骨碎补、淫羊藿配伍杜仲防治小鼠骨质疏松的疗效观察

骨碎补、淫羊藿配伍杜仲防治小鼠 骨质疏松的疗效观察 东北林业大学 陈喜君  张媛媛 【摘要】目的 研究骨碎补、淫羊藿和杜仲对实验性骨质疏松症小鼠骨代谢生化指标的影响。方法 采用维甲酸灌胃造成小鼠实验性骨质疏松症模型，同时灌服高、中、低三种剂量的含有骨碎补、淫羊藿和杜仲的供试药， 检测 工程第三方检测合同工程防雷检测合同植筋拉拔检测方案传感器技术课后答案检测机构通用要求培训 小鼠血清总碱性磷酸酶(AKP)、羟脯胺酸／肌酐值(HOP／Cr)、钙离子(Ca2+)、骨钙素(BGP)的变化。结果 三个给供试药剂量组的血清总碱性磷酸酶含量与模型组相比均升高，血清骨钙素、羟脯胺酸／肌酐、血清钙离子与模型组相比均下降(P<0.01或P<0.05)。结论 骨碎补、淫羊藿与杜仲对维甲酸造成的小鼠骨质疏松症有一定的防治作用。 【关键词】淫羊藿；骨碎补；杜仲；骨质疏松；维甲酸 Effect of the combination of three kinds of traditional Chinese medicines on osteoporosis mice 【Abstract】Objective  To study the effects of epimedium koreanum ,davallia mariesil and eucommia ulmoides oliver on osteoporosis mice induced by retinoic acid．Methods The osteoporosis mice were induced by retinoic acid and then were fed with epimedium koreanum,davallia mariesil and eucommia ulmoides oliver．The biochemical markers in serum were observed．Results  The data showed that the blood AKP were higher in mice treated with three total flavones than mice in model group，the blood HOP／Cr,BGP, Ca2+ were lower in treated mice than model group(P<0.01 or P<0.05)．Conclusion This study suggests that those three kinds of traditional Chinese medicines can effectively treat the osteoporosis mice induced by retinoic acid． 【Key words】Epimedium koreanum；Davallia mariesil；Eucommia ulmoides oliver; Osteoporosis；Retinoic acid 骨质疏松症(OP)是威胁老年人健康的一种骨代谢疾病，以骨量减少，骨组织显微结构改变导致骨脆性增加和骨折发生率增加为特征的一种系统性、全身性骨骼疾病。杜仲、骨碎补和淫羊藿是中医常用的滋补药材，自古以来被我国中医作为补肾强骨的药材在临床治疗中使用，尤其是在治疗骨质疏松方面，以其整体调治、疗效好等优势，引起了广泛的关注。但是淫羊藿 [1、4]、骨碎补和杜仲联合用于骨质疏松治疗未见报道。本实验利用维甲酸[2]建立小鼠骨质疏松症模型，从血清总碱性磷酸酶(AKP)、钙离子(Ca2+)、羟脯胺酸／肌酐值(HOP／Cr)、骨钙素(BGP)指标的变化，初步探讨了这3种中药联合使用对骨质疏松症的影响。 1 材料 1.1 药材与试剂 淫羊藿(epimedium sagittatum)批号：110206；骨碎补(davallia mariesil)批号：110212；杜仲(eucommia ulmoides olive)批号：110209，均由哈尔滨市世一堂中药饮片有限责任公司提供。按人体与动物体表面积等效剂量比值计算，小鼠剂量为1.975 g／kg[3]。维甲酸(retinoic acid，RA)，批号：20110305，临用前加蒸馏水配成一定浓度的混悬液。羟脯胺酸(HOP)检测斌剂盒，批号：20100825；肌酐(creatinine)试剂盒，批号：20100621；碱性磷酸酶试剂盒，批号：20100205；血清钙(Ca2+)试剂盒，批号：20110504。 1.2 实验动物 昆明种小鼠50只，雌性。体质量(28±1)g，由黑龙江中医药大学实验动物中心提供。 1.3 主要仪器 超低温冰箱，XD生化分析仪(上海讯达医疗仪器公司)，离心机等。 2 方法 2.1 供试药品的制备  取骨碎补、淫羊藿、杜仲干燥药材（质量比为3:2:3.4），用10倍量纯化水浸泡2小时，煎煮3次，每次2个小时，过滤，滤液合并后减压浓缩成稠膏，干燥即得供试药品备用。 2.2 小鼠骨质疏松模型制备  参考文献[2]方法，取昆明种小鼠50只，随机分为5组，每组10只小鼠。分别为正常组、模型组、供试药低剂量组、供试药中剂量组、供试药高剂量组。除正常组灌胃0.9％氯化钠注射液，其它组按每天（70mg·kg-1）维甲酸连续灌胃14d。 2.3 给药方法  正常组灌胃等体积的0.9％氯化钠注射液，供试药低剂量组(150 mg／kg)、供试药中剂量组(300 mg／kg)、供试药高剂量组(500 mg／kg)，连续灌胃30 d。 2.4 血浆样品  检测小鼠连续灌胃30 d，最后一次给药12 h后称体量并记录。眼眶取血放入离心管中，3 000 r／min离心15min，得到血清，测定Cr、AKP、BGP、Ca2+ 、HOP。 2.5 统计学处理 用SPSS统计软件处理，LSD检验比较各组差异。试验结果数据均以平均值± 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 差表示。 3 结果 由于制造模及采血过程中，个别组小鼠出现死亡及溶血等情况，故每组取8只小鼠数据做为有效数据进行统计分析。 3.1 小鼠体质量的变化见表1。 表1 各组对RA所致0P小鼠质量值的影响(X±S，n=8) 组别 实验前体质量（g） 实验后体质量（g） 正常组 模型组 供试药低剂量组 供试药中剂量组 供试药高剂量组 27.10±0.77＊＊ 28.10±1.39 28.14±0.75 28.31±1.10＊ 28.46±1.23＊ 31.90±1.10＊＊ 29.60±1.04＊ 30.57±1.38＊ 32.15±1.24＊＊ 31.30±1.52＊＊           注：与正常组比较，＊P<0.05；与模型组比较，＊＊P<0.01 3.2 各组小鼠生化指标测定结果见表2。 表2 各组小鼠生化指标测定结果(X±S，n=8) 组别 BGP （ng/ml） HOP/Cr AKP (U/L) Ca2+ (mg/L) 正常组 模型组 供试药低剂量组 供试药中剂量组 供试药高剂量组 1.08±0.01▲ 1.23±0.10＊ 1.25±0.06＊ 1.24±0.09＊ 1.16±0.11▲ 0.27±0.06 0.30±0.01＊ 0.26±0.02 0.26±0.01 0.22±0.07▲ 52.68±4.69 45.67±6.05 40.84±6.24＊ 48.53±6.65 61.37±11.54＊▲ 2.08±0.19▲ 2.41±0.15＊ 2.03±0.20▲ 1.75±0.27＊▲ 2.28±0.23           注：与正常组比较， ＊P<0.05；与模型组比较， ▲P<0.05。 4 讨论 现代研究 证明 住所证明下载场所使用证明下载诊断证明下载住所证明下载爱问住所证明下载爱问 ，淫羊藿能刺激成骨细胞活性，促进骨髓细胞DNA合成，加快骨组织蛋白质合成及成骨细胞生长。促进机体对钙的吸收，阻止钙和磷的流失，增强对钙的利用[5]。中药骨碎补是一味骨伤科常用中药，具有提高骨密度、维持骨微结构的完整程度、增强成骨细胞活性、促进钙沉积等作用，改善骨调节激素的紊乱状态及骨代谢过程中的细胞因子，抑制骨吸收，是肾主骨生髓的物质基础之一。杜仲在《神农本草经》中列为上品药材，具有强筋骨、补肝肾之功效。王大为等[6]研究了杜仲对成骨样细胞增殖的作用，表明杜仲中可能含有直接作用于成骨细胞的活性成分。杜仲水提物通过促进骨髓基质细胞增殖、向成骨细胞分化，从而促进成骨作用，有利于骨愈合、骨修复。 实验观察淫羊藿、骨碎补和杜仲制剂对维甲酸所致骨质疏松小鼠的血清骨代谢指标BGP、HOP／Cr、AKP、Ca2+的影响。结果表明，模型组血清骨代谢生化指标Ca2+、BGP及HOP／Cr值与正常组相比差异有统计学意义，与文献报道基本一致， 说明 关于失联党员情况说明岗位说明总经理岗位说明书会计岗位说明书行政主管岗位说明书 小鼠OP实验模型成功；供试药高剂量组能降低骨质疏松小鼠BGP、降低骨质疏松小鼠的血清游离钙、降低骨质疏松小鼠HOP／Cr、升高骨质疏松小鼠的AKP，表明灌服淫羊藿+骨碎补+杜仲制剂可以对维甲酸造成的小鼠骨质疏松有一定的防治作用，可增强骨形成活性，抑制骨吸收。其协同作用以及作用机制还需进一步研究。 参考文献 [1] 马慧萍，贾正平，白梦海，等．淫羊藿总黄酮抗大鼠实验性骨质疏松作用研究[J]．中国药理学通报，2003，19(2)：187-190． [2]陈方，吴铁，崔燎．维甲酸致小鼠骨质疏松模型的量效关系及骨药理作用探讨．中国药理学通报．2002，18(6)：18-19． [3]孔利佳,汤宏斌．实验动物学．武汉：湖北科学技术出版社，2002：277-278． [4]骨碎补总黄酮、淫羊藿总黄酮联合防治小鼠骨质疏松的疗效观察.中国基层医药.2008.15(8):1269-1270． [5]佟岩，邝宁子，沓小容，等．淫羊藿及其复方中药制剂防治骨质疏松的实验研究及临床应用．辽宁药物与临床．2002，5(1)：45-47． [6]王大为，高晓燕，李发美，等.杜仲对成骨样细胞增殖的作用[J].中药药理与临床,2000.16(4):24． 拓展阅读