HPLC法测定甲磺酸溴隐亭片的含量均匀度

HPLC法测定甲磺酸溴隐亭片的含量均匀度 HPLC法测定甲磺酸溴隐亭片的含量均匀 度 ?162?中国药事2005年第19卷第3期 HPLC法测定甲磺酸溴隐亭片的含量均匀度 陈新善,姜春来,田军(中国人民解放军总后卫生部药品仪器检验所,北京100071;中 国人民解放军海军总医院药剂科) 中图分类号:R927.2文献标识码:A文章编号:1002—7777(2005)03—0162—03 甲磺酸溴隐亭(BrN5os.cn,03S)片在 《美国药典》26版等已有收载.目前国内尚未见生 产.《美国药典》对其含量均匀度的测定采用紫外 分光光度法,测定中发现,有的产品中含有抗氧剂 丁羟基苯甲醚,干扰甲磺酸溴隐亭的准确测定.本 文参考《美国药典》26版测定该药含量的方法, 采用HPLC法测定甲磺酸溴隐亭片的含量均匀度, 鉴于该法采用0.01mol?L碳酸铵一乙腈(350: 650)作为测定的流动相,使用了大量的乙腈;为 此,本文对该测定方法中的流动相组成进行了选 择,将价格昂贵的乙腈用价格相对低廉的甲醇来代 替,亦对流动相中碳酸铵的用量等也进行了调整, 建立了一个适合我国国情的测定方法.经比较,本 法的色谱分离效果与《美国药典》26版法基本一 致.本法操作简单,准确,可用于本品的含量均匀 度测定. 1仪器与试药 1.1仪器 高效液相色谱仪LC一6A,SPD一6AV紫外检测 器,SIL一6A自动进样器,CR一3A色谱数据处理 机,Uv一260分光光度计(均为日本岛津制作所生 产);Milhpore—QPlus超纯水器(美国). 1.2试药 甲磺酸溴隐亭片[T2011(NovartisPharma S.P.A),0329902B与0512704B(LekPharmaceutical andChemicalCompanyd.d.,均已过有效期);注: 因效期内本品仅有I"2011一批,未再购到效期内本 品,故选择了两批过有效期留样品一同作为测定样 品];甲磺酸溴隐亭对照品(含量:98.9%);碳酸 铵分析纯,甲醇优级纯(北京化工厂),乙腈色谱 试剂(北京益利精细化学有限公司),超纯水自制. 2实验方法与结果 2.1色谱条件与系统适用性 照高效液相色谱法[1试验,色谱柱ODS Hypersil(5,200×4.6mm,美国hp公司);流动 相:0.05%碳酸铵溶液一甲醇(1:4),流速: 检测波长:300nm,柱温:25oC,进 1.0ml?min,, 样量:20.柱效测定:理论板数按甲磺酸溴隐亭 峰计为3267. 2.2溶液的配制 2.2.1甲磺酸溴隐亭对照品溶液精密称取甲磺 酸溴隐亭对照品11.57rag,置lOOml量瓶中,加甲 醇适量,振摇使溶解并稀释至刻度,摇匀,量取 5.Oml,置lOml量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇 匀.备用. 2.2.2样品溶液精密称取研细的样品适量(约 相当于溴隐亭2.5mg),置50ml量瓶中,加甲醇适 量,振摇使溶解并稀释至刻度,摇匀,经0.45tan 的有机系微孔滤膜过滤,续滤液备用. 2.2.3样品溶液高效液相色谱分离图谱及甲磺酸 溴隐亭保留时间的确定取甲醇,各备用液各 2O,照含量均匀度项下的测定方法进行分析,记 录各自色谱图并与《美国药典》26版法样品分离 图谱比较,结果见图. 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 明两色谱条件下的分离效 果基本一致. 图甲磺酸澳隐亭片HPI~色谱图 a.本法样品分离图谱;b.《美国药典》26版法样品分离图谱 1.甲磺酸溴隐亭;2.丁羟基苯甲醚(抗氧剂);3.未知物 2.3最低检出量测定 取甲磺酸溴隐亭对照品适量,精密称定,用甲 中国药事2005年第l9卷第3期?163? 醇溶解并稀释,注入液相色谱仪测定,记录色谱 图,使甲磺酸溴隐亭峰高为仪器响应噪声的3倍量 ,测得甲磺酸溴隐亭的最低检测量约为2ng. 时 2.4线性试验 精密称取甲磺酸溴隐亭对照品11.62mg,置 100ml量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀, 吸取1.0,2.0,3.0,5.0,8.0,10.0m1分别置10ml量 瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀.各精密量取20 注入液相色谱仪进行分析,记录色谱图.以浓度为 横坐标,峰面积为纵坐标,进行回归处理.得甲磺 酸溴隐亭回归方程:S=6.687×l06C+2135,r= 0.99996,说明甲磺酸溴隐亭在l1.62—116.2pg?ml 范围内,峰面积与其浓度呈良好线性关系. 2.5回收率测定 采用加样回收试验法,取50ml量瓶6只,编 号,各精密称取已测定过含量的甲磺酸溴隐亭片细 粉适量(约相当于溴隐亭1.25mg)(批号T2011),分 别置量瓶中,再于??号各精密加入甲磺酸溴隐亭 对照品溶液1.0ml(约相当于溴隐亭0.5mg),?? 号各加3.0ml,??号各加5.0ml,照含量均匀度 项下的方法,"自加甲醇35ml起……"分别依法测 定,记录色谱图.计算平均回收率.结果见表1. 表1回收率试验结果(n=6) 2.6方法精密度试验 取甲磺酸溴隐亭对照品溶液,依法测定,连续 进样6次,记录色谱图,测得甲磺酸溴隐亭峰积分 面积,计算RSD为:O.46%(n三6),表明方法精 密度良好. 2.7稳定性试验 取供试品溶液(批号T2011),照含量均匀度 项下的测定方法进行分析,分别在0,2,4,6,8h 依法测定.测得甲磺酸溴隐亭峰积分面积,计算 RSD为:0.85%(n=5).表明在8h内稳定. 2.8含量均匀度 测定法避光操作,取本品l片,置50ml量瓶 中,加水2ml,振摇使药片崩解后,加甲醇35m1. 振摇3O分钟,加甲醇至刻度,摇匀,经0.45tan有 机系微孔滤膜滤过,续滤液作为供试品溶液,取 2O注入液相色谱仪,记录色谱图;另精密称取甲 磺酸溴隐亭对照品适量(约相当于溴隐亭10mg), 置100ml量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,摇 匀,量取5.0ml,置10ml量瓶中,加甲醇至刻度, 摇匀,作为对照品溶液,同法测定.按外标法以峰 面积计算出每片溴隐亭(C32n,oBrNsOs)的含量, 应符合规定J.测定3批样品的含量均匀度结果见 表2,表3,表4(注:表3,表4测定结果是已过 有效期的两批样品,因含量降低所致). 表2含量均匀度测定结果(I"2011) 测得峰含量相当X 籀号砥积值标示量(%)(%)sAAl-80'3 90.43 94.54 86.37 88.09 86.9588.402.82l1.60l6. 68 87.62 91.3O 86.2l 85.78 86.72 一一一一一一,一一一 l23456789加 ? 164?中国药事2005年第19卷第3期 3讨论 3.1检测波长的选择 取甲磺酸溴隐亭对照品适量,分别用《美国药 典》26版法测定含量流动相和本法流动相各制成 每lml约含10tzg的甲磺酸溴隐亭溶液,照分光光 度法],以流动相作空白,分别在200—400nln的 波长范围内扫描紫外吸收图谱,两法测得的甲磺酸 溴隐亭对照品溶液均在(300?2)nln,(239?2) 啪的波长处有最大吸收,故本文仍采用《美国药 典》26版法测定含量选定的300nm的波长为检测 波长. 3.2方法适用性 本法色谱条件与系统,能较好的将甲磺酸溴隐 亭与其他成分完全分离,并与《美国药典》26版 法测定含量的色谱条件与系统分离效果比较,两色 谱条件下的分离效果基本一致,说明本法能准确地 测定每片甲磺酸溴隐亭的含量.结果准确,可靠. 3.3说明 测定中发现,上述的本品0329902B,0512704B 批样品虽为同一厂家产品,但前者含有抗氧剂,后 者不含抗氧剂,两批样品的含量均匀度如果按同一 质量MATCH_ word word文档格式规范word作业纸小票打印word模板word简历模板免费word简历 _1714010985298_0(美国药典收载标准)检验,前者即影响 含量均匀度的准确测定. 经考察,按《美国药典》26版法检查 0329902B批(本批含有抗氧剂丁羟基苯甲醚)的 含量均匀度,每片的含量结果约高于本法12%; 而T2011,0512704B两批不含丁羟基苯甲醚,每片 的含量结果与本法的测定结果一致. 参考文献: [1]中国药典[s].二部,2oo0:附录32 [2]中国药典Is].二部,2OOO:附录78 [3]中国药典[S].二部,2O0O:附录26 大环内酯类抗生素的快速系统鉴别方法 王秀霞,潘文庆,马晓康(新疆维吾尔自治区药品检验所,乌鲁木齐市83ooo2) 中图分类号:R978.15文献标识码:B文章编号:1002—7777(2005)03—0164—03 大环内酯类抗生素是一类广谱抗菌药物,临床 应用广泛.由于同一官能团在同系化合物中的反应 相同,按现行药品标准对其制剂进行鉴别难以区 分,因此,被假冒的频率较高.由于我国假药集散 地又多在基层,取证样品量较小,受仪器设备和实 验条件的限制,在打假工作中靶向性差.我们对大 环内酯类抗生素进行了快速系统鉴别方法的研究, 建立了以颜色反应与薄层色谱相结合的大环内酯类 抗生素快速系统鉴别方法.该方法具有使用设备简 单,样品消耗量小,检出速度快,结果准确度高, 安全性好的特点,尤为适合于基层现场打假工作的 需要. 1仪器与试药 硅胶G薄层板(10×5em,天津思利达科学 仪器公司),薄层色谱展开缸; 甲醇,乙醇,硫酸,I2等试剂均为分析纯; 12种大环内酯类样品为9个不同厂家,随机 含注射用,片剂,分散片,胶 抽验共6o批样品, 囊,颗粒剂等五种剂型. 标准品(中国药品生物制品检定所):乙酰螺 旋霉素(0347----9702),克拉霉素(130356-_ 200102),琥乙红霉素(0425—200002),阿奇霉素 (0352—200203),麦迪霉素(0337—9803),罗红霉 素(130351—20o102),吉它霉素(O357—9901), 红霉素(0307—20015),麦白霉素(341—9402). 2方法与结果 2.1颜色反应 据实验所需,取各剂型单剂量,按标示量加乙 醇溶解并稀释成25mg?ml浓度,各取该溶液lml, 分别用5种试剂进行系统化学鉴别,结果见表1. 2.2薄层色谱 取颜色反应项下样品溶液适量,加乙醇稀释成 5mg?ml的溶液,作为供试液.同法制备标准品溶 液,照薄层色谱法,各取2点于同一硅胶GF2薄 层板(10×5em),分别用四种展开剂展开,展距为 7.5em取出,晾干,以I2及10%硫酸显色剂分别显 色,各制剂展开后,Rf值结果见表2.