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愈伤组织培养.ppt

愈伤组织培养

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2019-06-20 0人阅读 举报 0 0 暂无简介

简介:本文档为《愈伤组织培养ppt》,可适用于综合领域

第章愈伤组织培养植物组织培养第章愈伤组织培养(学时)本章主要内容:愈伤组织的诱导与分化愈伤组织的继代培养愈伤组织的形态发生不定芽和根的发生体细胞胚的发生愈伤组织培养的应用第章愈伤组织培养本章教学目的与要求、了解愈伤组织细胞分化的各时期的特点、掌握植物激素控制理论、掌握愈伤组织的形态发生、区别胚状体发生途径与器官发生途径形成植株、愈伤组织培养在园艺植物育种中的应用第章愈伤组织培养定义:是指将外植体接种到人工培养基上在激素作用下进行愈伤组织诱导、生长和分化的培养过程。愈伤组织培养(callusculture)第章愈伤组织培养第一节愈伤组织的诱导和分化一.愈伤组织的诱导诱导愈伤组织的关键主要是培养条件其中激素的成分和浓度是最重要的因素。第章愈伤组织培养CallusarisingfromleaftissueCallusarisingfromvasculartissueFromrootFromembryoculture第一节愈伤组织的诱导和分化Photoindicatingwherethecallus(c)arisesfrom第一节愈伤组织的诱导和分化WoundcallusonthestemofanErythrinatree刺桐树第一节愈伤组织的诱导和分化二.愈伤组织的分化从外植体脱分化形成典型的愈伤组织大致可分为三个时期:第一节愈伤组织的诱导和分化StageInduction(诱导期):第一节愈伤组织的诱导和分化细胞准备进行分裂的时期是愈伤组织形成起点。诱导期细胞内发生的变化气体交换增加如氧气的吸收增加RNA含量增加(增加到)蛋白质量增加(每个细胞的总增加量为)酶活性增强第一节愈伤组织的诱导和分化StageCelldivision分裂期指外植体细胞经诱导脱分化不断分裂、增生子细胞的过程。第一节愈伤组织的诱导和分化细胞的数目迅速增加。每个细胞平均鲜重下降。细胞体积小内无液泡。.细胞的核和核仁增大到最大。细胞中RNA含量减少而DNA含量保持不变。随着细胞不断分裂和生长细胞总干重、蛋白质和核酸量大大增加新细胞壁合成极快。第一节愈伤组织的诱导和分化分裂期细胞的主要表现:细胞分裂快结构疏松缺少有组织的结构维持其不分化的状态颜色浅而透明。mgl,Dmgl,D第一节愈伤组织的诱导和分化分裂期愈伤组织的共同特征:StageDifferentiation分化期指愈伤组织细胞停止分裂细胞内发生一系列形态和生理上的变化,形成一些不同形态和功能的细胞的时期。第一节愈伤组织的诱导和分化A细胞分裂部位和方向发生改变:B形成瘤状或片状的分生组织结节。或维管组织结节。C细胞的体积相对稳定不再减少。D出现了各种类型的细胞:如管胞、纤维细胞、薄壁细胞、分生细胞、色素细胞等。E生长旺盛的愈伤组织呈乳白色、白色或浅绿色老化的多转化为黄色或褐色。第一节愈伤组织的诱导和分化分化期细胞特点:Callustypes:Hardlignifiedcallus根据愈伤质地划分为:第一节愈伤组织的诱导和分化Callusmayhaveayellow,white,greenorred(anthocyanin花青苷)appearance不同颜色的愈伤第一节愈伤组织的诱导和分化第二节愈伤组织的继代培养、定义:培养物在培养基上生长一段时间以后由于营养物质枯竭水分散失以及代谢产物的积累必须转移到新鲜培养基上培养,这个过程叫做继代培养。第章愈伤组织培养、愈伤组织培养的调控因素:外植体培养基培养环境第二节愈伤组织的继代培养(一)材料本身第二节愈伤组织的继代培养.无机营养培养基中的N大多数都用硝态氮对细胞分化起重要作用。.植物生长调节物质一般使用的浓度为mg/L。使用植物生长调节剂时要注意种类和浓度特别是生长素和细胞分裂素的比值。第二节愈伤组织的继代培养(二)培养基器官分化的植物激素控制理论(激素配比模式)生长素与细胞分裂素的比值是根和芽形成的控制条件决定着发育的方向:是愈伤组织、长根还是长芽。高利于根的形成生长素细胞分裂素适中利于愈伤组织的形成低利于芽的形成第二节愈伤组织的继代培养愈伤组织分化第二节愈伤组织的继代培养培养基中加入糖、各类B族维生素、肌醇和甘氨酸等可满足愈伤组织生长和分化的要求。各种氨基酸和嘌呤、嘧啶类物质可促进器官分化。水解酪蛋白中含有多种氨基酸助于器官分化酰胺类往往有促进器官形成的作用。第二节愈伤组织的继代培养.有机成分第二节愈伤组织的继代培养培养方式:固体培养液体培养(三)培养条件第二节愈伤组织的继代培养光照温度℃光强、光照时间、光质第三节愈伤组织的形态发生形态建成:外植体细胞在适宜的培养条件下发生脱分化、再分化产生芽和根或者形成胚状体发育成苗或完整植株。魔芋胚状体小麦愈伤组织第章愈伤组织培养愈伤组织的形态发生方式:不定芽方式胚状体方式第三节愈伤组织的形态发生一、不定芽方式(adventitiousbud)第三节愈伤组织的形态发生愈伤组织的器官发生顺序有四种情况:()愈伤组织仅有根或芽器官的分别形成即无根的芽或无芽的根()先长芽后长根多数情况()先长根再从根的基部长芽。这种情况较难诱导芽的形成尤其对于单子叶植物()先在愈伤组织的邻近不同部位分别形成芽和根然后两者结合起来形成一株植株。第三节愈伤组织的形态发生愈伤组织芽分化再生苗第三节愈伤组织的形态发生小麦的形态发生试管苗胚状体(embryoid):指在组织培养中由一个非合子细胞(体细胞)经胚胎发生和胚胎发育过程(经过原胚、球形胚、心形胚、鱼雷胚和子叶胚个时期)形成具有双极性的胚状结构。第三节愈伤组织的形态发生二、胚状体方式(somaticembryo)注意:体细胞胚、不同于合子胚、不同于孤雌雄胚、不同于器官发生方式形成的幼苗第三节愈伤组织的形态发生胚状体与合子胚的比较:第三节愈伤组织的形态发生合子胚胚状体质量萌发率高质量好萌发率低质量差来源受精卵体细胞胚柄有明显即使有也不明显形态固定体积相对较小复杂常有两个以上的子叶体积较大变异率低高由外植体经胚状体形成完整植株的过程:第三节愈伤组织的形态发生胚状体发生途径与器官发生途径形成植株的区别:①胚状体具有两极性即有茎端和根端。②胚状体的维管组织与外植体的维管组织无解剖结构上的联系。③胚状体维管组织的分布是独立的“Y”字形。第三节愈伤组织的形态发生体细胞胚发生与器官发生第三节愈伤组织的形态发生胚状体方式比不定芽方式有更多的优点:胚状体产生的数量比不定芽多胚状体可以制成人工种子便于运输和保存胚状体的有性后代遗传性更接近母体植株。第三节愈伤组织的形态发生第四节愈伤组织培养的应用、加快了园艺植物新品种和良种繁育速度、培育无病毒苗木、获得倍性不同的植株、克服远缘杂交困难、利于种质资源长期保存和远距离运输、提供育种中间材料、诱发和离体筛选突变体、制造人工种子。第四节愈伤组织培养的应用本章小结:、愈伤组织培养含义、愈伤组织形成分三个时期:诱导期、分裂期、分化期。、诱导期、分裂期、分化期细胞的特点、分裂期愈伤组织的特征:细胞分裂快结构疏松缺少有组织的结构维持其不分化的状态颜色浅而透明。、继代培养的含义。、培养方式分为固体和液体培养两大类。、形态建成含义。、器官发生形成小苗的方式。、胚状体发生途径与器官发生途径形成植株的区别第章愈伤组织培养兰花第章愈伤组织培养

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