首页 伊文思蓝(EB)检测血脑屏障(BBB)通透性

伊文思蓝(EB)检测血脑屏障(BBB)通透性

举报
开通vip

伊文思蓝(EB)检测血脑屏障(BBB)通透性1、测定血脑屏障完整性原理伊文思蓝属于一种常用的偶氮染料制剂,因其分子量大小与血浆白蛋白相近,而且在血液中与血浆白蛋白有很高的亲和力,由于正常状态下血浆白蛋白无法透过血脑屏障,所以染色时,如神经系统是完整的,与血浆白蛋白结合的依文思蓝无法使其着色。相反如果神经系统血脑屏障被破坏,依文思蓝就可以进入神经系统并使其着色。在荧光波长470与540nm各有一强峰,680nm处有一弱峰。其在组织中的含量常使用化学透析法和比色法进行检测。脑组织中血脑屏障的破坏,可以引起毛细血管的通透性增加,结合EB的白蛋白可通过BBB进入脑组...

伊文思蓝(EB)检测血脑屏障(BBB)通透性
1、测定血脑屏障完整性原理伊文思蓝属于一种常用的偶氮染料制剂,因其分子量大小与血浆白蛋白相近,而且在血液中与血浆白蛋白有很高的亲和力,由于正常状态下血浆白蛋白无法透过血脑屏障,所以染色时,如神经系统是完整的,与血浆白蛋白结合的依文思蓝无法使其着色。相反如果神经系统血脑屏障被破坏,依文思蓝就可以进入神经系统并使其着色。在荧光波长470与540nm各有一强峰,680nm处有一弱峰。其在组织中的含量常使用化学透析法和比色法进行 检测 工程第三方检测合同工程防雷检测合同植筋拉拔检测方案传感器技术课后答案检测机构通用要求培训 。脑组织中血脑屏障的破坏,可以引起毛细血管的通透性增加,结合EB的白蛋白可通过BBB进入脑组织,应用化学比色法甲酰胺测定脑组织EB渗出量,可以反映血脑屏障的开放程度,并在此基础上进一步探讨不同细胞移植干预与BBB通透性的效应关系。伊文思蓝灌注染色法结合共聚焦激光扫描显微镜观察脑切片中EB荧光强度,可以检测血脑屏障中血管形态的改变,同时对脑组织中渗入的EB含量进行定量分析。两者结合可以从形态学、组织定量上相互补充完善。2、实验准备试剂:2%EB、1%戊巴比妥钠、0.9%氯化钠、20U/ml肝素钠、二甲基甲酰胺器材:冰冻切片机、共聚焦激光扫描显微镜、分光光度计、恒温箱、离心机、注射器、输液器、解剖器械等3、测定方法1、各组动物处死前0.5h(也有的为1h、2h)尾静脉(或股静脉)注入2%EB(2ml/kg,也有的用3、4ml/kg)(剂量与提前时间成反比?)2、1%戊巴比妥钠30-40mg/kg麻醉后打开胸腔,心内灌注肝素生理盐水(0.9%氯化钠+20U/ml肝素钠)200-300ml(有文献提出当右心房流出液体变清澈时即可停止灌注),断头取脑作矢状切取半脑分离海马,一半脑组织进行冰冻切片,应用冰冻切片机行10-20μm切片,于共聚焦激光扫描显微镜下观察EB通透情况。3、另一半脑组织称重,剪碎置于二甲基甲酰胺(1ml/100mg脑组织,也可用三氯乙酸、甲酰胺)60℃孵育24h,1000r/min离心5min(有的作者认为脑组织在甲酰胺中匀浆呈胶状,上清液不能通过离心取得,水浴后直接取上清液比色),用分光光度计检测波长为620nm的吸光度。4、采用软件(Oringen7.0)进行数据分析,根据绘制的EB 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 曲线计算EB含量。4、试剂购买EB二甲基甲酰胺
本文档为【伊文思蓝(EB)检测血脑屏障(BBB)通透性】,请使用软件OFFICE或WPS软件打开。作品中的文字与图均可以修改和编辑, 图片更改请在作品中右键图片并更换,文字修改请直接点击文字进行修改,也可以新增和删除文档中的内容。
该文档来自用户分享,如有侵权行为请发邮件ishare@vip.sina.com联系网站客服,我们会及时删除。
[版权声明] 本站所有资料为用户分享产生,若发现您的权利被侵害,请联系客服邮件isharekefu@iask.cn,我们尽快处理。
本作品所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权,请谨慎使用。
网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽..)目的在于配合国家政策宣传,仅限个人学习分享使用,禁止用于任何广告和商用目的。
下载需要: 免费 已有0 人下载
最新资料
资料动态
专题动态
is_833902
暂无简介~
格式:doc
大小:12KB
软件:Word
页数:2
分类:医药卫生
上传时间:2019-04-23
浏览量:221