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生物制品(三部)人用狂犬病疫苗效价测定法(NIH法).doc

生物制品(三部)人用狂犬病疫苗效价测定法(NIH法)

shadow冰
2018-09-09 0人阅读 举报 0 0 暂无简介

简介:本文档为《生物制品(三部)人用狂犬病疫苗效价测定法(NIH法)doc》,可适用于医药卫生领域

附录ⅪA人用狂犬病疫苗效价测定法(NIH法)本法系将供试品免疫小鼠后产生相应的抗体通过小鼠抗体水平的变化测定供试品的免疫原性。试剂稀释液(PBS)量取磷酸二氢钾溶液ml、磷酸氢二钠(NaHPO·HO)溶液ml、氯化钠溶液ml混合后加水至ml调pH值至~。攻击毒株CVS制备启开毒种稀释成悬液接种~g小鼠不少于只每只脑内接种ml连续传~代选择接种~天有典型狂犬病症状的小鼠脑组织研磨后加入含马血清或小牛血清制成悬液经每分钟转离心分钟取上清液经病毒滴定(用只~g小鼠滴定)及无菌检查符合规定后作攻击毒用。参考疫苗的稀释参考疫苗用PBS稀释成∶、∶和∶等稀释度。供试品溶液的制备供试品用PBS做倍系列稀。测定法用不同稀释度的供试品及参考疫苗分别免疫~g小鼠只每只小鼠腹腔注射ml间隔周再免疫次。小鼠于第一次免疫后天用经预先测定的含~个LD的病毒量进行脑内攻击每只ml。同时将攻击毒稀释成、、和进行毒力滴定每个稀释度均不少于只小鼠。小鼠攻击后逐日观察天并记录死亡情况统计第天后死亡和呈典型脑症状的小鼠。计算供试品和参考疫苗ED值。计算相对效力P=TS×dTdS×D式中P为供试品效价IUmlT为供试品ED的倒数S为参考疫苗ED的倒数dT为供试品的一次人用剂量mldS为参考疫苗的一次人用剂量mlD为参考疫苗的效价IUml。【附注】()动物免疫时应将疫苗保存在冰浴中。()各组动物均应在同样条件下饲养。()攻击毒原病毒液()注射的小鼠应以上死亡。

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