临床医学毕业论文朝鲜族男性人群dys388基因座遗传多态性分布研究

临床医学毕业 论文 政研论文下载论文大学下载论文大学下载关于长拳的论文浙大论文封面下载 朝鲜族男性人群dys388基因座遗传多态性分布研究 X X 大学 毕业论文 朝鲜族男性人群DYS388基因座遗传多态性分布研究 姓 名:__________ 2014年6月25日 朝鲜族男性人群DYS388基因座遗传多态性分布研究 【关键词】 基因型;遗传多态性;人种群 ,摘要, ,目的, 探讨Y染色体特异性短串联重复序列(STR)基因座 DYS388的遗传多态性在吉林省延边地区朝鲜族人群中的分布情况. , 方法 快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载 , 应 用PCR，PAGE技术分离扩增产物，结合银染显带技术对DYS388基因座进行调 查. ,结果, 在DYS388基因座中检测出6个等位基因，其频率分别为0.110， 0.006，0.638，0.220，0.017，0.011，个人识别率为0.5328. ,结论, 所得到的 等位基因频率数据可为朝鲜族人群法医学个人识别、亲权鉴定及遗传学研究提供 依据. ,关键词, 基因型;遗传多态性;人种群 Allele frequency of DYS388STR locus in Korean nationality ethnic group CUI Hong 1 ，ZHANG Yong-ji 2 ，XU Qing-song 1 (1.Center of Functional Experimentation;2.Department of Forensic Medicine:Yanbian University College of Basic Medicine，Yanji133000，Jilin，China) ABSTRACT:OBJECTIVE To investigate the DYS388STR locus allele distribution among Korean nationality ethnic group in Yanbian area，Jilin province.METHODS The amplification was carried out by PCR and PAGE，and the DYS388STR locus allele distribution was analyzed by the technique of polyacrylamide gel electrophoresis with silver staining.RESULTS Total six alleles were observed among all samples and the frequencies were0.110，0.006，0.638，0.220， 0.017and0.011，respectively.The calculated gene diversity was0.5328.CONCLUSION The data obtained can be used in individual identification，paternity test and population genetics investigation for Korean nationality ethnic group.Key words:gene;polymorphism;ethnic groups 人类Y染色体特异的短串联重复序列(short tandem repeat，STR)为常用的Y染色体特异性遗传标记，在法医物证学、个人识别、亲权鉴定及人类遗传学分析等领域具有特殊的应用价值 ,1，2, .本文采用PCR，PAGE技术对吉林省延边地区182名无血缘关系的朝鲜族男性个体进行了DYS388位点的遗传多态性研究，获得了该位点的遗传多态性 参数 转速和进给参数表a氧化沟运行参数高温蒸汽处理医疗废物pid参数自整定算法口腔医院集中消毒供应 . 1 材料与方法 1.1 样本 182名无血缘关系的朝鲜族男性个体的枸橼酸钠抗凝血由延边大学医院提供. 1.2 基因组DNA的提取 采用韩国Kisanbiotech公司提供的全血基因组DNA纯化系统，采用有机法提取DNA ,3, . 1.3 PCR扩增 引物序列选自基因组数据库(genome data base，GDB)DYS388(accession ID:364826)如下:上游引物序列为5′-GTG AGT TAG CCG TTT AGC GA-3′，下游引物序列为5′-CAG ATC GCA ACC ACT GCG-3′.PCR在20μL反应体系中进行，内含0.25mmol/L dNTP，100g/L PCR缓冲液，0.05U/μL Taq酶，加入均为0.5μmol/L的上游引物和下游引物，将样品混匀后置入Gene Amp PCR2004系统(Perkin-elmer，Foster city，CA)中进行扩增.扩增参数为95?预变性3min，94?变性30s，58?退火30s，72?延伸30s，共30个循环后于72?继续延伸10min，产物置于4?保存. 1.4 扩增产物的电泳分型及检测 1.4.1 电泳分型 取扩增产物3μL与等体积上样 缓冲液(50g/L溴酚蓝，50g/L二甲苯蓝，100g/L氢氧化钠，800g/L甲酰胺)混合，上样于5%变性聚丙稀酰胺凝胶中进行电泳，恒定功率为50W，电泳时间为90min. 1.4.2 银染显色 将电泳完毕后的凝胶取下，按如下步骤进行操作:双蒸水冲洗1次15s，置于10g/L HNO 3 溶液中，轻摇5min;双蒸水冲洗1次15s，置 于2g/L AgNO 3 溶液中，轻摇15min;双蒸水冲洗1次15s，置于30g/L Na 2 CO 3 溶液中，轻摇10min;可见清楚的条带时加入适量100g/L乙酸停止显色. 1.5 等位基因分型 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 物的制备及命名 等位基因分型标准物由混合不同表型个体DNA后进行扩增而得 ,4, .所制备的分型标准物与PCR产物同步进行电泳，比较样本PCR产物的电泳谱带，对应分型标准物所处的位置，确定样本表型，根据国际法医遗传学会DNA委员会(ISFG DNA Commission)推荐原则命名等位基因 ,5, . 1.6 数据处理 遗传多样性(gene diversity，GD)的计算根据以下 公式 小学单位换算公式大全免费下载公式下载行测公式大全下载excel公式下载逻辑回归公式下载 进行 ,6, :GD/HD=(1-?pi 2 )N/(N-1) (pi为等位基因频率或单倍型频率，N为样本数). 2 结果 DYS388基因座中检测出10，11，12，13，14，15等位基因，其频率分别为0.110，0.006，0.638，0.220，0.017，0.011，个人识别率为0.5328，见表1.由表1可见，朝鲜族男性居民与韩国本国居民等位基因分布间无显著性差异，与普米族居民比较差异有统计学意义(P0.05). 表1 朝鲜族男性与不同人群DYS388位点等位基因频率比较 3 讨论 朝鲜族男性DYS388等位基因分布频率与韩国本国居民进行比较可见，朝鲜族男性与韩国人群DYS388等位基因分布间无显著性差异，符合与韩国人是同一祖先的历史学和民族学记载 ,9, .延边朝鲜族与中国普米族DYS388等位基因分布间差异有统计学意义(P0.05)，提示Y-STR多态分布与常染色体STR位点一样在不同民族之间存在差异 ,10, .本文所建立的朝鲜族男性群体Y染色体DYS388基因座的群体遗传学资料，为延边地区朝鲜族群体法医学个体识别、亲权鉴定及遗传学研究提供了更多的依据. ,参 考 文 献, ,1, 唐双柏，郭景元，刘超，等.广州汉族人群DYS19，DYA 389?/?，DYS390多态性及其单体型,J,. 遗传学杂 志 ，2000，22(1):11. ,2, 李生斌. 人类DNA遗传标记 ,M,.北京:人民出版社， 2000.185. ,3, Sambrook J，Fritsch EF，Maniatis T.Molecular cloning:a laboratory manual,M,.New York:ColdSpring Harboratory Press，1989.16. ,4, 张林，辛军平，陈国弟，等.Y染色体STR基因座DYS 385等位基因分型标准物的制备及群体遗传学研究,J,. 华西医科大学学报 ，2001，32(1):5. ,5, 侯一平，吴懂，李英碧，等.中国汉族群体5个STR基 因座遗传多态性研究,J,. 中华医学遗传学杂志 ，1999， 16(4):228. ,6, Hou YP，Hang J，Li YB，et al..Allele sequence of six new Y-STR and haplotypes in the Chinese Han popula- tion,J,.Forensic Sci Int，2001，118:153. ,7, Park MJ，Lee HY，Yoo JE，et al..Forensic evaluation and haplotypes of19Y-chromosomal STR loci in KoreansJ,.Forensic Sci Int，2005，152:133. ,8, 杨晓霞，王文强，杨智丽，等.普米族Y-STR遗传多态性研究,J,. 延安大学学报(自然科学版) ，2004，23(1):71. ,9, 姜孟山，金淑子.中国朝鲜族的特征和优势,J,. 东疆学刊 ，2001， 18(4):41. ,10, Elena B，Andrew CL，Francesc C，et al..High resolu- tion Y chromosome typing:19STRs amplified in three multiplex reactions,J,.Forensic Sci Int，2002， 125:42.