[doc格式] HPLC法测定酚酞片的含量探讨

[doc格式] HPLC法测定酚酞片的含量探讨 HPLC法测定酚酞片的含量探讨 ? 260?黑龙江医药HeilongjiangMedicineJournalVo1.22No.32009 HPLC法测定酚酞片的含量探讨 王玫曹霞 哈药集团三精制药四厂有限公司 摘要目的:建立HPLC法测定酚酞片含量. 方法 快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载 :用SHISBID0C18(4.6 衄x150衄,5m)色谱柱;甲醇一水一 冰醋酸(50:50:1)为流动相;检测波长280nm下进行测定.结果:酚酞在0.240-1.202mg范围内线性良好,回归方程 A=3788340C-0.31422;r=1.00000.结论:该方法简便易行,准确,可靠,可用于酚酞片的质量控制. 关键词:酚酞片;高效液相色谱;含量测定 中图分类号:R927.0文献标识码:A文章编号:1006-2882(2009)03-260-02 DeterminationofContentofPhendphthaeinTabletbyHPLC 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 1有关物质测定溶液稳定性试验 结果:样品溶液在冰浴8小时内稳定性良好. 0小时1小时2小时4小时8小时 2.4.6检测限 称取亚胺培南适量,加溶剂制成每Iml中含0.5mg的溶 液,逐步稀释其浓度,取2OuL注入液相色谱仪, 记录 混凝土 养护记录下载土方回填监理旁站记录免费下载集备记录下载集备记录下载集备记录下载 色谱 图,当逐步稀释其浓度至0.O008mg/ml时,其主药峰峰高为 基线噪音的3倍.从而确定本品的检测限为0.0025ug. 2.4.7样品测定 综上所述,我们所确定的方法可有效测定样品中的有关 物质,同时参考欧洲药典中有关物质测定方法,确定方法如 下: 照高效液相色谱法(中国药典2005年版二部附录VD) 测定. 色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅 胶为填充剂(4.6mm×250m~;以乙腈:5.7g/L磷酸氢二钾溶 液(用磷酸调pH值至7.3)-0.7:99.3为流动相.精密称取本 品适量,加流动相溶解并稀释成每lml中含0.5mg的溶液, 取此溶液20ml用氢氧化钠溶液调节pH为10,并于80?加 热5分钟,作为对照品溶液,以254nm作为检测波长,流速为 1.Oml/min,精密吸取2Ol注入液相色谱仪,记录色谱图, 色谱图中以亚胺培南色谱峰的保留时间为1,则硫霉素的保 留时间为亚胺培南相对保留时间的0.8,两个峰的分离度应 大于3.5,理论塔板数按亚胺培南峰计算应不低于600. 测定法取本品适量,精密称定,加流动相溶解并稀释 成每lmL中约含0.5mg的溶液,摇匀,作为供试品溶液;精密 量取lml,加乙腈:0.135g/L磷酸氢二钾溶液(用磷酸调pH 值至6.8)一0.7:99.3稀释至100ml,摇匀,作为对照溶液.精 密量取对照溶液20ll1,注入液相色谱仪,调节仪器灵敏度, 使主成分峰高约为满量程的40%;再分别精密量取供试品溶 液和对照溶液各201,分别注入液相色谱仪,记录色谱图, 供试品溶液记录至主成分保留时间的2倍.计算供试品溶液 色谱中与硫霉素峰相一致的杂质峰,其峰面积不得过大于照 溶液主峰面积(1.0%),除硫霉素及亚胺培南峰外其他单个杂 质的峰面积不得大于对照溶液主峰面积的0.5倍(0.5%).除 硫霉素及亚胺培南峰外其他杂质面积总和不得大于对照溶 液主峰面积的1.5倍(1.5%). 依据上述检测方法检测样品(批号:01,02,03)中的有关 物质,结果见表3. 表3有关物质限度制订测定结果 结果:三批样品中总杂质和均小于1.5%,硫霉素均小于 1.O%,单一最大杂质均小于0.5%. 3讨论 原料有关物质主要来源于样品合成中所使用的原料及 合成的中间体,因此通过将合成所使用的原料及合成过程中 生成的中间体,采用所确定的色谱条件进行测定,则从它们 的出峰情况来判断色谱条件检测有关物质的专属性是否合 格,从而在根本上确保有关物质检测条件的有效性,为有关 物质确定色谱条件开辟了新的确定依据. 收稿日期:2009-03-16 黑龙江医药HeilongjiangMedicineJournalVot22No.32009?261? WangMei No.4PhanmaceuticalFatoryCo.,~tdofHarbinPharmaceutical9roup Abct:Objective:ToestablishaHPLCmethodpheno1phthaleinfilmcontent.Methods:BySHISEIDO C18(4.6mmX150mm,5I.Lm)column;methanol-water—glacialaceticacid (50:50:1)asmobilephase;280nm wavelengthmeasurementcarriedoutunderthedetermination.Resul~:phenolphthaleinintherangeof 0.240—1.202mggoodlinearregressionequationA=3788340C-0.31422;r=1.00000.Condmion:Thismethod issimple.Accurate.Reliable,pheno1phthaleincanbeusedtocontrolthequalityofthefilm Keywords:phen0lphtha1einfilm;high—performance1iquidchromatogra phy:determination 1仪器和试药 日本岛津Lc一2010型高相液相色谱仪:岛津色谱工作 站CLASS-VP6.12版;Branson-200超声清洗仪;瑞士AG285 电子分析天平.甲醇为色谱纯;水为重蒸水;其他试剂均为分 析纯. 2方法和结果 2.i对照品溶液的制各 精密称取酚酞对照品60mg,置lOOml量瓶中,加甲醇6 Oml使酚酞溶解,用流动相稀释至刻度,即得. 2,2供试品溶液的制备 取本品10片研细,精密称取0.2g,置lOOml量瓶中,加 甲醇60ml使酚酞溶解,超声30min,用流动相稀释至刻度, 即得. 2.3色谱条件 色谱柱:SHISEIDOCl目(4.6mmX150mm,5m);流动 相:甲醇一水一冰醋酸(50:50:1);检测波长:280nm;进样 量:1Opl;流速:i.Oml/min; 2.4线性关系试验 精密称取酚酞对照品60mg,置10ml量瓶中,加甲醇6ml 使酚酞溶解,用流动相稀释至刻度.分别吸取溶液各4ml, 6ml,8ml,lOml,15mi,20ml于100ml容量瓶中,用流动相稀 释至刻度,摇匀,即得一系列不同浓度对照品溶液,均以 1O1进样,测得峰面积积分值,浓度为横坐标,以峰面积为 纵坐标绘制标准曲线.结果表明,酚酞0.240—1.202mg范围 内线性良好,回归方程为:A=37883400-0.31422:r=1.00000. 2.5酚酞HPLC图 .’”.’’’’’’们.’..?’ 酚酞对照品的HPLO图1 酚酞供试品的HPLO图2 2.6加样回收率试验 取已知标示量含量供试品5份,加入定量酚酞对照品, 照样品测定的高效液相色谱条件,在280nm处分离检测,计 算平均回收率为98.3%;RSD为0.7%.见表1. 表1加样回收率试验裹 2.7精密度试验 精密吸取2.1项对照品溶液的制备溶液1O1,注入 液相色谱仪,连续进样测定5次,RSDO.8%. 2.8重复性试验 精密吸取2.1和2.2项中的对照品溶液和供试品溶液 各3份,同实验条件下各精密吸取溶液1Ol,注入液相色 谱仪在280nm波长处分离检测,记录各浓度对应色谱峰面 积,RSD为0.8%和RsD为1.0%. 2.9样品的测定 分别取酚酞片三批为20070201,20070202,20070203按 2.1和2.2项下的对照品和供试品溶液的制各,精密吸取对 照品溶液和供试品溶液各1Olll,分别注入高效液相色谱 仪,记录色谱图,在280nm波长处分离检测,以峰面积计算出 样品含量.三批酚酞片标示百分含量分别是99.2%; 98.5%:98.4%.RSD分另0为0.4%;0.5%;0.4%. 2.10讨论 流动相的选择:试验了甲醇一水(60:40)和甲醇一水一 冰醋酸(60:40:1)等不同流动相体系下酚酞片分离情况, 结果以后者为佳:改变该体系中甲醇的比例,结果当流动相 为甲醇一水一冰醋酸(50:50:1)分离最好,色谱峰达到较 高的对称性.由此确定本试验色谱分离流动相为甲醇一水一 冰醋酸(50:50:1). 检测波长的确定:按2.1,2.2项下配制对照品溶液和供 试品溶液,照分光光度法在200~400nm波长范围内扫描,绘 制紫外吸收光谱图,结果在280nm波长处有最大吸收,故确 定28Ohm为本品测定波长. 阴性空白试验:按2.2项下配制无酚酞供试品溶液,在 酚酞相应位置无明显峰出现. 中国药典采用紫外分光光度法(附录?A),在275nm 的波长处测定吸收度,按.404的吸收系数(E1%1c?)为 134计算含量.而本实验采用HPLC法测定酚酞片含量,效果 好,准确可靠.为完善和提高酚酞片的质量标准提供依据. 参考文献 [1]国家药典委员会.中华人民共和国药典(第二部)Is].2005年 版.收稿日期:2009—02—10