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424 培养基配制标准操作规程.doc

424 培养基配制标准操作规程

lijb2007
2018-09-07 0人阅读 0 0 0 暂无简介 举报

简介:本文档为《424 培养基配制标准操作规程doc》,可适用于医药卫生领域

SOPQM执行日期年月日题目培养基配制标准操作规程起草:年月日部门审核:年月日质量部审查:年月日批准:年月日发放部门质量部目的:规范培养基配制操作法范围:培养基职责:检验室对本规程的实施负责正文:培养基的制备需气菌、厌气菌培养基(硫乙醇酸盐液体培养基)酪胨(胰酶水解)g氯化钠g葡萄糖g新鲜配制的刃天青溶液mlL胱氨酸g(或新鲜配制的亚甲蓝溶液ml)硫乙醇酸钠g琼脂~g(或硫乙醇酸ml)水ml酵母浸出粉g除葡萄糖和刃天青溶液外取上述成分加入水内微温溶解后调节pH为弱碱性煮沸滤清按量加入葡萄糖和刃天青溶液摇匀调节pH值使灭菌后为±分装℃灭菌分钟。在无菌检查接种前培养基指示剂氧化层的颜色不得超过培养基深度约。否则须经水浴煮沸加热只限加热一次。霉菌培养基胨g磷酸氢二钾(KHPO)g酵母浸出粉g硫酸镁(MgSO·HO)g葡萄糖g蒸馏水ml除葡萄糖外取上述成分加入水内微温溶解后调节pH值约为,煮沸加葡萄糖溶解后摇匀滤清调节pH值使灭菌后为±分装℃灭菌分钟。选择性培养基对氨基苯甲酸培养基(用于磺胺类药物的无菌检查)照上述需气菌、厌气菌培养基及霉菌培养基的处方制法各加对氨基苯甲酸g溶解后摇匀分装oC灭菌分钟。吐温培养基(用于油剂药品的无菌检查)照上述需气菌、厌气菌培养基及霉菌培养基的处方及制法各加ml的吐温摇匀后分装℃灭菌分钟。营养肉汤培养基处方胨g肉浸液ml氯化钠g取胨与氯化钠加入肉浸液内微温溶解后调节pH为弱碱性煮沸滤清调节pH值使灭菌后为±分装℃灭菌分钟。肉浸液制备法取新鲜牛肉除去肌腱及脂肪切细绞碎后每g加水ml,充分拌匀在~℃浸泡~小时煮沸小时滤过压干肉渣补足液量分装℃灭菌分钟,置冷暗处备用。也可用牛肉浸出粉g,加水ml配成溶液代替。营养琼脂培养基照上述普通肉汤培养基的处方及制法加入~g琼脂调节pH值使灭菌后为±分装℃灭菌分钟。葡萄糖肉汤培养基胨g葡萄糖g氯化钠g肉浸液ml取胨与氯化钠加入肉浸液内微温溶解后调节pH为弱碱性煮沸加葡萄糖溶解后摇匀滤清调节pH值使灭菌后为±分装℃灭菌分钟。霉菌琼脂培养基照霉菌培养基的处方及制法加入~g琼脂调节pH值使灭菌后为±分装℃灭菌分钟,趁热斜放使凝固成斜面。培养基灵敏度的检查菌种藤黄微球菌(MicrococcusLutea)CMCC(B)生孢梭菌(Clostridiumsporgenes)CMCC(B)白色念珠菌(Candidaalbicans)CMCC(F)操作取藤黄微球菌的营养琼脂斜面和白色念珠菌的霉菌琼脂斜面的新鲜培养物分别用灭菌氯化钠溶液制成均匀的菌悬液将生孢梭菌的不含琼脂需气菌、厌气菌培养基的新鲜培养物吸入灭菌离心管离心弃去上清液菌体用灭菌氯化钠溶液制成均匀菌悬液。分别取上述菌悬液用灭菌氯化钠溶液稀释至与细菌浊度标准管相同的浓度然后作倍系列稀释并计数。将藤黄微球菌:~:菌液、生孢梭菌:~:菌液、白色念珠菌:~:菌液各ml分别接种至ml试验培养基中每个稀释度至少接种管以未接种的培养基管作对照细菌试验管置~℃培养天白色念珠菌试验管置~℃培养天。逐日记录结果。操作标准中华人民共和国药典年版二部附录XIH操作结果评价以接种后培养基管数的以上呈现生长的最高稀释度为该培养基的灵敏度(且接种菌量均应小于个)三次试验中以两次达到的最高灵敏度为判定标准。需气菌、厌气菌培养基灵敏度为藤黄微球菌:生孢梭菌:霉菌培养基灵敏度为白色念珠菌:。操作过程的注意事项培养基分别按ml与ml分装于试管中装量约为试管高度的在℃灭菌分钟。细菌培养基经~℃培养小时霉菌培养基经~℃培养小时后应无菌生长。操作中使用的设备及器具无菌操作室或超净工作台、无菌衣裤、口罩、帽子、消毒鞋、酒精灯及离心机、恒温培养箱、生化培养箱、高压蒸汽灭菌器、架盘天平、烧杯、电炉、pH广泛试纸、纱布、玻棒、试管、量筒、接种环、棉花等。SOPQM培养基配制标准操作规程SOPQM培养基配制标准操作规程第页共页第页共页第页共页

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