组蛋白乙酰化酶（hat）elisa试剂盒说明书
组蛋白乙酰化酶(HAT)ELISA试剂盒说明书
本试剂仅供研究使用 标本:体液
组蛋白乙酰化酶(HAT)ELISA试剂盒试验原理:
BFGF试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知BFGF浓度的
标准
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品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将BFGF和生物素标记的抗体同时温育。人碱性成纤维细胞生长因子ELISA 检测试剂盒洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中BFGF的浓度呈比例关系。
组蛋白乙酰化酶(HAT)ELISA试剂盒自备材料
1(蒸馏水。
2(加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3(振荡器及磁力搅拌器等。
安全性
1(避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。 2(实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3(不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
操作注意事项
1(试剂应按标签储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。 2(实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
3(不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。 4(使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。 5(使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。 6(洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7(底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
8(加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9(按照中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
样品收集、处理及保存方法
1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。 3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ?保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使
用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37?或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
试剂的准备
标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。
2(洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。
操作步骤
1(使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。
2(根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。
3(加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37?温育1小时。
4(甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
5(每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37?温育30分钟。
6(甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
7(每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37?温育10分钟。避免光照。 8(取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。
9(在450nm波长处测定各孔的OD值。
局限
6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到精确的结果。
试剂盒性能
1. 灵敏度:最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特异性:不与其它细胞因子反应。
3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。
组蛋白乙酰化酶(HAT)ELISA试剂盒结果判断与分析
1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值
2、以吸光度OD值为纵坐标(Y)，相应的BFGF标准品浓度为横坐标(X)，做得相应的曲线，样品的BFGF含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。
3、检测值范围:0-800pg/ml
4、敏感度: 1.0 pg/ml
MMP-3 人基质金属蛋白酶3 规格: 48T/96T
MMP-2 人基质金属蛋白酶2/明胶酶A 规格: 48T/96T
MMP-13 人基质金属蛋白酶13 规格: 48T/96T
MMP11 人基质金属蛋白酶11 规格: 48T/96T
MMP-10 人基质金属蛋白酶10 规格: 48T/96T
MMP-1 人基质金属蛋白酶1 规格: 48T/96T
MGP 人基质γ羧基谷氨酸蛋白 规格: 48T/96T
lumican 人基膜聚糖 规格: 48T/96T
MSTN 人肌抑素 规格: 48T/96T
dystrophin 人肌养蛋白 规格: 48T/96T
MYOG 人肌细胞生成素 规格: 48T/96T
CK-MB 人肌酸激酶同工酶MB 规格: 48T/96T
CK-MB 人肌酸激酶同工酶MB 规格: 48T/96T
CK 人肌酸激酶 规格: 48T/96T
MHC 人肌球蛋白重链 规格: 48T/96T
MLCK 人肌球蛋白轻链激酶 规格: 48T/96T
MLC 人肌球蛋白轻链 规格: 48T/96T
Myosin 人肌球蛋白 规格: 48T/96T
TN-R 人肌腱蛋白R 规格: 48T/96T
TN-R 人肌腱蛋白R 规格: 48T/96T
MYO/MB 人肌红蛋白 规格: 48T/96T
MYO/MB 人肌红蛋白 规格: 48T/96T
Tn-? 人肌钙蛋白? 规格: 48T/96T
F?a 人活化凝血因子? 规格: 48T/96T
APCR 人活化蛋白C抵抗素 规格: 48T/96T
APC 人活化蛋白C 规格: 48T/96T
浙公网安备 33021202002483