细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK）专用试剂盒说明
书
关于书的成语关于读书的排比句社区图书漂流公约怎么写关于读书的小报汉书pdf
中关村三有利再生医学研究中心
简介
细胞因子诱导的杀伤细胞（Cytokine-induced Killer Cells，CIK）是将人体外周血或脐带血单个核细胞在体外经过多种细胞因子共同诱导而获得的一群异质细胞。由于采用不同的细胞分离和扩增技术，可能得到的结果有较大差异。
按2003年中国药品食品监督管理局发布的《人体细胞治疗研究和制剂质量控制技术指导原则》，规定人体细胞培养中“不得使用同种异体人血清或血浆。如果必须使用动物血清，应考虑每批血清都应对潜在的外源因子（包括人的病原体）进行检查、筛查。”
常用的人CIK细胞培养方法绝大部分是采用胎牛或新生小牛血清培养体系。由于血清批间的差异，不同实验培养的CIK细胞差异较大。我们通过筛选优质的新生牛血清，建立了经济实用、安全可靠的人CIK细胞培养体系。
北京三有利科技发展有限公司推荐以下研究用培养体系：即
采用SANLY人CIK细胞培养体系操作简单明了，细胞增值倍数高，CD3和CD56双阳细胞比例高。
、
培养至14天，检测细菌真菌培养阴性；台盼兰拒染试验活细胞>95%。在第16、17、18天，取1*105个细胞做流式检测细胞亚型，并收集细胞悬液离心去上清后，用生理盐水洗涤3次，最后将细胞悬于200-300ml含1%白蛋白的生理盐水中备用。
CIK专用试剂盒使用说明
外周血单个核细胞（PBMC）分离
1. 取血细胞分离机采集的外周血或脐带血单个核细胞，加入等体积生理盐水，充分混匀。
2. 将上述外周血与1号试剂按照4：1的比例加入50ml离心管内，充分混匀，4℃静置15-20min。
3. 40G，4℃离心5min，缓升缓降（without breaking）。
4. 取上清，加入到50ml离心管中，用生理盐水补到50ml，400G，4℃，离心10min。(更改:淋巴细胞分离液)
5. 弃上清，加入生理盐水至50ml，混合均匀，400G，4℃，离心5min，相同条件共洗涤3次。
6. 加入30-40ml2号试剂混匀备用，取样计数。
CIK细胞的培养与扩增
1. 外周血或脐带血经分离纯化后，根据细胞数量的多少分装到4-6个175cm2的培养瓶内，加入2号试剂至50ml，将培养瓶置于37℃，5%CO2饱和湿度下培养。
2. 24小时后加入等体积（50ml）3号试剂，置于37℃，5%CO2饱和湿度下继续培养。
3. 培养3-4天，取全部液体置于50ml离心管或500ml离心瓶内，500G离心10min，弃上清，加入50ml4号试剂分装至175cm2的培养瓶内，置于37℃，5%CO2饱和湿度下继续培养。
4. 培养2-3天，再加入50ml4号试剂，相同条件下继续培养。
5. 培养2-3天，取全部液体置于50ml离心管或500ml离心瓶内，500G离心10min，弃上清，加入50ml4号试剂分装至8-12个175cm2的培养瓶内，置于37℃，
5%CO2饱和湿度下继续培养。
6.在7-18天，每天根据培养基颜色变化，加入新鲜4号试剂将培养体积加倍，可以多个培养瓶，也可与加入培养袋培养。
7.培养至14天，检测细菌真菌培养阴性，台盼兰拒染试验细胞活性＞95%。
8.在第15、16、17、18天，取1*105个细胞做流式检测细胞亚型，并收集细胞悬液离心去上清后，用生理盐水洗涤3次，最后细胞悬浮于200-300ml含1%白蛋白的生理盐水中备用。
CIK细胞培养所需试剂耗材
品名
品牌
描述
规格
离心管
nunc
锥形底
50ml
培养瓶
nunc
带滤膜
175cm2
移液管
nunc
多种规格
10、50ml
白蛋白
20%
50ml
包装及规格：
1. 免疫细胞（CIK）专用培养基1号 50ml*1
2. 免疫细胞（CIK）专用培养基2号 250ml*1
3. 免疫细胞（CIK）专用培养基3号 250ml*1
4. 免疫细胞（CIK）专用培养基4号 1000ml*4
保存及有效期：
4℃保存3个月，--20℃保存12个月
DC培养试剂盒使用说明
中关村三有利再生医学研究中心
简介
树突状细胞（Dendritic Cells,DC）是将人外周血或脐带血单个核细胞在体外经过多钟细胞因子共同诱导而获得的一群异质细胞。由于采用不同的细胞分离和培养技术，可能得到的结果有较大差异。
按2003年中国药品食品监督管理局发布的《人体细胞治疗研究和制剂质量控制技术指导原则》，规定人体细胞培养中“不得使用同种异体人血清或血浆。如果必须食用动物清，应考虑每批血清都应对潜在的外源因子（包括人的病原体）进行检查、筛查。”
常用的人DC细胞培养方法绝大部分是采用胎牛或新生小牛血清培养体系。由于血清批间的差异，不同实验室培养的DC细胞差异较大。我们通过筛选优质的新生牛血清，建立了经济适用、安全可靠的人DC细胞培养体系。
北京三有利科技发展有限公司推荐以下研究用培养体系。
采用SANLY人DC细胞培养体系操作简单明了，DC细胞阳性比例高。
培养至7天，检测细菌真菌培养阴性；台盼兰拒染试验活细胞>95%。取1—2*105 个细胞做流式检测细胞亚型，并收集细胞悬液离心去上清后，用生理盐水洗涤3次，最后将细胞悬于DC保存液中备用。
DC培养试剂盒使用说明
中关村三有利再生医学研究中心
简介
树突状细胞（Dendritic Cells,DC）是将人外周血或脐带血单个核细胞在体外经过多钟细胞因子共同诱导而获得的一群异质细胞。由于采用不同的细胞分离和培养技术，可能得到的结果有较大差异。
按2003年中国药品食品监督管理局发布的《人体细胞治疗研究和制剂质量控制技术指导原则》，规定人体细胞培养中“不得使用同种异体人血清或血浆。如果必须食用动物清，应考虑每批血清都应对潜在的外源因子（包括人的病原体）进行检查、筛查。”
常用的人DC细胞培养方法绝大部分是采用胎牛或新生小牛血清培养体系。由于血清批间的差异，不同实验室培养的DC细胞差异较大。我们通过筛选优质的新生牛血清，建立了经济适用、安全可靠的人DC细胞培养体系。
北京三有利科技发展有限公司推荐以下研究用培养体系。
采用SANLY人DC细胞培养体系操作简单明了，DC细胞阳性比例高。
培养至7天，检测细菌真菌培养阴性；台盼兰拒染试验活细胞>95%。取1—2*105 个细胞做流式检测细胞亚型，并收集细胞悬液离心去上清后，用生理盐水洗涤3次，最后将细胞悬于DC保存液中备用。
浙公网安备 33021202002483