hplc法测定黄芪叶中黄芪甲苷的含量
HPLC法测定黄芪叶中黄芪甲苷的含量
HPLC法测定黄芪叶中黄芪甲苷的含量
【摘要】 目的 建立一种准确、简便测定黄芪甲苷含量的分析方法。
方法 色谱柱为Nucleosil C18柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相为
乙腈-水,1?2;流速为0.8ml/min;检测波长为205 nm;速度为
0.4mm/min。灵敏度为0.1 AUFS,测定了黄芪甲苷的含量,平均回收
率为96.1%,RSD为2.15%。结果 样品浓度在0.01,0.2mg/ml之间
与峰面积成良好的线性关系。结论 本方法的重复性好、精密度高、
稳定性强。
【关键词】 HPLC 黄芪叶 黄芪叶中黄芪甲苷
【Abstract】 0bjective: Establishes one kind accurately, easily to determine Astragaloside the content the analysis method. Method: The chromatographic column is Nucleosil the C18 column (4.6mm×250mm,5μm); Flowing for methyl cyanide - water =1?2; The speed of flow is 0.8ml/min; The examination wave length is 205 nm; The speed is 0.4mm/min. The sensitivity is 0.1 AUFS, has determined the Astragaloside content. The average returns-ratio is 96.1%, RSD is 2.15%. Result:Sample density in 0.01,0.2mg/ml becomes the good linear relationship with the peak area.Conclusion: This method‘s duplication is good, accuracy high, stable.
【Key words】 HPLC Leaf of the Astragalus Astragaloside
黄芪为常用中药,素有“补药之长”之称,具有益气固
表
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,利尿托
毒等功效.黄芪药用价值很高,临床上常用来治疗非特异性免疫功能
低下、乙肝和心血管系统疾病.黄芪甲苷作为黄芪成分之一,它具有
降压、抗炎、稳定红细胞膜、提高血浆CAMP含量,促进小鼠再生肝
DNA合成和增强免疫功能等多种作用.因此在研究黄芪过程中,我们
对其成分黄芪甲苷进行了含量测定方法研究,本文用HPLC法测定黄
芪甲苷的含量,其样品浓度的范围在0.01,0.2mg/ml之间与峰面积
呈线性,该法灵敏度高,重现性好,可准确地测定黄芪甲苷的含量。
1 仪器与试剂
Waters高效液相色谱仪:包括510型泵,991光电二极管阵列型检测器,U6K型进样器;NEC Power Mate型计算机,黄芪甲苷标准品购自辽宁省药品检验所。甲醇、正丁醇为分析纯,乙腈为色谱纯、水为去离子水。试验用黄芪叶6月份采自沈阳医学院草药园。
2 方法与结果
2.1 色谱条件 色谱柱为Nucleosil C18柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相为乙腈-水,1?2;流速为0.8ml/min;检测波长为205nm;速度为0.4mm/min。
2.2 标准曲线制作 精密称取黄芪甲苷标准品2.8mg,加流动相定容至2ml,配制成1.064 mg/ml的标准品溶液,分别以10、20、30、40、50μl进样测定,以峰面积对进样量作线性回归,得回归方程为Y,,5.6×10-5,6.9365×10-4X(Y为峰面积,X为黄芪甲苷量),r,0.9994,黄芪甲苷标准品在10.64,53.20μg范围内与峰面积呈良好线性关系。
2.3 提取方法的选择 用3种不同提取方法(索氏提取器提取1h;80?温浸提取1h和超声波提取1h)提取样品,后2种提取方法测得黄氏甲苷含量略低,故选索氏提取器提取方法。