WATERS2695液相色谱仪
操作规程
一、液相主机操作:
1、准备流动相,不同的流动相组分放在不同的溶剂瓶中。注意:D瓶为洗泵杆溶液(甲醇-水)20:80,E瓶为洗针头溶液(甲醇-水)80:20。
2、打开液相主机电源开关,机器进行自校,约5分钟。
3、在线脱气(Degasser):光标移到(Mode)下按Enter选On后按Enter。
4、样品池温度(Sample):光标移到(Set)下直接输入温度数值按Enter。
5、柱温(Column):光标移到(Set)下直接输入温度数值按Enter。
6、流动相比例(Composition):光标移到相应位置直接输入比例数,每输一个数值按Enter确认;比例数之和应为100。
7、更换管路流动相:按直接功能(Direct Function)进入直接功能菜单选(2 Wet Prime)按Enter输入流速(Flow Rate)和时间(Time)按OK开始。
8、更换完成后自动返回主页面,按Next Page回到主菜单。
9、光标移到流速(Flow)下输入流速值,按Enter,液相主机开始工作。
10、打开样品室门,选择要操作的样品盘,按顺序放入样品,记下样品与样品位置号,关上样品室门。
11、实验完毕后,先关检测器电源以延长紫外灯寿命,色谱柱处理完毕后,再关主机电源。
二、紫外检测器操作:
打开紫外检测器电源开关,机器进行自校,自检完毕后两个指示灯长亮。
三、软件操作:
1、打开显示器电源,再打开主机电源,启动Windows XP。
2、点击桌面上的“Empower 登录”图标启动软件。输入用户名“hplc”按“确定”进入主选单。
3、点击“运行样品”,“确定”进入运行样品界面。选择一种仪器方法,单击“编辑”进入仪器状态设置界面,选择色谱仪的脱气状态、输入样品室温度、柱温箱温度、流动相比例、积分波长范围、监视波长;设定完成后注意保存。
4、单击“监视器”钮,色谱仪按重新设定后的参数运行。
5、待基线稳定后,在样品卡上点击“单一”子卡,输入样品瓶号、进样体积、运行时间,点击“进样”按钮,观察样品的出峰时间。
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6、确定样品的出峰时间后,点击“样品”子卡,输入样品的进样瓶号、样品名称、进样体积、每个样品的进样次数、运行时间;功能选“进样”,方法组选“一般方法”。
7、所有样品设定完毕,点击工具栏“运行”钮,输入样品组名称后,按“运行”钮,开始运行设定的样品。查看样品的运行情况可点“正在运行”子卡,但不能更改运行状态。
8、运行过程中要改变流动相比例请点左下方的“改变流量”图标,输入新的流动相比例,确定后仪器按新设定的流动相比例运行。
9、实验完毕按左下方的“停止液流”图标,仪器停止运行。
四、图谱处理:
1、点击登录界面的“查看数据”、选“查看样品组”确定后打开数据项目界面。
2、双击要查看的样品组,打开查看主窗口。
3、在左边选择要查看的样品,中间出现该样品的轮廓图,在图上单击右键选提取色谱,双击波长输入需要的波长数,中间出现该波长处的液相图谱。
4、在上方输入峰宽和阈值后,点击菜单栏的“工具—积分”得到该液相图的积分数据。
5、按键盘“印屏幕”键复制画面,打开画图程序,点击“编辑—粘贴”用“选定”功能选择需要的区域,在选定区域内点鼠标右键复制。点击“文件—新建”旧图不保存,点击“编辑—粘贴”,点击“文件—另存为”,为该图谱选存放位置和图谱名,点击“保存”。
6、回到查看主窗口,选择下一色谱图,积分数据按设定的波长和峰宽、阈值自动显示,此时不要更改积分参数。按步骤5重复操作保存图谱。
7、所有图谱保存完毕,粘贴到WORD文档,打印。
8、实验完成后,先关主机,再关显示器。
五、
注意事项
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1、流动相与样品溶液必须经滤过才能使用。
2、关机后不要立即开机。
3、注意安全防护。
4、盛放样品溶液的瓶子,用过后及时清洗烘干。
5、含盐流动相不得在色谱柱中停留。
6、做好仪器使用登记。
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