荧光分光光度计
荧 光 分 光 光 度 计
实验目的:1、学会荧光分光光度计的原理和使用;
2、测量蒸馏水的特征谱线;
3、研究各种物质的特征谱线及规律。 实验重点:荧光分光光度计的原理和使用 实验难点:研究各种物质的特征谱线及规律 原理:WGY—10型荧光分光光度计具有双单色器，可以记录物质的激发光谱和
荧光光谱，采用计算机完成仪器的系统控制和数据采集。其工作原理如下:
由光源发出的光，通过激发单色器后变
成单色光，而后照在荧光池中的被测样
品上，由此激发出的荧光被发射单色器
收集后，经单色器色散成单色光而照在
光电倍增管上转换成相应的电信号，经
放大器放大反馈入A/D转换单元，将
模拟信号转换成相应的数字量，并通过
显示器或打印机显示记录下被测样品
的谱图，这就是荧光光度计的基本原理。 基本结构
整机基本结构如图所示
1、光学系统
仪器的光学系统如图所示
光学系统由激发单色器，发射单色器组成
激发单色器:波长区间 220—760nm
光栅 1200L/mm 闪耀波长 250nm
焦距 250 mm
口径 1 :4
更换一块600L/mm，闪耀波长760nm激发波长区间可扩展到1500nm
发射单色器:波长区间 220—760nm
光栅 1200L/mm 闪耀波长250nm
焦点 250mm
口径 1:4
2、滤光片
激发单色器滤光片共四片，其工作区间如下:
第一片 340—600nm 第二片 600—760 nm 第三片 760—1300 nm 第四片 1300—1500 nm 发色单色器滤光片共五片，其工作区间如下
第一片 220—280 nm 第二片 280—380 nm 第三片 380—500 nm 第四片 500—620 nm 第五片 620—800 nm
3、波长扫描
波长扫描是采用正弦机构、光栅转台、杠杆、丝杆组成。该系统是由数据处理单元控制的步进电机转动，来驱动丝杆转动并使光栅转动的。高精度丝杆，及计算机控制能自动消除空回，提高波长精度及重复性。
4、狭缝选择
两个单色器的狭缝机构都是由计算机控制步进电机，转动实现光谱宽度的自动选择，激发单色器，发射单色器的光谱宽度相同。
光谱宽度，共六档(2、4、6、8、10、20 nm)。
5、滤光片切换机构
是由计算机软件控制步进电机转动实现滤光片自动切换的。 实验要点:1、要先打开氙灯的开关，后打开荧光光度计的开关、电脑的开关。 2、点击主界面的“激发”按钮，可输入激发的波长。蒸馏水的激发波长是350nm。 3、工作模式:扫描方式:发射单色。激发波段:紫外—可见光。 扫描速度:1纳米。采集次数16—38次。负高压:150—220(以使波形基本不消顶且尽可能幅度高为准)。起终范围:300—800纳米。
最大值:100，最小值:0。激发狭缝和发射狭缝全为10纳米。 滤光片:使用
以上是测量蒸馏水特征谱线的实验参数，如果测量其他物质要自己通过反复的实验确定。
实验
要求
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:,、将同一种物质，从低到高，选择不同的激发和发射波长(例如维生素B1的激发波长可选320、350、390、420、430、450、470、490纳米，发射波长要相应的调节并和起始波长一致)，运行扫描谱线并分别保存。然后在同一坐标上显示出各条谱线(用打开“文件”即可)，找出最佳激发波长(对应拉曼峰圆滑且最高的，在最佳拉曼峰的附近可多扫几条谱线)，通过对比谱线，研究其规律并做出详尽的结论。
,、点击“操作人”右侧的带,个点的长方钮，输入各种信息(姓名、样品名称、激发波长、采集次数、负高压、日期等)，打印出待测物质的特征谱线(只打印拉曼峰圆滑且最高的那个特征谱线)。
,、要求测蒸馏水、维生素,1、酒精等物质的谱线，找出最佳激发波长，并分别打印出待测物质的特征谱线。
,、将维生素,1加入,倍的蒸馏水，找出最佳激发波长，并与原维生素,1比较。
,、总结并讨论上述实验结果及规律。
注意事项:测其他物质的最佳激发波长时，应多次测量，找到最好的波形
实验总结
通过做荧光分光光度计的实验，掌握了该仪器的基本原理，学会了该仪器的软件操作和和测量方法，掌握了测量待测物质的最佳激发波长的方法，了解了怎样去研究各种物质的特征谱线及其规律。通过做这个实验，学会了测量分子光谱，认识到物理学的光谱测量技术在现代科技和各行各业有着广泛的、极为重要的应
用，开拓了自己的知识面。也使得自己更加热爱物理学专业。
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