小肠平滑肌生理特性的观察与分析
实验五 小肠平滑肌生理特性的观察与分析 【】
1. 学习哺乳动物离体肠标本制备及灌流方法。
2. 观察消化道平滑肌的一般生理特性及某些因素对舒缩活动的影响。 【】
消化道平滑肌和骨骼肌、心肌一样,也具有兴奋性、传导性和收缩性,有些也具有自律性。相比之下
消化道平滑肌的兴奋性低,收缩慢,伸展性大,具有紧张性收缩,对化学物质、温度变化及牵张刺激较敏
感等特性。小肠离体后,置于适宜的溶液中,观察其收缩活动及环境变化的影响,观察分析上述生理特性。
材料与方法
一、实验动物:家兔
二、器械、药品:电热恒温水浴锅、浴槽、张力换能器(量程为25g以下)、BL-410生物记录系统、L型通
气管、道氏袋、注射器、培养皿、温度计、烧杯、螺丝夹、三维调节器、台氏液、0.01%去甲肾上腺素、0.01%乙酰胆碱、1mol/L NaOH溶液、lmol/L HCl溶液、2%CaCl
溶液。 2
三、
(一) 标本制备 用木槌猛击兔头枕部,使其昏迷,立即剖开腹腔,找出胃幽门与十二指肠交界处。由
此取长20~30cm的肠管。先将与该肠管相连的肠系膜沿肠缘剪去,再将拟取肠管两端分别用线结扎,于结
扎两端内侧剪断,取出肠段置于台氏液中轻轻漂洗,当肠内容物基本洗净后,将肠管分成数段,每段长
2-3cm,两端各系一条线,保存于供氧的38?左右的台氏液中(若不供氧,则应保存于室温台氏液中,同时
肠管的一半暴露于空气中)。
(二) 仪器连接与调试
实验装置连接(如图7-5) 恒温水浴锅控制加热,恒温工作点定在38?左右。实验前将台氏液加入浴
锅及灌流浴槽高度的2/3处,开电源开关,使其加热,同时指示灯亮(若恒温控制失灵时,需用温度计随时
探测灌流浴槽中的温度)。熟悉换液方法。将充满空气的道氏袋与L型通气管相连接,将肠段一端系在通
气管钩上,另一端与张力换能器相连,此连线必须垂直,并不得与浴槽管壁、通气管和温度计接触,以免
磨擦影响记录,将换能器连接于生物信号采集与处理系统的输入端口。调节橡皮管上的螺丝夹,控制通气
量,使空气从通气管前端呈单个而不是成串逸出,以免振动悬线影响记录。(亦可用气泵供气)。用生物信
号系统记录小肠平滑肌运动曲线。
图7-5 标本连接示意图
BL-410系统的使用
1.选择“实验项目”中的“消化实验”选中“消化道平滑肌生理特性”。
2.相关参数设置的参考值:时间常数T?DC,高频滤波F?30Hz,显速?4.00S/div,增益?100g
3.用鼠标左键单击工具条上的“开始”按钮,调节参数至波形幅度、密度适当,待收缩曲线稳定后,
单击记录按钮。
() 自定。
()
1
1、待标本稳定后,记录小肠平滑肌收缩的对照曲线。
2、乙酰胆碱的作用 用滴管吸入0.01%乙酰胆碱向灌流浴槽内滴1~2滴。观察到明显效应后,立即从
排水管放出浴槽内含乙酰胆碱的台氏液,加入新鲜温台氏液,由此反复3次,以洗涤或稀释残留的乙酰胆碱,使之达到无效浓度,待小肠运动恢复后进行下一项。
3、去甲肾上腺素的作用 按上述方法将0.01%去甲肾上腺素加入浴槽内1~2滴,观察小肠运动的反应。当效果明显后,立即更换台氏液。
4、氯化钙的作用 加2%CaC1溶液2~3滴入灌流浴槽内,观察其反应,效果明显后迅速冲洗。 2
5、盐酸的作用 加1~2滴1mol/L HCl溶液入浴槽内,观察其反应。
6、氢氧化钠的作用 在(5)基础上加等容量的1mol/L NaOH溶液入浴槽内,观察其反应。按上述方法
更换台氏液,反复冲洗。
7. 温度的影响 将浴槽内台氏液放出,注入25?台氏液,观察平滑肌收缩有何改变,当效应明显后再
换入38?台氏液,持续一段时间后,再换入42?台氏液,观察收缩活动的变化(亦可根据室温的
具体情况选做其中的一项)。
测量实验结果,剪辑打印曲线,自行设计
表
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格。
1. 实验过程中必须保证标本的供氧(通气)及浴槽内台氏液的恒温(38?)。 2. 灌流浴槽内的液面高度应保持恒定。
3. 放大器零点调好后不要再移动旋钮,以免影响基线。
4. 上述各药液加入的量系参考数据,效果不明显者可以添加。
5. 每次实验效果明显后立即放掉含药液的台氏液,并冲洗多次,以免平滑肌出现不可逆反应。 6.每项处理必须有处理标记。
1.课前复习生理学“消化道平滑肌生理特性”理论教学内容和台氏液的成份、酸碱度及用途。 2.预测观察项目中各项处理的预期结果。
3. 取肠时为什么采用击昏家兔而不用在麻醉下进行?
4.要保持小肠平滑肌较好的活性,实验过程中要注意什么?
5.制备小肠平滑肌标本时,为什么要取小肠上段,尤其是十二指肠段的平滑肌? 6.结合你对本实验方案的理解和机能实验室条件,你认为本实验中应观察哪些指标? 7.如何从记录曲线中观察分析小肠平滑肌的生理特性?若出现非预期现象分析其原因。 【】
1.从记录曲线中观察分析小肠平滑肌与心肌、骨骼肌的收缩特性有何不同?说明其原理。 2.通过观察分析记录曲线变化,阐明各项处理引起的收缩频率、收缩强度和张力变化的机理。
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