硅胶柱层析论文：硅胶柱层析分离纯化纤维寡糖单一聚合度纤维寡糖苜蓿 β-葡聚糖酶制备

硅胶柱层析论文：硅胶柱层析分离纯化纤维寡糖单一聚合度纤维寡糖苜蓿 β-葡聚糖酶制备硅胶柱层析论文：硅胶柱层析分离纯化纤维寡糖单一聚合度纤维寡糖苜蓿 β-葡聚糖酶制备硅胶柱层析论文:β-葡聚糖酶水解紫花苜蓿制备纤维寡糖的研究【中文摘要】纤维寡糖作为功能性寡糖家族中重要的一员可应用于食品、饲料添加剂和生物农药等领域,不仅能提高机体和植物免疫功能,还具有无毒、无污染、无残留、环境相容性好等优点,具有良好的经济效益和社会效益。植物纤维素是自然界最丰富最廉价的可再生资源,是制备纤维寡糖理想的原料。本实验选择苜蓿干草作为原料,对水解植物纤维素制备纤维寡糖的方法进行探索。主要对纤维寡糖的分析...

硅胶柱层析论文：硅胶柱层析分离纯化纤维寡糖单一聚合度纤维寡糖苜蓿 β-葡聚糖酶制备硅胶柱层析论文:β-葡聚糖酶水解紫花苜蓿制备纤维寡糖的研究【中文摘要】纤维寡糖作为功能性寡糖家族中重要的一员可应用于食品、饲料添加剂和生物农药等领域,不仅能提高机体和植物免疫功能,还具有无毒、无污染、无残留、环境相容性好等优点,具有良好的经济效益和社会效益。植物纤维素是自然界最丰富最廉价的可再生资源,是制备纤维寡糖理想的原料。本实验选择苜蓿干草作为原料,对水解植物纤维素制备纤维寡糖的方法进行探索。主要对纤维寡糖的分析检测、分离纯化以及酶解苜蓿制备纤维寡糖的工艺优化等几个方面展开研究。为了给后续反应的产物提供标准品和定性定量检测方法,首先需要制备单一聚合度纤维寡糖的标准品并研究其检测方法。本文采用混酸降解法制备纤维寡糖,通过制备型硅胶柱分离纯化得到四种单一组分,采用电喷雾飞行时间质谱确定其分子量,结果表明,四种组分分别为聚合度在2~5的纤维寡糖。本试验一次上样300 mg纤维寡糖混合物,可分别获得28 mg纤维二糖、43 mg纤维三糖、59 mg纤维四糖和52 mg纤维五糖。本文采用薄层层析(TLC)、荧光辅助糖电泳(FACE)和高压液相色谱(HPLC)等方法对纤维寡糖的定性及定量检测方法进行了探讨,检测结果表明,不同聚合度的纤维寡糖在TLC和FACE上分离度较好,呈现不... 【英文摘要】Cello-oligosaccharide as a significant component of functional oligosaccharides is mainly used on food &feed additive and biopesticide. It not only enhances immunity effectiveness of animals and plants, but can also be friendly to the environment since it is non-toxic and non-persistent. Plant cellulose is a renewable resource which abounds in the nature what makes it the desirable raw material of cello-oligosaccharide. Medicago sativa is chose as the raw material in this experiment to explore the method of... 【关键词】硅胶柱层析分离纯化纤维寡糖单一聚合度纤维寡糖苜蓿 β-葡聚糖酶制备【英文关键词】Silica column chromatography Separation Cello-oligosaccharides ono-cellooligosaccharide Medicago sativa β-glucanase Preparetion 【目录】β-葡聚糖酶水解紫花苜蓿制备纤维寡糖的研究摘要 6-7 Abstract 7 第一章绪论 14-23 1.1 功能性寡糖的介绍 14-15 1.1.1 功能性寡糖定义、理化性质和种类 14 1.1.2 功能性寡糖的生理功能及其应用 14 1.1.3 功能性寡糖的研究现状 14-15 1.2 纤维寡糖简介及其研究现状 15-20 1.2.1 纤维寡糖的化学结构、理化特性及其生理活性 15-16 1.2.2 纤维寡糖的制备方法 16-17 1.2.3 酶解法制备纤维寡糖面临的难题和目前研究现状 17-19 1.2.4 纤维寡糖分析检测、分离纯化和结构测定 19-20 1.3 研究的目的和意义 20-21 1.4 研究内容和目标 21 1.5 技术路线 21-23 第二章单一聚合度纤维寡糖的分离纯化及检测 23-41 2.1 引言 23 2.2 实验材料与设备 23-25 2.2.1 实验材料与试剂 23-24 2.2.2 层析柱及填料 24 2.2.3 实验设备与仪器 24-25 2.3 实验方法 25-28 2.3.1 纤维寡糖粗品的制备 25 2.3.2 纤维寡糖粗品的检测 25-27 2.3.3 制备型硅胶柱层析分离纯化单一聚合度纤维寡糖 27-28 2.3.4 单一聚合度纤维寡糖的检测 28 2.4 结果与分析 28-39 2.4.1 纤维寡糖的检测分析 28-30 2.4.2 制备型硅胶柱层析分离纯化纤维寡糖的结果 30-31 2.4.3 单一聚合度纤维寡糖的检测结果 31-39 2.5 本章小结 39-41 第三章苜蓿干草的预处理及其纤维素含量和组成的测定 41-50 3.1 引言 41 3.2 实验材料与设备 41-42 3.2.1 实验材料与试剂 41-42 3.2.2 实验仪器与设备 42 3.3 实验方法 42-44 3.3.1 苜蓿干草预处理方法的选择 42-43 3.3.2 苜蓿草粉中水分含量的测定 43 3.3.3 预处理后的苜蓿草粉中纤维素的含量及其单糖的组成 43-44 3.4 结果与分析 44-48 3.4.1 苜蓿干草的预处理方法的选择 44-45 3.4.2 预处理后苜蓿草粉中的水分含量 45 3.4.3 HPLC 外标法定量测定苜蓿草粉中单糖成分结果 45-48 3.5 结论 48-50 第四章 β-葡聚糖酶酶解制备纤维寡糖 50-64 4.1 引言 50 4.2 实验材料与设备 50-51 4.2.1 实验材料与试剂 50-51 4.2.2 实验仪器与设备 51 4.3 试验方法 51-57 4.3.1 β-葡聚糖酶酶活的测定 51-52 4.3.2 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)测β-葡聚糖酶分子量 52-55 4.3.3 高效液相色谱(HPLC)定量测定酶解纤维寡糖 55 4.3.4 超高效液相色谱 55 4.3.5 酶解反应的单因素试验 55-56 4.3.6 酶解产物中纤维寡糖的得率 56-57 4.4 结果与分析 57-63 4.4.1 β-葡聚糖酶的酶活测定 57 4.4.2 β-葡聚糖酶的SDS-PAGE 电泳谱图 57-58 4.4.3 高效液相色谱(HPLC)定量测定酶解纤维寡糖结果 58-60 4.4.4 超高效液相色谱 60-61 4.4.5 单因素试验结果及分析 61-63 4.4.6 酶解产物中纤维寡糖的得率计算 63 4.5 结论 63-64 第五章结论与建议 64-65 5.1 结论 64 5.2 创新点 64 5.3 建议 64-65 参考文献 65-70 附录 70-76 致谢 76-77 作者简历 77

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