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免疫SOP免疫54乙肝前S1抗原的检测.doc

免疫SOP免疫54乙肝前S1抗原的检测

laofa
2018-09-05 0人阅读 举报 0 0 暂无简介

简介:本文档为《免疫SOP免疫54乙肝前S1抗原的检测doc》,可适用于医药卫生领域

东莞常平医院免疫实验室文件编号:DGCPHIMNSOP乙肝前S抗原的检测版序:页码:第页共页前言:  乙型肝炎病毒(HBV)外膜蛋白包括S、前S和前S三种成分。前S蛋白在病毒侵入肝细胞过程中起重要作用。含有前S的蛋白主要存在于Dane颗粒和管型颗料上。前S蛋白在病毒感染、装配、复制和刺激机体产生免疫反应等方面起有十分重要作用。  乙肝病毒前S抗原酶免测定试剂盒的正式推向临床以及近两年在北京、四川、浙江、河南、深圳、海南等近百家医院与乙肝“两对半”检测的联合应用充分显示了该试剂在病毒性乙型肝炎的临床诊断指导治疗等方面的重要价值。前S抗原(PreSAg)检测是对乙肝“两对半”尤其是e抗原和HBVDNA测定的重要补充和加强。  前S抗原与HBVDNA检出率两者符合前S抗原仅在HBVDNA阳性血清中检出。前S蛋白随HBeAg消失而消失且与阴转时间呈正相关这样前S抗原可作为病毒清除与病毒转阴的指标。前S抗原阳性的乙型肝炎患者传播乙型肝炎病毒比前S抗原阴性和无症状HbsAg携带者的危险性更大因而说明前S抗原可反映乙型肝炎病毒复制和传染性的指标。如果前S抗原持续阳性指示AHB向慢性转变。比较急性乙型肝炎、慢性乙型肝炎、和HBsAg阳性的患者血清中前S蛋白前S抗原阴转愈早AHB患者的疗程愈短预后也愈好。说明前S抗原及其抗体的检测是急性乙型肝炎的临床诊断疗效观察和判数据预后的良好指标。前S抗原的检测  由上海阿尔法生物技术有限公司生产的乙型肝炎病毒前S抗原酶免诊断试剂盒采用ELISA双抗体夹心法测定前S抗原肽最低检测浓度为ugL。   检测原理  采用双抗体夹心ELISA法用抗PreS和抗HBs作为固相化抗体和酶标抗体如果标本中存在乙肝病毒PreS抗原则形成抗体抗原酶标抗体复合物加入TMB底物产生显色反应反之则无显色反应。适用于血浆和血清类标本。东莞常平医院免疫实验室文件编号:DGCPHIMNSOP乙肝前S抗原的检测版序:页码:第页共页试剂盒组成  微孔板、阴性对照、阳性对照、酶结合物、显色液A、显色液B、终止液、洗涤液。  操作步骤  .反应孔内加入待测标本ul设阴、阳性对照各孔每孔加入阴、阳性对照各ul并设空白对照孔置℃孵育min。  .洗板  .每孔加入酶结合物滴或ul(空白对照孔除外)置℃孵育min。  .洗板  .加入显色液A、B各一滴充分混匀后置℃孵育min。  .加入终止液、混匀。  .酶标仪读数。  结果判断  .所有阴性对照、阳性对照和标本的读数值减去空白对照读数即为计算值。.阳性对照读数必须比阴性对照读数大。实验结果成立。  .结果判断:临界值(CUTOFF)=*阴性对照平均OD值。  测试标本的计算值大于或等于临界值为阳性。  测试标本的计算值小于临界值为阴性。  注意事项  .使用前试剂盒应预先在室温下平衡min。  .试剂盒启用后应尽快用完。  .不同批次的试剂组份不能混用。  .使用本试剂盒应视为有传染性物质。  .温育反应板温度和时间必须严格控制。  .阳性对照仅用于判读试剂盒内的包被微孔板和酶是否有效不是临界值的标志。  .反应终止后请在min内判读结果。  .封片纸不能重复使用。

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