2016年药学论文—不同制法小青龙汤中盐酸麻黄碱含量的比较

2016年药学论文—不同制法小青龙汤中盐酸麻黄碱含量的比较 精品文档欢迎来主页查询 不同制法小青龙汤中盐酸麻黄碱含量的比较 作者,张明昶,邵进明,彭小冰,罗维,梁光义 【摘要】 目的对小青龙汤的分煎液与合煎液中的有效成分盐酸麻黄 碱进行含量比较。方法建立反相高效液相色谱方法,采用Agilent Zorbax SB-C18色谱柱,5 μm,4.6 mm×150 mm,, 以甲醇-0.1% 磷酸,8?92,为流动相,流速为1.0 ml?min-1,检测波长为207 nm, 柱温为25?。结果小青龙汤合煎液中盐酸麻黄碱的平均含量高于分 煎液中盐酸麻黄碱的平均含量。结论小青龙汤分煎液与合煎液中盐酸 麻黄碱的含量存在显著性差异。 【关键词】 小青龙汤, 合煎, 分煎, 盐酸麻黄碱, 高效液相色 谱 Abstract,ObjectiveTo compare the contents of Ephedrine Hydrochloride in Hejian decoction and Fenjian decoction of XiaoQingLongTang.MethodsAn HPLC method was established with an Agilent Zorbax SB-C18 column (5μm, 4.6 mm×150 mm) 更多精品文档,欢迎来我主页查询 精品文档欢迎来主页查询 and the mobile phase of methanol-0.1% phosphoric acid solution (8?92) .The flow rate was 1.0ml/min and the detection wavelength of 207nm.ResultsThe average content of Ephedrine Hydrochloride of Hejian decoction was higher than that of Fenjian decoction. ConclusionThe differentiation of Ephedrine Hydrochloride contents between Hejian decoction and Fenjian decoction of XiaoQingLongTang is obvious. Key words,XiaoQingLongTang; Hejian decoction; Fenjian decoction; Ephedrine Hydrochloride; HPLC 中药复方汤剂是中药制剂的传统剂型,在临床使用广泛,煎煮具有 随意性,使用不方便,而中药配方颗粒是将单味中药饮片通过水等溶 剂,提取浓缩制得,可以类似中药饮片随证组方,解决传统汤剂使用 不便之不足。但两者的临床疗效是否相近,其有效成分的含量有何差 异是中药配方颗粒能否被广泛应用于临床需要解决的重要问题。小青 龙汤出自《伤寒论》,由麻黄9 g,白芍9 g,细辛6 g,干姜6g,炙 甘草6 g,桂枝9 g,五味子6 g,半夏6 g等8味中药组成,具有外 解表寒、温肺化饮的功能,主治外寒里饮证,1,。本实验对小青龙汤 的分煎液与合煎液中的有效成分盐酸麻黄碱的含量进行比较,以期为 更多精品文档,欢迎来我主页查询 精品文档欢迎来主页查询 中药配方颗粒的研制开发提供一定的科学依据。 1 器材与试药 Anglent1100型高效液相色谱仪, HP1100/WIND3D化学工作站。DAD 检测器。草麻黄Ephedra sinica Stapf,桂枝Cinnamomum cassia Pres,白芍Paeonia lactiflora Pall.,法半夏Pinelliaternata (Thunb.) Breit.,干姜Zingiber officinale Rosc.,炙甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch.,制南五味Schisandra sphenanthera Rehd. et wils.,细辛Asarun sieboldii Miq.var. seoulense Nakai均购于贵阳市药材公司,以上药材经贵阳中医学院刘芃教授鉴定且符合2005版《中国药典》?部收载 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 。盐酸麻黄碱对照品,中国药品生物制品检定所,批号,714-9202,,甲醇为色谱纯,其余试剂均为分析纯。 2 方法 2.1 色谱条件 色谱柱为Agilent SB-C18柱,5 μm,4.6 mm×150 mm,,流动相甲醇-0.1%磷酸,8?92,,流速为1.0 ml?min-1,检测波更多精品文档,欢迎来我主页查询 精品文档欢迎来主页查询 长为207 nm,柱温25?。其色谱图见图1,4。 2.2 溶液的制备 2.2.1 对照品溶液的制备精密称取盐酸麻黄碱对照品适量,加甲醇溶解,制得0.041 2 mg?ml-1的溶液,备用。 2.2.2 合煎液供试品溶液的制备,传统煎煮法, 按处方称取药材饮片,麻黄9 g,加8倍量的水,浸泡0.5 h,武火煎煮微沸后改用文火煎煮20 min,其余药材按处方称取,加8倍量的水浸泡0.5 h后加入到已经煎煮了20 min的麻黄煎液中,武火煎沸后用文火煎煮40 min,趁热过滤,药渣再加6倍量的水,煎煮40 min后趁热过滤,合并两次滤液,浓缩至54 ml(1?1)转移至蒸发皿中,在水浴上浓缩至半流体状态,放入电热恒温鼓风干燥箱中在60?的温度下干燥至恒重,减压干燥成干粉。精密称取干粉0.3 g置于50 ml量瓶中,精密加入甲醇,定容至刻度,摇匀,超声提取45 min,过滤,取续滤液,即得供试溶液,备用,同时采用烘干法测定水分,。 更多精品文档,欢迎来我主页查询 精品文档欢迎来主页查询 2.2.3 分煎液供试品溶液的制备,煎煮方法由贵州宏宇药业有限公司提供, 称取麻黄等8味药材饮片,煎煮两次,合并两次滤液后在电热板上浓缩成流浸膏,放进电热恒温鼓风干燥箱,在60?温下进行干燥。8味药干燥至恒温重后即得颗粒,按处方称取相当于合煎原药材量的中药分煎液约为11 g,用54 ml水溶解后,转移至蒸发皿中,在水浴上浓缩至半流体状态,放入电热恒温鼓风干燥箱在60?的温度下干燥至恒温,减压干燥成干粉。精密称取相当于合煎处方生药的干粉0.28 g,置于50 ml量瓶中,精密加入甲醇,定容至刻度,摇匀,超声提取45 min,过滤,取续滤液,即得供试溶液,备用。 2.2.4 阴性对照溶液的制备 按处方分别称取除麻黄以外的其余7味中药饮片药材,按 “2.2.2”项下的方法制成阴性对照溶液。 上一页1 2下一页 2.3 线性关系考察 精密吸取上述对照品溶液稀释成6个不同浓度,不同浓度的对照品溶液取相同体积进样,按相应色谱条件测定峰面积,以峰面积积分值,A,对含量,C,作线性回归, 得回归方程为,A=3 184.1C，2.49,r =0.999 6,结果在0.041 2,0.206 μg内盐酸麻黄碱峰面积与进样量呈良好的线性关系。 更多精品文档,欢迎来我主页查询 精品文档欢迎来主页查询 2.4 精密度实验精密吸取对照品溶液5 μl,连续进样5次,测定相应峰面积, RSD为1.5%。 2.5 稳定性实验 精密吸取合煎1份,按“2.2.2”项下的方法新制备供试品,分别于0,2,4,6,8 h 进行分析测定,其RSD为1.3%,表明供试品溶液在常温下8 h内稳定性良好。 2.6 重复性实验 精密吸取合煎1份,按 “ 2.2.2”项下的方法新制备供试品,分别精密吸取5 μl注入高效液相色谱仪,测定峰面积,其RSD为1.4%。 2.7 加样回收率实验 精密称取已知含量的合煎液干膏,分别加入样品中盐酸麻黄碱总含量80,,100,,120,的对照品各3份,按盐酸麻黄碱的含量测定方法制备样品供试液,同法测定,其平均回收率为100.2,,1.8%。 2.8 阴性对照实验 取分煎液、合煎液供试品溶液,盐酸麻黄碱对照品溶液及阴性对照溶液,各进样5 μl,比较色谱图,表明样品阴性更多精品文档,欢迎来我主页查询 精品文档欢迎来主页查询 部分对测定结果无明显干扰。 2.9 样品测定 分别测定5批平行中药合煎液和分煎液每 克 药 材 中 盐 酸 麻 黄 碱 的 含 量,其平均含量分别为0.266 2 ,0.161 0 mg?g-1,RSD分别为1.5%,1.8%。 3 结果 两种供试品精密度的比较通过F检验得F t0.05,8,故两种供试品中盐酸麻黄碱的平均含量之间存在显著性差异。 4 讨论 4.1 色谱条件的选择 0.1%磷酸二氢钾-甲醇-三乙胺,20?80?0.5,,2,,则流动相的pH值超出了色谱柱所能承受的pH值,对柱子影响不好,而流动相为甲醇-水,1?1,,3,,则色谱图中主峰与杂质峰分离度小,且有明显拖尾现象,同时流动相乙腈-0.1%磷酸,9?87,更多精品文档,欢迎来我主页查询 精品文档欢迎来主页查询 ,4,对该复方汤剂而言分离效果欠佳,因此,流动相改为甲醇-0.1%磷酸,8?92,其分离度,峰面积,理论塔板数均能达到要求。 4.2 进样量的确定 对小青龙汤合煎液样品,C,8.004 mg/ml,分别进3, 5,7,10 μl来考察进样量对峰形和峰面积的影响。进样量为5 μl时,峰形最好,分离度,峰面积,理论塔板数均能达到要求,能与杂质峰达到很好分离,说明进样量对峰形的影响较大。 4.3 合煎液与分煎液的差异 小青龙汤合煎液中盐酸麻黄碱的平均含量是分煎液中平均含量的1.65倍,说明复方中各生药在合煎过程中对盐酸麻黄碱有助溶作用,而具体是哪一味生药或哪一类成分还需要进一步的研究。 【参考文献】 ,1, 邓中甲.方剂学,M,.北京,中国中医药出版社,2003,39. ,2, 李 宏.复方勒马回颗粒中盐酸麻黄碱含量测定,J,.药物分析杂志,2006,26,9,,1340. 更多精品文档,欢迎来我主页查询 精品文档欢迎来主页查询 ,3, 王志梅,刘志辉,王海玉,等.HPLC测定温阳通痹丸中盐酸麻黄碱的含量,J,.现代食品与药品杂志,2006,16,1,,38. ,4, 国家药典委员会.中国药典,?部,S,.北京,化学工业出版社,2005,223. 上一页 1 2下一页 更多精品文档,欢迎来我主页查询 精品文档欢迎来主页查询 更多精品文档,欢迎来我主页查询