【doc】人乳头状瘤病毒与子宫内膜腺棘癌及腺鳞癌的关系

【doc】人乳头状瘤病毒与子宫内膜腺棘癌及腺鳞癌的关系 人乳头状瘤病毒与子宫内膜腺棘癌及腺鳞 癌的关系 人放松私毫私内腰-昧棘8摊-l80- f.一f别 人乳头状瘤病毒与子宫 ChinJObst+tGyneco【,Marchl996,Vo1.31.No.3 及系 CzerwenkKLz',/k 近年来的研究表明,90的宫颈癌含有人乳头状 瘤病毒(HPV)DNA.由于子宫内膜与子宫颈内膜在解 剖学上的连续性和组织学上的相似性,HPV感染是否 _旦可导致子宫内膜癌,因选择的病例及采用检测 方法 快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载 匕的差别,研究结果有很大差异.为了进一步探讨 ItPV与子宫内膜癌发生的关系,本研究应用杂交俘获 系统(hybridcapturesystem)和斑点杂交法(dotblot), 检测了38例伴有鳞状上皮成分的子宫内膜癌中14种 常见于肛门一生殖道部位的HPV亚型.现将结果报道 如下 一 ,资料与方法 1.研究对象:收集1980年1月至1989年12月间 维也纳大学附属妇产科医院38倒手术切除的子宫标 本,其中子宫内膜腺棘癌33例.腺鳞癌5例均经病理 幢查证实肿瘤分类采用FIGO(I988年)的 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 .手术 标本经10甲醛液固定,石蜡包埋切片. 2.方法:(1)组织DNA提取:将病理组织蜡块切 戚5/sin厚的薄片3张.经脱蜡,脱苯,水化后,用蛋白酶 K消化,55c下8小时.IO0"C煮沸l0分钟,离心沉淀, 青有DNA的上清液置于--20C待测(2)杂交俘获系 境0,:其检测限为10pg/LHPV—DNA所用药盘由美国 DigeneDiagnostics公司提供,一批试验可同时测定l4 种HPV亚型及区别出低度危险(HPV6,1】,42,43,44) 和中,高度危险(HPV16,18,31,33,a5,45,51,52,56) 的HPV.操作步骤按药盒说明 书 关于书的成语关于读书的排比句社区图书漂流公约怎么写关于读书的小报汉书pdf 进行.每批实验均含 阴,阳性对照各3份.发光测定仪Leader5O为美国 trenProbe公司生产.当被检标本的相对光单位值 (RLU)与低度危险的HPV阳性对照比值(RLU/ PCAj)?1.0时,即为}iPV6,11,42,43,44型中的一 种或多种亚型阳性;同样,被捡标本的RLU值与中,高 度危险组的阳性对照比值(RLU/PCB~)?1.0时,为 HPvl6,18,al,33,a5,45,51,52,56亚型中的一种或多 种阳性.如被检标本在两组中的比值均?1.0.即为同 时有低,中,高度危险组的一种或多种HPV-DNA存 在;反之,则被视为HPVDNA阴性或其水平低于药盘 作者单位100037北京?解放军第三0四医院妇产科(鲁 水鲜);奥地利维也纳大学妇产科病理研究所(CzerwenkaK) 检测限.(3)斑点杂交法:采用ViratypeHPV—DNA分 型药盒(美国DigeneDiagnostics司产品).它包括可 检测HPV6,11,16,18,31,33,35等亚型的P—HPV— RNA探针经放射自显影,x线胶片出现圆形斑者 为阳性 二,结果 标本经杂交俘获系统测定,3例子宫内膜腺棘癌呈 现低度危险的HPV亚型阳性,5倒腺棘癌,1例腺鳞癌 可疑阳性;未发现中,高度危险的HPV亚型阳性.经斑 点杂交法对相同标本再次检测,仅1例子宫内膜腺棘 癌仍显示HPV6,11型阳性,其余均阴性 三,讨论. 1.HPV与子宫内膜癌的关系:DeVillers等fz;于 1986年首次在?恻子宫内膜标本中发现8倒含有 HPV16-DNA.之后,Bergeron等采用Southern印迹 杂交技术测定了一组不同病理情况的子宫内膜,无1 例HPV阳性.有学者采用更敏感的聚台酶链反应技术 (PCR)对正常及恶性子宫内膜,卵巢组织进行了洳定, 发现了HPV16,18一DNA,只是子宫内膜中的HPV— DNA含量远远少于绝大多数宫颈及外阴病灶,.且 在子宫内膜腺棘癌标本的鳞状上皮成分中,发现了一 些类似宫颈上皮内被认为是HPV感染所特有的形态 学变化,如挖空细胞,核周病毒颗粒等m.对于子宫内 膜中如此少量的HPVDNA是否可构成子宫内膜癌的 致癌固素,尚不能肯定.也不排除来自宫颈污染的可 能.本研究为提高检出率,亦选择了伴有鳞状上皮成分 的子宫内膜癌作为对象,但在光镜下井未发现HPV感 染所致的典型形态学变化.采用两种方法对常见感染 于肛门一生殖道的l4种HPV亚型进行检测.均为阳性 的只有1例(HPV8,11).此结果与Bergeron等0:的结 果一致提示,尽管子宫内膜在解剖和组织学上与宫颈 有密切关系.HPV被认为是刺激腺上皮鳞状化生的因 素之一,但伴有鳞状上皮成分的子宫内膜癌与HPV感 染之间似乎井无密切关系. 2.子宫内膜免受HPV感染的机理:子宫颈为 HPV易感部位,而邻近的子宫内曦却很少受其侵犯, 此粪似情况也见于肛门直畅部位的腺癌. 本研究结果提示,HPV对人体的感染进而导致癌 甲耨肿招匕田罗,9 中华妇产科杂志【996年3月第【卷帮.{期 变.具有高度部位和组织特异l哇子宫内膜很可能不是 HPV适宜的宿主上皮,不利于HPV的成熟,发育与复 制另外,在正常情况下.子宫内膜还受到宫颈粘螭栓 的保护.使其基本处于无菌状态 3.杂交俘获系统与其它方法在检测HPV中的价 值和比较:杂交俘获系统不需用同位素.操作方法简 便,迅速,一批可同时测定多种HPV亚型,与斑点杂 交,PCR等方法有很好的相关性.为一种临床筛查 HPV感染的有效方法】而敏感的PCR技术在检测 HPV的价值上,意见尚有分歧.由于tK'R的敏感眭过 高.而可能限制一十阳性结果应有的预测价值故须 慎重对待由PCR法检测所得到的结果. 参考文献 lFarthingA,Masrer~nP,MasonWP-etalHumanpapil tomavirusdetectionbyhybridcaptureanditspossibleclinical useJClinParhol199447:649. 2DeVillersEM.SchnNderA.(;rossG.eta1.Analysisof benignandmalignanturogenitaltum.rsforhumanpapUlo mavirusinfectionbylabellingcellularDNA.MedMicrobiol ImmBNo【,l986,l74:281. 3BergeronC-ShahKDanielRc.ta1.Searchforhuman papillomavlruses1nnormal,hyperphmtic.andneoplastic endometriaObstetGyne~uj,l98872=38j 4KerIywAnnisPG,BarryJA,elalAdencacanthoma1 theendometrium:morphologicalchangesinducedbyhuman papilIomavirus.JClinPathol,1990,421554 5Mild~LangnsehK,BerkerG-】:iaingT.H?"pap[[Io mavirusand一myc/cerhB2inuterineandvulvarlesions VirchowsArchAPatho[AnatHistopatho1.S914l9. 479 6I_aiCHtHsuehS,【】nCYeta1.Humanpap[1lonla'virusin benignandmalignantovarianandendonaetrialtissues.1ntJ GynecolPatho1.1992.1】:210 7KoulosJ.SymnmnsF-Chum~sJ,e1a1.Humanpapil[~ mavhrusdetectioninadenicarcinomaofthe?nus.Mod… Pathol,199l,4:58. 8LorinczATtReidR.Jen~onAB,etalHumanpapil[~ mavirusinfectionofthecervix:relativeriskassoc.iatio~.f I5commonant,genltaltypes.ObsltGyneco1.199279 328. (收稿:1995—09—23修:l9951218) (本文编辑:姜民慧) f引,一,2 重组人肿瘤抚死因子对卵巢癌3AO细胞的影响 尹德领张惜阴,/丰有士曹斌融周先藁吴直江7;7君7 肿瘤坏死圈子(tHn3ornecrosisfactor,TNF)以其 特异性杀伤肿瘤细胞作用.早巳引起医学界关注.本研 究采用流式细胞和电镜技术检删了重组^肿瘤坏死固 子(rhTNF)处理前后人卵巢癌3AO细胞cerbB2的表 选和形态学改变.探讨rhTNF对其影响.并为进一步 临床应用rhTNF提供依据. 一 材料与方凌 1村料来源:rhTNF由第二军医大学免疫教研室 提供.比活性为6×10U."mg,所珂j胰蛋白酶为美国 Sign38公司产品:小牛血清为上海崇明新星小牛血站产 品.RPMI1640为El本制药株式会社产品:cerbB2单 克隆抗体为美国OncogeneScience公司产品;异硫氰酸 作肯1#:20u,9.1l海抖^学Il产科医院t科rp德 领,张惜.盯.曹艋靴)乖f理科(先荣),中J对嵇学鞋』 海细咆生物研昕(吴[) 荧光素标记羊抗鼠第二抗体(F1TC)由第二军医大学 长征医院临床免疫中心提供.人卵巢癌3AO细胞株为 上皮性卵巢癌细胞,由中国科学院上海细胞生物研究 所提供 23AO细咆在rhTNF条件下的培养方法:3AO 细胞在37C,5CO=及饱和湿度下的温箱由松盖培 养.培养液为RPM11640俄,内含10小牛血清. 50kU./L庆大霉素细胞呈贴壁生:毛.每5,6天传代1 跌.传代时古02胰蛋白酶和002乙二胺四己 酸(EDTA)的磷酸盐缓I由液(PBS)消化.细胞密度5× l0/l_,经rhTNF(浓度为5×10/I)培养48小时后行 c—erbB2蛋白测定及电镜下的形态学观察 3cerbB2蛋白的删定及形态观察方法:采用氚式 细胞间接爱光技术对3AO细胞cerbB2蛋白测定.收 集培养细胞(细胞数勾1『I.活率:,95J肋cerbI32鼠 抗人单克隆抗体1140下时摇晃1小时,pH74