择
MALDI-TOF 质谱的特点
• 软电离质谱 ,碎片少
• 检测质量范围宽 >400kDa
• 灵敏度高 , fmol
• 分析速度快 ,自动化
• 数据容易解释
• 可以测试混合物
• 可以测试高分子
• 仪器容易使用、维护
反射检测的谱图
线性检测的谱图
BSA digest样品的MS/MS分析
部分化合物正、负离子均可检测
影响样品信号灵敏度的因素
• Preformed ions > ionization of neutral molecules
• Smaller ions generally more intense than larger ions
• In mixtures, more basic molecules tend to have greater ion abundance
Ion Suppression - contaminants
Ion Suppression - mixtures
MALDI-TOF质谱的应用
, 蛋白质与多肽
- 常规蛋白质组学
- 医学蛋白组学
- MALDI影像
- LC-MALDI及定量分析
- 微生物的分类与鉴别
, 高分子化合物
, 富勒烯及富勒稀衍生物
, 配位化合物
, 核酸
, 多糖
, ………
线性模式检测糖蛋白
Polymers (e.g. PEG4000-Li)
非极性高聚物聚苯乙烯
药物分子
Sample (exp. Mass = 448.1086 Da). Matrix: DHB
C60及其衍生物
有机分子
树枝状化合物 (Dendrimer)
壳聚糖及其脱乙酰度分析
金属有机化合物
AnchorChip 技术
Myoglobin Digest 在 AnchorChip的测量结果
MALDI -TOF鉴别与分类微生物
MALDI-TOF分子影像技术原理
流程
快递问题件怎么处理流程河南自建厂房流程下载关于规范招聘需求审批流程制作流程表下载邮件下载流程设计
图
MALDI-MS 分析小分子
面临的最大问题:基质的干扰
纳米结构的靶体表面
四种小分子混合物的检测情况
修饰表面靶检测单糖
修饰表面靶检测二肽
利用主客体相互作用检测小分子
仪器1 Apex II型FT-ICR质谱仪
仪器2 Biflex III型MALDI-TOF质谱仪
仪器3 GCT型GC-TOF质谱仪
仪器4 QP2010型GC/MS质谱仪
仪器5 LCMS2010型LC/MS质谱仪
仪器6 Ultima Global型Q-TOF质谱仪
仪器7 Autoflex III型MALDI-TOF质谱仪