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[资料]饲估中粗蛋白的测定方法.doc

[资料]饲估中粗蛋白的测定方法

快乐的名侦探可烂
2017-10-06 0人阅读 举报 0 0 暂无简介

简介:本文档为《[资料]饲估中粗蛋白的测定方法doc》,可适用于综合领域

资料饲估中粗蛋白的测定方法饲料中粗蛋白的测定方法本标准参照采用ISO《动物饲料氮含量的测定和粗蛋白含量计算》主要内容与适用范围本标准规定了饲料中粗蛋白含量的测定方法。本标准适用于配合饲料、浓缩饲料和单一饲料。引用标准GB化学试剂滴定分析(容量分析)用标准溶液的制备原理凯氏法测定试样中的含氮量即在被催化剂的作用下用硫酸破坏有机物使含氮量转化成硫酸铵。加入强碱进行蒸馏使氨逸出用硼酸吸收后再用酸滴定测出氮含量乘以换算系数计算出粗蛋白含量。试剂硫酸(GB):化学纯含量为无氮。混合催化剂:g五水硫酸铜g硫酸钾或无水硫酸钠均为化学纯磨碎混匀。氢氧化钠(GB):化学纯水溶液(MV)。硼酸(GB):化学纯水溶液(MV)。混合指示剂:甲基红乙醇溶液溴甲酚绿乙醇溶液两溶液等体积混合在阴凉处保存期为三个月。盐酸标准溶液:邻苯二甲酸氢钾法标定。mol盐酸(HCL)标准溶液:ml盐酸(GB)分析纯注入ml蒸馏水中。mol盐酸(HCL)标准溶液:ml盐酸(GB)分析纯注入ml蒸馏水中。蔗糖(HG):分析纯。硫酸铵(GB):分析纯干燥。硼酸吸收液:硼酸水溶液ml加入溴甲酚绿乙醇溶液ml甲基红乙醇溶液ml氢氧化钠水溶液ml混合置阴凉处保存期为一个月(全自动程序用)。仪器设备实验室用样品粉碎机或研钵。分析筛:孔径mm(目)。分析天平:感量g。消煮炉或电炉。滴定管:酸式(A级)、mL。凯氏烧瓶:mL。凯氏蒸馏装置:常量直接蒸馏式或半微量水蒸气蒸馏式。锥形瓶:、mL。容量瓶:mL。消煮管:mL。定氮仪:以凯氏原理制造的各类型半自动、全自动蛋白测定仪。试样的选取和制备选取具有代表性的试样用四分法缩减至g粉碎后全部通过目筛装于密封容器中防止试样成分的变化。分析步骤试样的消煮称取试样g~g(含氮量mg~mg)准确至g无损失地放入凯氏烧瓶中加入g混合催化剂与试样混合均匀再加入mL硫酸和粒玻璃珠将凯氏烧瓶置于电炉上加热开始小火待样品焦化泡沫消失后再加强火直至呈透明的蓝绿色然后再继续加热至少h。氨的蒸馏常量蒸馏法将试样消煮液冷却加入mL~mL蒸馏水摇匀冷却。将蒸馏装置的冷凝管末端浸入装有mL硼酸吸收液和滴混合指示剂的锥形瓶内。然后小心地将凯氏烧瓶中加入mL氢氧化钠轻轻摇动凯氏烧瓶使溶液混合均匀后再加热蒸馏直至流出体积为mL。降下锥形瓶使冷凝管末端离开液面继续蒸馏min~min并用蒸馏水冲洗冷凝管末端洗液均需流入锥形内然后停止蒸馏。半微量蒸馏法将试样消煮液冷却加入mL蒸馏水转入mL容量瓶中冷却后用水稀释至刻度摇匀做为试样分解液。将半微量蒸馏装置的冷凝管末端浸入装有mL硼酸吸收液和滴混合指示剂的锥形瓶内。蒸汽发生器的水中应加入甲基红指示剂数滴硼酸数滴在蒸馏过程中保持此液为橙红色否则需补加硫酸。准确移取试样分解液mL~mL注入蒸馏装置的反应室中用少量蒸馏水冲洗进样入口塞好入口玻璃塞再加入mL氢氧化钠溶液小心提起玻璃塞使之流入反应室将玻璃塞塞好且在入口处加水密封防止漏气。蒸馏min降下锥形瓶使冷凝管末端离开吸收液面再蒸馏min用蒸馏水冲洗冷凝管末端洗液均流入锥形瓶内然后停止蒸馏。蒸馏步骤的检验精确称取g硫酸铵代替试样按或步骤进行操作测得硫酸铵含氮量为否则应检查加碱、蒸馏和滴定各步骤是否正确。滴定用法蒸馏后的吸收液立即用molL或molL盐酸标准溶液滴定溶液由蓝绿色变成灰红色为终点。空白测定称取蔗糖g代替试样按测定步骤进行空白测定消耗molL盐酸标准溶液的体积不得超过mL。消耗molL盐酸标准溶液体积不得超过mL。分析结果的表述计算见下式:粗蛋白质()=(VV)×C××m×V’V×式中:V滴定试样时所需标准酸溶液体积mLV滴定空白时所需标准酸溶液体积mLC盐酸标准溶液浓度molLm试样质量gV试样分解液总体积mLV’试样分解液蒸馏用体积mL、与ml盐酸标准溶液【c(HCL)=molL】相当的、以克表示的氮的质量。氮换算成蛋白质的平均系数。

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