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实验动物采血完全指南.doc

实验动物采血完全指南

我爱水蜜桃奶茶
2019-02-27 0人阅读 举报 0 0 0 暂无简介

简介:本文档为《实验动物采血完全指南doc》,可适用于工程科技领域

实验动物采血完全指南凡用血量较少的检验如红、白细胞计数、血红蛋白的测定,血液涂片以及酶活性微量分析法等,可刺破组织取毛细血管的血。当需血量较多时可作静脉采血。静脉采血时,若需反复多次,应自远离心脏端开始,以免发生栓塞而影响整条静脉。例如,研究毒物对肺功能的影响、血液酸碱平衡、水盐代谢紊乱,需要比较动、动脉血氧分压、二氧化碳分压和血液pH值以及K、Na、CI离子浓度,必须采取动脉血液。采血时要注意:⑴采血场所有充足的光线室温夏季最好保持在℃,冬季,℃为宜⑵采血用具有采用部位一般需要进行消毒⑶采血用的注射器和试管必须保持清洁干燥⑷若需抗凝全血,在注射器或试管内需预先加入抗凝剂取少量血a尾静脉大鼠、小鼠b耳静脉兔、狗、猫、猪、山羊、绵羊c眼底静脉丛兔、大鼠、小鼠c舌下静脉兔d腹壁静脉青蛙、蟾蜍e冠、脚蹼皮下静脉鸡、鸭、鹅取中量血a后肢外侧皮下小隐静脉狗、猴、猫b前肢内侧皮下头静脉狗、猴、猫c耳中央动脉兔d颈静脉狗、猫、兔e心脏豚鼠、大鼠、小鼠f断头大鼠、小鼠g翼下静脉鸡、鸭、鸽、鹅h颈动脉鸡、鸭、鸽、鹅取大量血a股动脉、颈动脉狗、猴、猫、兔b心脏狗、猴、猫、兔c颈静脉马、牛、山羊、绵羊d摘眼球大鼠、小鼠采动物品种最大安全采血量(ml)最小致死采血量(ml)小鼠大鼠豚鼠兔狼狗猎狗猴割(剪)尾采血当所需血量很少时采用本法。固定动物并露出鼠尾。将尾部毛剪去后消毒,然后浸在℃左右的温水中数分钟,使尾部血管充盈。再将尾擦干,用锐器(刀或剪刀)割去尾尖cm,让血液自由滴入盛器或用血红蛋白吸管吸取,采血结束,伤口消毒并压迫止血。也可在尾部作一横切口,割破尾动脉或静脉,收集血液的方法同上。每鼠一般可采血余次以上。小鼠每次可取血ml,大鼠~ml。鼠尾刺血法大鼠用血量不多时(仅做白细胞计数或血红蛋白检查),可采用本法。先将鼠尾用温水擦拭,再用酒精消毒和擦拭,使鼠尾充血。用号或号注射针头,刺入鼠尾静脉,拔出针头时即有血滴出,一次可采集~mm。如果长期反复取血,应先靠近鼠尾末端穿刺,以后再逐渐向近心端穿刺。眼眶静脉丛采血采血者的左手拇食两指从背部较紧地握住小鼠或大鼠的颈部(大鼠采血需带上纱手套),应防止动物窒息。当取血时左手拇指及食指轻轻压迫动物的颈部两侧,使眶后静脉丛充血。右手持续接号针头的ml注射器或长颈(~cm)硬质玻璃滴管(毛细管内径mm),使采血器与鼠面成℃的夹角,由眼内角刺入,针头斜面先向眼球,刺入后再转度使斜面对着眼眶后界。刺入浓度,小鼠约~mm,大鼠约~mm。当感到有阻力时即停止推进,同时,将针退出约mm,边退边抽。若穿刺适当血液能自然流入毛细管中,当得到所需的血量后,即除去加于颈部的压力,同时,将采血器拔出,以防止术后穿刺孔出血。若技术熟练,用本法短期内可重复采血均无多大困难。左右两眼轮换更好。体重g的小鼠每次可采血ml体重g大鼠每次可采血ml,可适用于某些生物化学项目的检验。断头取血采血者的左手拇指和食指以背部较紧地握住大(小)鼠的颈部皮肤,并作动物头朝下倾的姿势。右手用剪刀猛剪鼠颈,约的颈部前剪断,让血自由滴入盛器。小鼠可采用约~ml大鼠约ml。心脏采血鼠类的心脏较小,且心率较快,心脏采血比较困难,故少用。活体采血方法与豚鼠相同。若做开胸一次死亡采血,先将动物作深麻醉,打开胸腔,暴露心脏,用针头刺入右心室,吸取血液。小鼠约ml大鼠约ml。颈动静脉采血先将动物仰位固定,切开颈部皮肤,分离皮下结缔组织,使颈静脉充分暴露,可用注射器吸出血液。在气管两侧分离出颈动脉,离心端结扎,向心端剪口将血滴入试管内。腹主动脉采血最好先将动物麻醉,仰卧固定在手术架上,从腹正中线皮肤切开腹腔,使腹主动脉清楚暴露。用注射器吸出血液,防止溶血。或用无齿镊子剥离结缔组织,夹住动脉近心端,用尖头手术剪刀,剪断动脉,使血液喷入盛器。股动(静)脉采血先由助手握住动物,采血者左手拉直动物下肢,使静脉充盈。或者以搏动为指标,右手用注射器刺入血管。体重g小鼠采血约ml,大鼠约ml。正在做小鼠肿瘤动物模型方面的实验,对于小鼠的取血方法,效果比较满意:尾动脉针刺取血:将小鼠固定后,用G(号)针头,在远端垂直刺入为正中动脉,用ul微量吸管吸取。该方法一次可以取ml,比较安全可靠,可多次反复采血。小鼠心脏穿刺采血:需技术熟练,不过可以获得较多血标本。小鼠麻醉后固定,一助手用刀柄推挤右侧胸廓,使心脏相对固定,取血者用G胰岛素注射针在心尖搏动最强处或第三肋间胸骨左缘mm处进针,刺入mm后,便回抽便缓慢拔出针,见到血液回流后,固定针头,抽取需的血标本量。技术熟练可以多次取血,间隔天。总结一下小鼠采血的几个问题:。最大安全采血量:小鼠循环血量占体重的,或mikg采血占全血量的不会对机体造成严重的不良影响。周后可以重新采集一次。特别注意的是:老年小鼠血量降低。疾病会加重不良反应,所以必须考虑这些影响因素。采血后应补充响应体积的液体如果需要很短时间反复采血,比如每天一次,每次的采血量不应超过全血的。g*=血量mlsmls*=mls(最大安全采血量)。隐静脉采血法隐静脉采血法是小量、反复小鼠采血的常用方法。特点是不用麻醉。颈静脉采血法隐静脉采血法也是小量、反复小鼠采血的常用方法。特点是需要麻醉。心脏穿刺采血法。麻醉动物将动物仰放局部酒精消毒,用塑料注射器,从动物的左侧胸部,肋沿下,心尖部向右侧度角刺入心脏,给小负压,小心操作采用大鼠股动脉采血。你可以先仔细分离股动脉,然后找医用最小号的静脉留置针,它是有个针芯的,小心一点还是很容易进针,固定好针头,如果您的大鼠不需要再继续存活的话,只需要把试管放在那让它自然放血,一次采血ml是没有问题的。从颈总或者腹主都可以取出ml。g的大鼠大概有ml的血。抗凝方法:,乙二胺四乙酸二钠(EDTANA)浓度,每ml可使ml血液不凝固可用于血液学检验,草酸盐合剂草酸铵g,草酸钾g,水定容到ml,每ml可使ml血液不凝固可用于血液学检验,枸橼酸钠浓度,每ml可使ml血液不凝固但仅使用于血沉检验,肝素浓度,每ml可使ml血液不凝固可用于血液有机成分与无机成分的测定,需要冰箱保存作用原理:EDTANA通过夺取血液中的钙离子,以阻止凝固草酸盐合剂与钙离子结合,形成草酸钙沉淀,以阻止凝固枸橼酸钠与钙离子形成非离子的可溶性化合物而阻止血凝。肝素阻止血液中的凝血酶原形成凝血酶而阻止凝集常用的血液抗凝剂、肝素溶液ml于试管内,旋转试管,使溶液均匀浸湿试管内壁,放入~℃烘箱烤干,每管能使~ml血液不凝。急性血压实验时可在充满生理盐水的动脉套管内注入肝素~mg。体内抗凝:~ukg。市售的肝素注射液每ml含肝素u(相当于肝素钠mg,即mg相当于u)。应置冰箱内保存。、枸橼酸钠的枸橼酸钠溶液份可使份血液不凝,用于红细胞沉降速率的测定。因其抗凝血作用较弱而碱性较强,不适用于供化验用的血液样品。做急性血压实验时则用~的枸橼酸钠溶液。、草酸钾常用于供检验用血液样品的抗凝。在试管内加饱和草酸钾溶液滴(或溶液ml),轻轻敲击试管,使溶液分散到管壁四周,置℃以下的烘箱中烤干(烘烤温度过高,可使草酸钾分解为碳酸钾而失效),每管能使~ml血液不凝。供钾、钙含量测定的血样不能用草酸钾抗凝。

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