(019)初始污染菌检验方法

(019)初始污染菌检验方法 江西XXX医疗器械有限公司第三层次文件 文件编号:XXX/TF/ZJ/XXX—2009 修订状态:1版 0次 标题:初始污染菌检验方法 页码:第1页 共2页 1 目的 通过检验产品的初始污染菌，了解产品在生产过程中受微生物的情况，以便更好地提高产品质量。 2 范围 本方法适用于本公司生产的一次性输液器、注射器、以及输液器的零配件，各类导管、纱布块等的初始污染菌的检验。 3 依据 GB 15980-2002 一次性使用医疗卫生用品标准 中华人民共和国药典2005版第二部 GB 8368-2005 一次性使用输液器 GB 1997.1-2005 (ISO 11737-1:1995)医疗器械的灭菌微生物学方法 第1部分:产品上微生物总数的估计 要求 4 灭菌产品管道类内腔污染菌数:应?10cfu/件次，外部应?100cfu/件次;非管道类应?100cfu/件次;敷料料应?100cfu/g;消毒产品应?1000cfu/件次或重量(g)，具体见 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 1。 表1 初始污染菌含量 产品名称 内腔污菌数 外表面污染菌数 注射器 输液(血)器 ?10cfu/件次 ?100cfu/件次 输液针(采血针) 注射针(配药针) 应?100cfu/件次或重量(g) 纱布块(敷料) 5 检验方法 5.1 营养琼脂培养基的配制: 成份: NaCl 5g 胨 10g 琼脂 15-20g 制法:取牛肉膏3g，加水1000ml，配制成肉浸液，将胨、NaCl、琼脂加入肉浸液内，微温溶解后，调节PH值，为弱碱性煮沸，滤清，调节PH值使灭菌后为7.2?0.2，分装后置压力蒸汽灭菌器内于115?灭菌30min即得。 5.2 样品采样数量:各类产品每批随机抽取10件样品。 5.3 供试液制备 5.3.1.供试品是敷料、可以破坏性类可用无菌手续称取10g,放入100ml灭菌生理盐水中充分振荡后取样。作为1:10的供试液。 5.3.2.供试品是液体取10ml加至100ml灭菌生理盐水中充分振荡后取样。作为1:10的供试液。 5.3.3.对供试品不能采用破坏性取样可用浸有无菌生理盐水拭子涂抹采样，被采表面积为2100cm，加入灭菌生理盐水100ml。作为1:10的供试液。 5.3.4.可用破坏性方法取样供试品:(参照中华人民共和国药典2005年规定进行) 江西XXX医疗器械有限公司第三层次文件 文件编号:XXX/TF/ZJ/XXX—2009 修订状态:1版 0次 标题:初始污染菌检验方法 页码:第1页 共2页 5.3.5 供试品为输液器及注射器产品的供试液制备 5.3.5.1内腔供试液制备:每套输液(血)器内腔注入20mL灭菌生理盐水,振摇5次，汇聚在一无菌及无热原的烧杯中。作为1:1的供试液。每支注射器抽取灭菌生理盐水至公称容量，振摇5次，汇聚在一无菌及无热原的烧杯中。作为1:1的供试液。 25.3.5.2外部供试液制备:按产品外表面积每10cm用1mL的灭菌生理盐水冲洗，汇聚在一无菌及无热原的烧杯中。作为1:1的供试液。 5.3.6 供试品为注射针产品的供试液制备 2除去单包装，内外表面积每10cm用10mL的灭菌生理盐水冲洗，汇聚在一无菌及无热原的烧杯中[或将1支注射针直接完全浸入5mL无菌、无热原的生理盐水中每支注射针内外表面2积约5cm)]。作为1:10的供试液。 5.3.7供试品为输液针(采血针)产品的供试液制备 5.3.7.1内腔供试液制备:每支输液针内腔缓慢注入5 mL灭菌生理盐水，汇聚在一无菌及无 :5的供试液。 热原的烧杯中。作为125.3.7.2 外部供试液制备:除去单包装，外表面积每10cm用10mL的灭菌生理盐水冲洗，汇聚在一无菌及无热原的烧杯中。作为1:10的供试液。 的产品，每支输液针内腔缓慢注入5 mL灭菌生理盐水，汇聚在一无菌及无热原的烧杯中。作 :1的供试液。 为1 5.4 每个稀释级各吸取1ml至每个灭菌平皿，每个稀释级注2个平皿。经灭菌完毕的营养琼脂培养基冷却至45-50 ?时，倾注上述各个平皿15ml，另倾注一个不加样品灭菌空平皿作空白对照。以顺时针或逆时针方向快速转动平皿，使供试液与培养基充分混匀。冷却后将已经凝固的平板倒置于37?培养箱中，一般培养48?2h。 5.5计数方法:将平板置菌落计数器或从平板的背面直接以肉眼用标记笔点计，以投射光衬以暗色背景，仔细观察，计数。必要时可以借助于放大镜、菌落计数器。 菌落特征: ?形态特征:常为白色、灰白色或灰色，亦有淡褐色、淡黄色(如果培养基 中加入0.1%TTC试剂，菌落为红色) ?边缘整齐或不整齐，表面有光滑、粗糙，皱褶、突起或扁平。 ?大小差异很大。 5.6计算公式为: 平均菌数×稀释倍数 菌数/每件次(或g)= 件次或重量(g) 6 检验规则 6.1 若每个平行样中无菌或菌落数小于或等于表1时，则报出菌数符合规定。 6.2 产品的初始污染菌是为一次/周。 6.3 产品取样应在完成整个包装过程以后，而又在灭菌前从大包装内取;对零组件取样应在流入下道工序之前取样。 7(注意事项 7.1供试品的取样必须在万级环境中100级净化条件下，无菌操作，防止污染。 7.2应严格遵守无菌操作，同时消除抑菌成份的干扰。 7.3 外部污染菌数超标一般为工人的的手污染菌数超过300cfu/只手，这时应增加工人的手消 江西XXX医疗器械有限公司第三层次文件 文件编号:XXX/TF/ZJ/XXX—2009 修订状态:1版 0次 标题:初始污染菌检验方法 页码:第1页 共2页 毒频次及对手消液的杀菌效果进行重新验证。 7.4进入无菌室的控制 a、定期检查无菌环境的空气是否符合规定; ,60min进行空气消毒; b、无菌室在使用前开启紫外线灯30 c、在进行接种倾注琼脂平板均需在无菌室超净工作台或接种罩内操作; d、检查一切进入无菌环境的器材灭菌、消毒的标志物是否完备; e、洗手消毒:首先用肥皂涂在手上揉搓10,15s，肥皂虽不杀菌，有去污作用，然后用流水彻底冲洗，可有效除去手上大多数暂住菌，如连续洗2,3次(视手的污染程度)，使残余的微生物减少到最低水平，再用消毒液洗手，如洗必泰、苯扎溴铵、碘伏、乙醇、过氧乙酸等。 f、操作人员将手部消毒后，再穿戴无菌工作服(包括鞋、帽、口罩等)。严格的无菌服应是戴帽套头的无扣的上衣，颈部、脸部及袖口是紧口的，以保护身体，防止污染。一般的无菌衣是背开口，围胸部、紧扣颈部与长袖紧口的，以保护身体，防止污染。 g、在进入无菌室后，进一步用浸有消毒液的棉球或泡沫塑料物消毒手，然后可进行检验或实验操作。 7.5检验过程的控制 a、在所有操作中均不应大幅度或快速动作，以免搅动空气中尘埃微粒。 b、使用玻璃器皿应轻取轻放，避免破损，以防培养物扩散。 c、在近火焰区操作。 d、使用金属接种器具、用前、用后均需燃烧灭菌。 e、应用橡胶乳头套在吸管上端，吸吹供试液或培养液等，切勿用嘴直接吸吹吸管。 f、用注射器吸取样品、培养物时，注射器内应无空气;装卸针头时应用灭菌的镊子;从密封容器内抽取液体时，应注入无菌空气;带液体的针筒针头应向上倾斜，并用75%乙醇棉球 (挤干)保护针头根部;注射时勿用力过猛，以免内容物喷出或针头脱落使溢出液体污染灭菌器材或环境。 g、当灭菌瓶塞或试管塞掉落在工作台上，一般不宜再用，应另换无菌塞，或通过火焰处理后再用。 7.6意外事故的控制 a、假定无菌衣受污染，应脱下翻转包裹，使污染部分包在内部，送往消毒，经灭菌后，洗涤再用。 b、因偶然打破盛有培养物的器皿，致使病原性的菌毒种外溢，污染了工作室及操作者的衣物及体表时，当事人应冷静，切勿乱动以免扩大污染面。应唤他人用浸透消毒液的毛巾或纱布覆盖于碎片上，或将消毒液倒在污染区，浸没一定时间。先从外至内逐步清理污染源，最后将衣物彻底灭菌。清理时应避免用手指收集玻璃碎片,以防污染皮肤，造成病原性微生物感染事故。 c、对一般小面积的污染可自行处理，较大范围的污染则请人协助。