溶血素论文：溶血素 LLO 单增李斯特菌李斯特菌单克隆抗体[精彩]

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溶血素论文：溶血素 LLO 单增李斯特菌李斯特菌单克隆抗体[精彩] 溶血素论文:单增李斯特菌溶血素基因的原核表达及其单克隆抗体的制备【中文摘要】hly是编码单增李斯特菌特有的溶血素蛋白LLO的基因,克隆hly表达LLO蛋白并制备单增李斯特菌特异性的单克隆抗体,为单增李斯特菌特异性检测方法的建立奠定基础。方法:以单增李斯特菌的DNA为模板,通过PCR扩增出hly基因,与PET28a(+)原核表达载体连接,经测序鉴定后,转化大肠杆菌BL21,并诱导表达。经表达条件优化,大量诱导表达,用镍柱纯化。通过SDS-PAGE和westernblotting鉴定表达的蛋白,通过溶血试验鉴定其溶血活性。用纯化的表达产物免疫Balb/c小鼠,利用杂交瘤技术制备抗LLO的单克隆抗体,通过间接ELISA鉴定其亚型。单克隆抗体叠加实验分析不同单克隆抗体组合的配对效果。溶血抑制实验鉴定单抗克隆抗体能否抑制LLO的溶血活性。间接ELISA检测单克隆抗体与威尔斯李斯特菌、英诺克李斯特菌、格氏李斯特菌的交叉性。结果:原核表达出58KD的溶血素蛋白,其序列与Gene Bank公布的序列有99%的同源性。其最优化的表达条件是28?下用0.1 mmol/L IPTG诱导6 h。。溶血实验表明重组表达的LLO具有较强的溶血活性。总共获得13株单克隆抗体,4株为IgGl亚... 【英文摘要】s:To prokaryotic express hly gene from Listeria monocytogenes and prepare specific monoclonal antibody against Listeria monocytogenes and make a basis for the establishment of specific detection methods for Listeria monocytogenes.Methods:The hly gene was amplified by PCR according the templete of LM DNA and was constructed into prokaryotic exoression vector PET28a (+).The recombinant was transformed into E.coli BL21 and expressed optimally. The prokaryotic expression product was purified by nic... 【关键词】溶血素 LLO 单增李斯特菌李斯特菌单克隆抗体【英文关键词】listeriolysin O LLO Listeria monocytogenes Listeria monoclonal antibody 【索购全文】联系Q1:138113721 Q2:139938848 同时提供论文写作一对一辅导和论文发表服务

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