【doc】印度雕蚀菌感染三带喙库蚊幼虫的组织化学研究

【doc】印度雕蚀菌感染三带喙库蚊幼虫的组织化学研究 印度雕蚀菌感染三带喙库蚊幼虫的组织化 学研究 『6一门 ? 168? (二1 中国寄生虫学与寄生虫病杂志1g93年第L1卷第3期 印度雕蚀菌感染三带喙 库蚊幼虫的组织化学研究 熊兰连惟能刘素兰尺文斗.f 上海医科大学寄生虫学教研室上海200032 提要本文采用组织化学技术,对印度雕蚀菌感染的三带喙库蚊幼虫的糖原,蛋白质,核酸 (DNA,RNA)进行显微摄影及组成定量的图像分析结果 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 明感染的幼蚊组织中糖原,蛋白质核 酸的含量均明显地较正常的幼蚊为少.灰度定量测定也表明两组幼蚊之间的差别非常显着.提示 该菌感染对幼蚊上述生化成分有明显的影响,可能是其对妨蚊致病的重要机制. 关麓词!垦竺三芷喳童墼里 在蚊虫防制中,由于化学杀虫剂的污染 及蚊虫抗药性的产生与扩大,因而,生物防治 已成为综合治理灭蚊的一个重要组成部分 刘索兰等:首先报告了印度雕蚀菌(Coelo— momycesindica)对幼蚊的影响,在上海青浦, 松江郊县的稻田,秧田中发现有三带喙库蚊 幼虫(L—k),但在受到印度雕蚀菌感染后 可导致死亡.尔后,我们叉对该菌的孢子囊作 了电镜观察,并阐明其超微结构0].由于三带 喙库蚊是乙型脑炎的主要传播媒介,因此防 制该蚊种就具有重要意义.为了探讨该菌对 幼蚊的致病机制,故采集了该菌自然感染的 和正常的三带喙库蚊幼虫作了切片的组织化 学观察,并进行了质与量的比较,现将结果报 告如下. 材料和 方法 快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载 1实验材料 于1992年7—9月间,曾4次前往奉贤 五四农场,在秧田和稻田中采集了印度雕蚀 菌感染的和正常的三带喙库蚊幼虫(L|)各 500条作为实验材料. 2组织化学染色法 2.1用过碘酸一Schiff(PAS反应)染 色法显示糖原0.以Carnoy液固定,按常规 作石蜡包埋切片,经此特殊染色后封片.对照 片用醋酐吡啶液处理.结果组织内的糖原呈 紫红色,对照组则不显红色. 2.2用溴酚蓝水溶液反应(Mazia法) 显示总蛋白或硷性蛋白[".以中性甲醛液固 定,常规制片,染色后封片.结果组织中的总 蛋白或硷性蛋白呈鲜蓝色. 2.3用Brachet的甲基绿一派咯宁改 良染色法显示核酸].以Carnoy液固定,同 样制片,经此染色后封片.对照片用HC1处 理.结果DNA染呈蓝紫色,RNA呈红色,对 照组则不显色. 3图像分析的灰度测定 将上述组织化学染色标本置于全自动图 像分析仪(MIAS300型)中,各测定lO一13 个标本,自动记录灰度的等级(O一255级), 并用t检验作统计学处理,比较感染的和正 常的幼蚊组织化学组成含量的差别. 4显微摄影 将上述标本置于Olympus(VANOX)自 动拍照显微镜下摄影,冲印后的图片作为比 较感染的与正常的幼蚊组织化学含量差别的 依据.' 结果 1糖原 1.1正常三带喙库蚊幼虫的头部,除复 眼呈黑褐色外,所有肌肉组织,包括上唇肌, 上内唇伸肌,咽肌,下颚收肌与屈肌和上颚收 *诙课 题 快递公司问题件快递公司问题件货款处理关于圆的周长面积重点题型关于解方程组的题及答案关于南海问题 获国家自然科学基金资助(项目编号3870673) 肌内均富含糖原;胸部体壁表层,血体腔中的 血淋巴细胞以及涎腺,胸肌和前胃盲囊壁上 皮细胞内均示含有糖原;腹部体壁与胸部相 似,胃,肠壁和马氏管的上皮细胞亦均含有糖 原,肠的内含物也有糖原出现(图l,2) 1.2印度雕蚀菌感染的三带喙库蚊幼 虫的头部,复眼呈黑褐色,肌肉组织内有该菌 孢子囊数个,均示有糖原分布;胸部体壁和肌 肉组织糖原含量少;但可见许多富含糖原的 该菌孢子囊,其他结构均未显示;腹部体壁较 ?169- 薄且有多处断裂.含少量糖原(图3,4).肠壁 上皮细胞及肠内含物中的糖原同体壁相似, 但在血体腔中可见富含糖原的孢子囊(图 5).表明幼虫受该菌感染后,糖原含量减少. 1.3从图像分析仪所测的幼虫头,胸, 腹三部灰度级数,经统计学处理结果表明,正 常幼蚊的PAS反应灰度均低于感染组,其间 具有非常显着性差异(P<0.001)(表1) (注:灰度级数愈低者其着色愈深) 衰1.幼虫切片的PAS反应灰度t控马盘 Table1Groupedt-testforthe2r日ylevelOfPASreactionoBlarvalsections 2蛋白质 2.1正常三带喙库蚊幼虫头部的复眼 亦呈黑褐色,肌肉组织内示有不同含量的硷 性蛋白质;胸部体壁表层内则含量较少,而涎 腺,前胃壁及胸肌内均有丰富的硷性蛋白质; 腹部体壁的含量较少,肌肉呈索条状,硷性蛋 白质含量丰富,肠壁及肠内含物内的含量甚 少(图6). 2.2感染的三带喙库蚊幼虫的头,胸 部,由于该菌孢子囊感染,体壁破损断裂,残 存的少量肌肉组织内示有丰富的硷性蛋白 质,前胃壁上皮细胞内含量减少}腹部的体壁 大都破溃,内含孢子囊较多,肌肉组织减少, 内含硷性蛋白为步量,肠壁上皮内的与残存 肌肉中的含量相似,而肠内含物中含硷性蛋 白质量更少(图7.8). 2.3图像分析与灰度t检验表明,感染 该菌的地虫与正常幼虫之间有非常显着性差 异(表2). 寰2.幼虫切片的;l酚蓝反应灰度t检马盘 Table2.Groupedt-testforthegraylevelofbromphenolbluereactiononlarvalse~tIons ?170? 3核酸 3.1正常三带喙库蚊幼虫的头部,复眼 呈黑褐色,肌肉组织含有丰富的RNA.胸部 的体壁表层含有少量,肌肉组织内的含量亦 丰富.腹部的体壁似含少量RNA,大量的血 淋巴细胞,肌肉组织内含有丰富的RNA,肠 壁则含量甚少,肠内含物中则有较多的DNA 或RNA的颗粒与团块(图9). 3.2感染的三带喙库蚊幼虫头部,因含 有一些孢子囊,故肌肉组织少,仅见少量 RNA.胸部体壁的RNA含量少,并有断裂, 孢子囊较多,胸肌似线条状,前胃盲囊壁示含 RNA.腹部体壁表层疏松并有破损,内含许 多孢子囊,故肌肉组织少,但含RNA,肠壁上 皮内的含量较少,肠内含物则有丰富的DNA 的颗粒与团块(图10).肠上皮细胞和马氏管 的上皮细胞核内均示有DNA颗粒,核仁含 有RNA(图ll,12). 3.3图像分析与灰度t检验表明,感染 该菌的幼虫与正常幼虫之间的差别非常显着 (表3). 衰3.幼虫切片的甲基辱一灌港宁反应灰度t幢验 Table3.Gmudt-testgotthegraylevelofmethylgreen-pyronlnere~lon蚰lawalsections 讨论 关于三带喙库蚊幼虫的组织化学研究, 尚未见文献报道,日本学者Asakura曾先后 报告了东乡伊蚊(Aedestogoi)幼虫的胃肠道 在渗透调节中作用与盐类排泄情况,因该蚊 孳生于海水中,故通过对该蚊血淋巴中的钠 离子浓度和氯离子的组织化学观察阐明其机 制.本研究对三带喙库蚊幼虫体内糖原, 蛋白质和核酸的组织化学观察,在国内外尚 属首次. 本实验结果表明,印度雕蚀菌感染的兰 带喙库蚊幼虫的糖原,蛋白质,核酸的含量均 明显地少于正常三带喙库蚊幼虫,图像分析 与灰度定量测定,也显示感染组与正常组幼 虫之间的差别非常显着.提示该菌感染时,对, 此幼蚊的重要生化成分均有明显的影响,这 些变化,可能是其对幼蚊致病的重要原因. 图像分析是一种新的形态定量技术,将 组织化学染色切片上的图像,通过电视摄像 机扫描摄入,在屏幕上显示,同时由计算机进 行图像着色程度(灰度)的数据处理,而获得 较客观的定量效果,本文应用这一技术,增强 了科学性,达到质与量的评估效能,该技术值 得推广应用.(本文图1—12见插图第9页). 参考文献 1.刘素兰.等.昆虫1982;25.409 2.刘素兰.等.上海第一医学院1985I12t68 3.TroyerH.PrinciplestldTechniquesofHistochem一 [stryLittleBr0wnndCompsny(In~.)19801104 4.MazlaD.et.B】But【1953I104I57 5.BrachetJ.QuartJMicroscopicalScience1953I94i1 8.AsakursK.JCompPhysiol&BiochemSystEnviron Phys[o[1980I138I59 7.AsakuraK.An【l0tZoo【Jpn1988|55I1 1993年3月29日收稿1993年4月19日修回 ,?,t?.? 中国寄生虫学与寄生虫病杂志1993年第n卷第3期?17l? STUDIESoNTHEHISTOCHEMISTRYOFCULEXTRITAEN10RHYNCHUSLARVA E INFECTED'lHcoEL0MoMcEslNDIcA SunJian—Hua,WangZheng—Yi,LianWei—Neng,LiuSu—Lan DepartmentofParasitology,S~nghaiMedicalUniversity,Shanghai200032 ABSTRACT AsectionslsurveywithhistochemicaltechniquewascarriedOUtonCu&xt~tae— nior^vnchuslarvaeinfectedwithCoelomomycesindicaincomparisontothenoninfectedlarvae. Studieswerepursuedbyusingmicrographandimaginganalysis.Theresultsshowedthatthe glycogen,proteinandnucleicacid(RNAandDNA)resctionintheinfectedgroupwereless thanthoseofthecontrolgroup.Thegraylevelassessmentintissueimagingshowedmarked differencebetweenthetwogroups.ItissuggestedthatC.indicahassignificanteffectonthe abovebiochemicalelementsofthemosquitolarvae,whichmightbeconsideredanimportant mechanisminthepathogenicityofthefungus. Keywords-C~elomomycesindies.tritaeniorhynchus.hJstochemistry *Tb,isprojectw拈supportedtheNe,tiolmlNaturalsceu耐ati口nChlv,a(3870073) 吡喹酮治疗后出现阿一斯综合征一例报告 江西省新建县血吸虫病防治站新建330100黎振星 患者,男,3】岁,农民,住血吸虫病流行区.15年 前曾接受过1次锑荆治疗血吸虫病,现血吸虫病普 查间接血凝试验阳性,体检:未发现异常. 于1990年3月15日服用毗喹酮.呲喹酮(上海 天平药广产,批号891201)按40mg/kg计算,总剂 量为2200mg,1次顿服.上午l0时半服药.中午l2 时左右,自觉头晕,恶心,腹部隐痛.检查心律齐,心 率80次/min.给予阿托品0.9mg口服,后呕吐1 次,吐出少许食物及阿托品药片.下午1时半患者上 厕所时,自觉头晕加剧,在厕所旁蹲下时突然昏倒, 四肢抽搐,全身抖动,面色苍白,失去知觉.检查:脉 搏未触及,心音徽弱,心律不齐,心率缓慢,心音偶而 昕不见.皮下注射阿托品2nag,症状未见缓解.5 rain后卫用同剂量阿托品皮下注射1次,稍有缓解. 但全身颤抖,四肢抽搐转为间歇性.10min后又发 作加重,脉搏未触及,心音徽弱,心率缓慢,时而心音 听不见.再皮下注射阿托品2nag后,患者面色逐渐 转红,脉搏可触及,心率120次/rain,抽搐,颤抖停 止.10后又皮下注射阿托品2rag,护送去当地 乡村卫生院观察,将患者抬上病床时,又突然面色苍 白,四肢抽搐,心律不齐,心率缓慢,当即静脉推注加 入阿托品2nag的2葡萄糖20ml,抽搐新停,面 色转潮红.心律齐,心率120次/mln.患者逐渐苏醒, 30mln后,iv滴注10葡萄糖1000ml,内加氢化可 的松100nag及阿托品3mg,持续4h.患者完全苏 醒,自行下床.观察一夜未再发作,次日出院. 1990年4月11日收稿1990年8月14日修回