一、常用体内样品的制备与储存
1、血样:血浆和血清是体内药物
分析
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最常用的样本,其中选用最多的是血浆。
1.1血样的采集:供测定的血样应代
表
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整个血药浓度,所以应待药物在血液中分布
均匀后取样。
1.2 血浆的制备:将采集的静脉血液置于含有抗凝剂的试管中,混合后,以约1000
×g离心力,离心5~10分钟,使血细胞分离,所得淡黄色上清液极为血浆。
1.3
内药物分析中的样品预处理技术体内药物分析是指体内样品(生物体液、器官或组织)中药物及其代谢产物或内源性生物活性物质的定量分析。通常药物进入体
内后,其化学结构与存在状态就可能发生显著变化。在体液中,药物的存在形式多
样化,除游离型的原料药物或其代谢物,也有原形药物或其代谢物与葡萄糖醛酸等
内源性小分子经共价结合的结合物(或缀合物),还有与蛋白质分子经氢键及其他
分子间力结合的结合型药物;而且药物及其代谢物的浓度通常很低、干扰物质多。
因此,在测定时,除少数情况将体液作简单处理后可直接测定外,通常在测定前要
对体内样品进行分离净化与浓集等样品前处理,从而为体内样品中药物的测定提供
良好的环境和条件。常用的样品前处理方法有:去除蛋白质、缀合物水解、化学衍
生化、分离浓集及微波萃取和微透析技术等。一、体内样品种类:体内药物分析采
用的体内样品包括血液、尿液、唾液、头发、脏器组织、乳汁、精液、脑脊液、泪
液、胆汁、胃液、胰液、淋巴液、粪便等样品。这些大都具有:①采样量少;②待
测物浓度低;③干扰物质多的特点。二、体内样品预处理的目的:⑴使待测药物游
离,以便测定药物或代谢物的总浓度;⑵满足测量方法的要求,纯化浓集样品;⑶
保护仪器性能、改善分析环境。
三、常用生物样品预处理技术:⒈有机破坏法:湿法破坏:电热消化器法、电热板
消化法、烘箱消化法干法破坏:高温电阻炉灰化法、低温等离子灰化法氧瓶燃烧法
⒉去蛋白质法:溶剂解法(加入与水相混溶的有机溶剂)、加入中性盐、加入强酸、
加入含锌盐或铜盐的沉淀剂、超滤法、酶水解法、加热法⒊分离、纯化和浓集法:液﹣液萃取法、固相萃取法⒋缀水物的水解法:酸水解法、酶水解法⒌化学衍生化
发:硅烷化、酰化、烷基化、紫外衍生化、荧光衍生化、点化学衍生化、生成非对
映异构体衍生化发