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灵芝多糖提取方法的研究.doc

灵芝多糖提取方法的研究

東門涙
2019-03-26 0人阅读 举报 0 0 0 暂无简介

简介:本文档为《灵芝多糖提取方法的研究doc》,可适用于领域

灵芝多糖提取方法的研究摘要:本文以灵芝粉末为原料采用四因素三水平正交实验分别使用超声波协同酶解法和超声波协同醇提法来研究提取灵芝多糖的最佳反应条件。实验结果表明超声波协同酶解法提取的最佳条件是用克木瓜蛋白酶在℃下提取小时得到的多糖产率为超声波协同醇提法提取的最佳条件是以:的料液比在乙醇浓度、℃下提取小时得到的产率为。两者比较超声波协同酶法的提取率明显高于超声波协同醇提法所以灵芝中提取多糖的最佳条件是超声波协同酶法的最佳条件。关键词:超声波协同酶解法超声波协同醇提法灵芝多糖最佳反应条件ThestudyofGanodermalucidumpolysaccharideextractionAbstract:Thestudyisbasedonganodermalucidumastherawmaterial,usingthefourfactorsthreelevelsorthogonalexperimentandultrasonicenzymeandultrasonicalcoholformulationrespectivelytostudytheoptimumreactionconditionsofextractionofganodermalucidumpolysaccharideAstheresultshows,thebestconditionofultrasonicenzymeisasfollows:extractiontemperature℃,gpapayaproteas,extractiontimehthebestconditionofultrasonicalcoholextractionprocessis:materialalcoholratio:,ethanolconcentration,extractiontimeh,extractiontemperature℃Andtherateofganodermalucidumpolysaccharideis,respectivelyBothcompared,ultrasonicenzymaticextractionyieldaresignificantlyhigherthanultrasonicalcoholextractionprocess,sothebestconditionofganodermalucidumpolysaccharideextractedisthebestconditionofultrasonicenzymaticextractionKeywords:UltrasonicenzymaticUltrasonicalcoholformulationGanodermalucidumpolysaccharidesOptimumconditions引言研究意义及背景灵芝(Ganodermalucidum)是我国传统中药具有滋补强壮扶正固本作用。年已知灵芝属(Ganoderma)真菌约余种分布最广的为赤芝(Glucidum)其次为紫芝(Gjaponicum)还有树舌(Gapplanatum)、松杉灵芝(Gtsugae)和簿树芝(Gcapense)等均供药用。经过大量临床研究灵芝对神经衰弱、高脂血症、冠心病心绞痛、心律失常、克山病、高原不适症、肝炎、出血热、消化不良、气管炎等各有不同程度的疗效。需要注意的是仅仅通过用灵芝食疗这种方法并不能起到明显的防治效果建议可用决明子、黑乌龙等组方为决乌汤茶这种中医经典组方茶对高血脂等症可以起到很好的防治效果。药理研究证明灵芝有多方面的生物活性。灵芝多糖存在于灵芝属真菌的菌丝体和子实体中是由一种多孔菌科灵芝属真菌菌丝体产生的次生代谢产物。灵芝子实体粉碎加入少量培养基发酵发酵后原料离心上清液低温真空浓缩透析乙醇沉淀丙酮洗涤除蛋白喷雾干燥最后加入水提干粉混合而成。灵芝多糖为浅棕色至棕褐色粉末可溶于热水。灵芝多糖有许多药理方面的活性:提高机体的免疫力,加速血液微循环增加血液的供氧能力降低机体在静止状态下的产生的无效耗氧量消除体内自由基可显著提高机体细胞膜的封闭度抗辐射可提高肝脏、骨髓、血液合成DNA,RNA蛋白质等大分子物质的能力从而延长寿命等。灵芝的许多药理活性大多和灵芝多糖有关。它是灵芝中具有生物活性的主要有效组分之一它的保健功能是目前保健食品及药品功能因子中的研究焦点由于其功效显著、作用广泛而尤其引起关注。医学研究曾报道称灵芝多糖是一种具有生理活性的单糖聚合体,由L岩藻糖、D半乳糖、D甘露糖和D木糖等单糖组成。灵芝多糖可以促进蛋白质形成,从而可以改善造血功能,同时灵芝多糖具有抗病毒、抗肿瘤的作用。灵芝多糖现如今广泛应用于医药、食品和化妆品行业这都是由于其特有的生理活性以及临床作用同时还安全无毒。因为灵芝多糖可提高机体免疫力这一特性若癌症病人经放疗、化疗而造成机体免疫力受损灵芝多糖可与化疗等配合可治愈疾病。此外灵芝多糖有抑制过敏反应介质释放的功能因而可以阻断非特异性反应的发生同时又可以抑制手术后癌细胞复发和转移。现阶段已投入生产的灵芝制剂有片剂、针剂、冲剂、口服液、糖浆剂和酒剂等都取得了相当的临床疗效。除了作为药品灵芝多糖还可作为功能因子制成各种保健食品同时也可作为食品添加剂加入饮料、糕点、口服液等各种食品中。灵芝多糖由于具有抗自由基的功效还可以用于化妆品中可起到延缓衰老的作用。研究现状及分析灵芝多糖在各个方面中的广泛应用使得研究者们对灵芝多糖的提取研究越来越深入。目前多糖提取的方法一般可分为以下几种:热水浸提法:基于植物多糖可溶于热水特性通过热水浸提法这种方式可较多地保留多糖而且可避免破坏多糖结构。此方法的优点是成本低、工艺比较简单、无需特殊仪器设备并且可用于大规模生产是最常用的提取多糖的方法。其缺点是工艺提取时间长还有待改善。微波辅助提取法:其原理为利用不同极性的介质对微波能的不同吸收程度使基体物质中的某些区域和萃取体系中的某些组分被选择性加热从而使萃取物质从基体或体系中分离出来进入到介电常数小微波吸收能力较差的萃取剂中。酸提法、碱提法和醇提法:酸提法是使用适宜浓度的乙酸或盐酸溶液使含葡萄糖醛酸等酸性基团的多糖溶于其中然后用乙醇溶液将多糖沉淀析出也可以加入铜盐使多糖生成不溶性络合物或沉淀从而析出。但是在酸性条件下多糖糖苷键可能会发生断裂因此建议使用弱酸比较适宜。此外还应该注意控制酸反应作用的时间不然会降低多糖的提取率。采用酸提法多糖提取率仅为苯酚硫酸法测得提取物中多糖含量为。碱提法是使用弱碱性溶剂来提取含有糖醛酸的多糖的一种有效方法。实验中通常会通入氮气或加硼氢化钠可以防止多糖降解。用碱提法进行大枣渣多糖的提取比用热水浸提法效率大大提高。基于乙醇可使细胞渗透性增强的原理醇提法则是利用少量乙醇提取多糖为提高多糖提取率通常会配合碱提法一起使用称之为醇碱法。应用醇碱法提取黄芪多糖在pH值=的碳酸钠乙醇溶液中多糖提取率高达分别是热水浸提法和碱提法的倍和倍。超声辅助法:超声辅助法是一种物理方法它可以破碎植物细胞壁一般采用KHz以上声波的空化效应。超声波由于这种空化效应而形成小气泡这种小气泡会随着周围介质的振动而不断产生运动、长大甚至突然破灭。破灭时周围液体突然冲入气泡而产生高温、高压同时产生激波使细胞壁瞬间破碎植物细胞内的有效成分得以释放直接进入溶剂中并充分混合从而提高提取率。而超声波辅助法的不足之处是:超声波具备机械剪切作用长时间作用会使得大分子多糖发生断裂从而会影响其生物学活性而且超声波功率过大会产生热效应容器内会出现局部瞬时升温现象也有可能会对多糖组分及空间结构造成破坏。通过超声波法对银杏多糖进行提取发现采用超声波在功率W、频率次处理银杏浆效果最好经醇沉可得到纯度高达的银杏多糖提取率达到了。酶辅助法:酶有温和地将植物组织破碎分解从而释放其有效成分的功能。对植物细胞而言较常用的酶有纤维素酶、蛋白酶、果胶酶等几种。蛋白酶一般用来除去杂蛋白而纤维素酶和果胶酶则一般用来破坏植物细胞壁。合理有效地利用酶可以使浓缩工艺和后续的脱蛋白工艺操作变得简便易行、省时省力提高粗多糖的提取率和蛋白质脱除率。一般来说酶辅助法是按照一定的料液比加入样品干粉、生物酶和蒸馏水在适当的温度和最适PH值下反应酶解相应时间。然后进行升温来灭酶使酶失去活性在适当温度下提取一定时间后进行离心取上清液这样就可以测定多糖的含量了。在对茶多糖的提取工艺进行研究时发现热水一次提取后的茶渣再采用复合酶或果胶酶提取多糖提取率明显高于单纯的热水浸提法。有关多糖成分的提取,现阶段国内外主要采用热水浸提法或碱溶法这两种方法。近几年来,少数学者开始致力于酶法提取生物多糖的研究。另外人们利用超声波技术来提取植物、真菌中的活性物质取得了很好的效果超声波产生的强烈的振动、较高的加速度、强烈的空化效应、搅拌作用等可以加速有效成分进入溶剂另外超声波的次级效应,如机械振动、乳化、扩散、击碎、化学效应等也能加速有效成分的扩散释放,但是采用超声波技术结合生物酶提取灵芝多糖的研究却还不多并且得率标准很少有报导。为了验证此方法的提取效果本试验采用正交试验设计法优化超声波协同酶提取灵芝多糖的最佳条件并同超声波醇提法的提取结果进行了系统比较。研究基本思路本实验采用灵芝粉末为原料先分别用蒸馏水和相应浓度的乙醇浸泡分钟应用超声波协同酶解法的正交实验和超声波协同醇提法的正交实验。在超声波协同酶解法正交实验中以酶种类、提取时间、提取温度、酶量为四因素做正交实验。在超声波协同醇提法正交实验中以料液比、乙醇浓度、提取温度、提取时间为四因素做正交实验。然后提取得到的物质用紫外分光光度仪测定其吸光度算出其多糖浓度最后得出其最佳提取条件同时测定所的物质的固形物含量。实验部分实验材料、化学试剂与仪器材料与试剂灵芝粉(采自杭州吴山粉碎后过目筛)芦丁、葡萄糖溶液、无水乙醇、苯酚、氯仿、正丁醇均为分析纯浓硫酸NaNONaOHAl(NO)碱性蛋白酶、纤维素酶、木瓜蛋白酶试剂的配制molLNaOH:量取mL饱和氢氧化钠溶液定容至mLmgmL葡萄糖标准溶液:准确称取mg标准葡萄糖用蒸馏水溶解并定容至mL容量瓶中苯酚溶液:在℃水浴中溶解苯酚准确吸取mL定容于mL容量瓶中仪器SHZD(II)循环水式真空泵:巩义市英峪予仪器厂KQDB数控超声波清洗器:昆山市超声仪器有限公司旋转蒸发器:上海亚荣生化仪器厂紫外分光光度仪UV:日本岛津SC型鼓风电热恒温干燥箱:浙江省嘉兴市新滕电器厂SHZ恒温振荡器、飞鸽牌系列离心机、METTLERAE分析天平实验方法超声波协同酶法提取方法及正交表称取g灵芝干粉以:的料液比加入蒸馏水浸提min,接着在功率的超声波下浸提min根据酶的最适最适PH调节溶液的PH(碱性蛋白酶木瓜蛋白酶、纤维素酶)根据文献设计四因素三水平(表)加入一定量的酶放入恒温振荡器在一定温度下反应一定时间。反应完后煮沸min(灭酶)然后用molL的柠檬酸溶液或molLNaOH溶液调节溶液PH至进行抽滤蒸发浓缩至mL以:的料液比加入乙醇醇沉过夜。醇沉得到的溶液以rmin的转速进行离心上清液定容至mL,沉淀加水至mL,再以:的比例加入氯仿和正丁醇(即氯仿mL正丁醇mL)以除去其中的蛋白。经上述沉淀溶液进行透析(小时换一次水透析小时)透析所得溶液定容至mL,即为多糖溶液。表超声波协同酶解法因素水平表TableFactsandleversofultrasonicenzyme水平A酶种类B加酶量C反应时间D反应温度碱性蛋白酶gh℃纤维素酶gh℃木瓜蛋白酶gh℃超声波协同醇提法提取方法及正交表称取g灵芝干粉以表中的料液比及乙醇浓度加入乙醇浸泡min然后根据表的正交表以的超声功率在一定温度下反应一段时间在进行抽滤蒸发浓缩。得到的溶液同超声波协同酶解法一样进行处理最终得到多糖溶液。表超声波协同醇提法因素水平表TableFactsandleversofultrasonicalcoholextraction水平A料液比B反应温度C超声时间D乙醇浓度:℃min:℃min:℃min灵芝多糖及固形物含量的测定多糖含量测定分别吸取,,,,,,,mLmgmL的标准葡萄糖溶液置于具塞试管中加水至mL再加入mL苯酚溶液摇匀迅速滴加mL浓硫酸摇匀后放置min,再置沸水浴中min取出冷却至室温另以mL蒸馏水同上操作作为空白对照于nm处测定吸光值结果见表。表葡萄糖溶液吸光值TableGlucosesolutionabsorbancevalues序号葡萄糖浓度mugmL吸光值以葡萄糖浓度为横坐标吸光值为纵坐标绘制标准曲线用最小二乘法进行线性回归得葡萄糖溶液C与吸光值A的关系曲线的回归方程相关系数R=见图分别吸取超声波协同酶解法的多糖提取液mL、超声醇提法的多糖提取液mL,同绘制测定葡萄糖标准曲线一样处理样品于nm处测吸光值。重复测定三次。再根据公式()计算多糖得率()Ax各组样品吸光值()图葡萄糖标准曲线FigStandardcurveofGlucose固形物含量测定将培养皿放入干燥箱内h放入干燥器内干燥min用分析天平称量的m,。然后从mL容量瓶中取mL提取物放入相应的培养皿在干燥箱内干燥h放入干燥器内min后用分析天平称量得m则所得固形物含量按公式()计算。()M为所称取的灵芝干粉重量结果与讨论超声波协同酶解法的最佳条件选择在前人研究的基础上就不做单因素比较实验直接应用前人的研究结果作正交实验。实验选用超声波的功率都为超声温度为℃超声时间min。按方法对灵芝干粉进行提取实验每组平行次实验结果如表。表超声波协同酶解法正交试验设计及结果分析表TableAnalysisanddesignoftheorthogonaltestofUltrasonicsynergyenzymatichydrolysis序列号ABCD吸光度多糖得率固形物含量(A)()(gg)plusmnplusmnplusmnplusmnplusmnplusmnplusmnplusmnplusmnplusmnplusmnplusmnplusmnplusmnplusmnplusmnplusmnplusmnIi灵芝中多糖含量测定结果分析P=IIiIIIiQiSiIi灵芝中固形物含量测定结果分析P=IIiIIIiQiSi注:Ii为第i到ldquordquo水平对应值之和Qi=(IiIIiIIIi)P=Si=QiP为了了解超声波协同酶解法中各因素对灵芝多糖提取率和固形物含量的影响做了极差分析如表所示。表超声波协同酶解法正交试验极差分析表TableTheorthogonaltestrangeanalysistableofultrasonicsynergyenzymatichydrolysisABCD灵芝多糖提取率()KKK极差R固形物含量()KKK极差R根据表,可做极差分析图图。图正交试验极差分析图FigTheorthogonaltestrangeanalysischart图正交试验极差分析图FigTheorthogonaltestrangeanalysischart从表、图和可知:对灵芝多糖提取率而言极差值分析R反映出影响对灵芝多糖提取率高低的各因素的排列顺序为:酶种类反应时间加酶量反应温度四种因素的最佳组合是ACBD即用g木瓜蛋白酶在℃反应h此条件组合下灵芝中的有效物质的提取效果最佳。对固形物含量而言极差值分析R反映出影响对固形物含量高低的各因素的排列顺序为:酶种类反应时间反应温度加酶量四种因素的最佳组合是ACDB即用g碱性蛋白酶在℃反应h此条件组合下灵芝中的有效物质的提取效果最佳。为了了解各影响因素的显著性效果进行了正交实验的方差分析分析结果见表表。表超声波协同酶解法中多糖含量方差分析结果TableResultofthepolysaccharidecontentvarianceanalysisofultrasonicsynergyenzymatichydrolysis方差来源差方和S自由度f均方SfF值显著性A**BCD总和临界值:F(,)=F(,)=F(,)=F(,)=F(,)=表超声波协同酶解法中固形物含量方差分析结果TableResultofthesolidrsquoscontentvarianceanalysisofultrasonicsynergyenzymatichydrolysis方差来源差方和S自由度f均方SfF值显著性ADeltaBCD总和临界值:F(,)=F(,)=F(,)=F(,)=F(,)=以提取灵芝多糖得率为指标选择灵芝中有效物质提取的最佳条件从表的方差分析可知:四种因素对提取结果的影响大小依次为酶种类反应时间加酶量反应温度其中酶种类对提取有一定影响其他三种因素影响都无明显作用。四种因素的最佳组合是ACBD即用g木瓜蛋白酶在℃反应h此条件组合下灵芝中的有效物质的提取效果最佳。以固形物含量为指标选择灵芝中有效物质提取的最佳条件从表的方差分析可知:四种因素对提取结果的影响大小依次为酶种类反应时间反应温度加酶量其中酶种类对提取有显著影响其他三种因素影响都微乎其微。四种因素的最佳组合是ACDB即用g碱性蛋白酶在℃反应h此条件组合下灵芝中的有效物质的提取效果最佳。从以上两种角度的分析来看酶种类是最具有影响力的一个因素反应时间则为次要因素加酶量和反应温度的影响则基本不明显。因此根据实际情况选出超声波协同酶解法的最佳提取条件:用g木瓜蛋白酶在℃反应h。超声波协同醇提法的最佳条件选择按方法对灵芝干粉进行提取实验每组平行次实验结果如表方差分析如表、表。表超声波协同醇提法正交试验设计及结果分析表TableAnalysisanddesignoftheorthogonaltestofultrasonicalcoholformulation序列号ABCD吸光度多糖得率固形物含量(A)()(gg)plusmnplusmnplusmnplusmnplusmnplusmnplusmnplusmnplusmnplusmnplusmnplusmnplusmnplusmnplusmnplusmnplusmnplusmnIi灵芝中多糖含量测定结果分析P=IIiIIIiQiSiIi灵芝中固形物含量测定结果分析P=IIiIIIiQiSi注:Ii为第i到ldquordquo水平对应值之和Qi=(IiIIiIIIi)P=Si=QiP为了了解超声波协同酶解法中各因素对灵芝多糖提取率和固形物含量的影响做了极差分析如表所示。表超声波协同醇提法正交试验极差分析表TableTheorthogonaltestrangeanalysistableofultrasonicalcoholformulationABCD灵芝多糖提取率()KKK极差R固形物含量()KKK极差R根据表,可做极差分析图图。图正交试验极差分析图FigTheorthogonaltestrangeanalysischart图正交试验极差分析图FigTheorthogonaltestrangeanalysischart从表、图和可知:对灵芝多糖提取率而言极差值分析R反映出影响对灵芝多糖提取率高低的各因素的排列顺序为:四种因素对提取结果的影响大小依次为乙醇浓度料液比反应温度超声时间最佳组合是DABC即用乙醇以:料液比在℃超声min此条件组合下灵芝中的有效物质的提取效果最佳。对固形物含量而言极差值分析R反映出影响对固形物含量高低的各因素的排列顺序为:料液比超声时间反应温度乙醇浓度最佳组合是ACBD即用乙醇以:料液比在℃超声min此条件组合下灵芝中的有效物质的提取效果最佳。为了了解各影响因素的显著性效果进行了正交实验的方差分析分析结果见表表。表超声波醇提法中多糖含量方差分析结果TableResultofthepolysaccharidecontentvarianceanalysisofultrasonicalcoholformulation方差来源差方和S自由度f均方SfF值显著性ADeltaBCDDelta总和临界值:F(,)=F(,)=F(,)=F(,)=F(,)=表超声波醇提法中固形物含量方差分析结果TableResultofthesolidrsquoscontentvarianceanalysisofultrasonicalcoholformulation方差来源差方和S自由度f均方SfF值显著性ADeltaBCDeltaD总和临界值:F(,)=F(,)=F(,)=F(,)=F(,)=以提取灵芝多糖得率为指标选择灵芝中有效物质提取的最佳条件从表的方差分析可知:四种因素对提取结果的影响大小依次为乙醇浓度料液比反应温度超声时间其中乙醇对提取有一定影响料液比次之其他两种因素影响都无明显作用。四种因素的最佳组合是DABC即用乙醇以:料液比在℃超声min此条件组合下灵芝中的有效物质的提取效果最佳。以固形物含量为指标选择灵芝中有效物质提取的最佳条件从表的方差分析可知:四种因素对提取结果的影响大小依次为料液比超声时间反应温度乙醇浓度其中料液比对提取有一定影响超声时间为次之因素其他两种因素影响很小。四种因素的最佳组合是ACBD即用乙醇以:料液比在℃超声min此条件组合下灵芝中的有效物质的提取效果最佳。从以上两种角度的分析来看料液比是最具有影响力的一个因素乙醇浓度则为次要因素反应时间和反应温度的影响则基本不明显。因此根据实际情况选出超声波协同酶解法的最佳提取条件:用乙醇以:料液比在℃超声min。拓展试验分别用超声波协同酶解法与超声波协同醇提法的最佳条件从灵芝干粉中进行提取提取后分别吸取mL和mL来测定吸光度根据公式()计算多糖含量所得结果如表所示。表超声协同酶解法与超声协同醇提法在最佳条件下提取的结果TableComparingwiththeresultsofultrasonicenzymatichydrolysisandultrasonicalcoholformulationintheoptimumconditions提取方法多糖含量()超声协同酶解法超声协同醇提法从表可以看出在最佳条件下提取所得到的多糖含量比正交设计中的任一组数据都要高。另外比较所有实验可以看出超声波协同酶解法所提取的多糖含量比超声波醇提法含量高但超声波协同酶解法的物质得率较不集中差异比较大反而超声波协同醇提法的物质得率比较集中方法也比较简单。结论与展望结论超声波协同酶解法的影响因素分析从多糖含量来看超声波协同酶解法的影响因素排列顺序为:酶种类反应时间加酶量反应温度其中酶种类对提取有一定影响其他三种因素影响都无明显作用从固形物含量来看其影响因素排列顺序为:酶种类反应时间反应温度加酶量其中酶种类对提取有显著影响其他三种因素影响都微乎其微。综合两种角度酶种类是最具有影响力的一个因素反应时间则为次要因素加酶量和反应温度的影响则基本不明显。超声波协同醇提法的影响因素分析从多糖含量来看超声波协同醇提法的影响因素排列顺序为:乙醇浓度料液比反应温度超声时间其中乙醇对提取有一定影响料液比次之其他两种因素影响都无明显作用从固形物含量来看其影响因素排列顺序为:料液比超声时间反应温度乙醇浓度其中料液比对提取有一定影响超声时间为次之因素其他两种因素影响很小。综合两种角度料液比是最具有影响力的一个因素乙醇浓度则为次要因素反应时间和反应温度的影响则基本不明显。超声波协同酶解法与超声波协同醇提法的比较总结以上实验可以得出超声波协同酶解法与超声波协同醇提法的最佳提取条件分别为:用g木瓜蛋白酶在℃反应h用乙醇以:料液比在℃超声min。在最佳条件下它们的多糖得率分别为、均比各自正交设计中的实验组高。另外比较超声波协同酶解法与超声波醇提法可以看出超声波协同酶解法的多糖得率明显高于超声波协同醇提法。但是超声波协同酶解法所提取的物质得率差异比较大而超声波协同醇提法的则比较集中方法也比较简单。展望上世纪年代以来随着人工栽培获得成功灵芝子实体的产量逐年递增年全世界灵芝产量约吨其中中国占了吨。据报道年全球灵芝产品的年产值已达亿美元中国占亿美元而年全球灵芝产品的年产值已超过亿美元。据不完全统计国内目前有近多家科研单位从事灵芝类药用真菌的研究有余家工厂从事其药剂和保健品的生产。早在八十年代我国就有灵芝汤剂、糖浆、片剂及用其孢子制成的注射液mdashmdash肌生注射液入市。目前国内灵芝产品门类已基本齐全包括灵芝药品(胶囊剂、酊剂、片剂、颗粒剂、口服液)多种灵芝保健酒多种灵芝保健饮料多种灵芝保健食品多种灵芝美容品余种。因此灵芝的研究已成为如今关注的一个项目。酶法可以使浓缩工艺和后续的脱蛋白工艺操作变得简易、省时提高粗多糖的得率和蛋白质脱除率。但是对于蛋白质含量不高的原料,加入蛋白酶在提高多糖得率上所起的作用不够明显有些蛋白酶由于专一性不高还会对糖蛋白和糖肤等结合多糖产生降解作用。超声波具有以下作用:热作用、机械作用、空化作用、击碎、乳化、扩散等次级效应等因此能有效地打破细胞边界层,增加扩散速度促进固体物料中有效成分的溶出从而可显著地提高提取效率。醇提法比较简单易于操作但提取率低乙醇用量大不宜大规模提取使用。灵芝多糖的水解是一个在运动介质中的传质过程其中包括萃取在这种运动的介质中溶液在受到超声波后会产生漩涡。超声波催化酶法能够提高有效成份提取率的机理是超声振荡能破坏灵芝纤维的细胞壁扩大可溶性物质通过的多孔透析膜。由于扩大了透析膜孔径大分子固形物(如蛋白质、脂肪、氨基酸和多糖等)很容易渗出因此采用超声波辅助酶解法时水解液的固形物含量会高于其它方法。灵芝的应用日益广泛、普及化而灵芝多糖作为其中主要的活性成分它的提取、分离纯化也变得更加重要现如今对于如何提高灵芝多糖的提取率、提高灵芝多糖的纯度、简化生产工艺、进行大规模生产、降低生产成本是我们即将面临的问题。参考文献卢振陈金和王雨来等.灵芝的研究及应用进展J.时珍国医国药():~。秦葵钱彦丛灵芝免疫药理研究进展:解放军药学学报:。陈冲.中药提取物鉴定与质量标准参考:化学工业出版社:。邱赛红仇萍黄宇明等.灵芝的药理研究概况[J].湖南中医药导报():。林志彬灵芝多糖的免疫药理学研究及其意义北京医科大学报,,():~。李勇.碳水化合物加工技术:化学工业出版社:。高艳艳黄芪多糖增强疫苗免疫效力及机理研究D北京中国农业科学院,骆健美鲁学应张敏清等。微波萃取提取技术及其应用J。化工进展():-。郝晓敏,谷长生,宋文东,等酸法江蓠菜岩藻多糖提取工艺及其性质研究J安徽农业科学,,():~,杨云,刘福勤,冯卫生,等碱法提取大枣渣多糖及活性炭脱色的工艺研究J食品与发酵工业,,():~田洛,宣依昉,范荣军,等醇碱提取法提取黄芪多糖J吉林大学学报,():~李岱张静孙润广超声波处理对柴胡多糖提取率的影响J时珍国医国药,():~王琴,邹杰,温其标超声强化提取银杏多糖J食品与发酵工业,():~。崔亦华,崔英德,易国斌应用广泛的天然多糖及其提取方法J广州化工,():~王元凤,金征宇酶法提取茶多糖工艺的研究J江苏农业科学:~。LeiLSEffectofGanodermapolysacchridesonthecellsubpopulationsandproductionofinterleukininmixedlymphocyteresponseActaPharmaeutica,,,():~。李金忠马海乐吴沿友.山药多糖的超声辅助提取技术研究[J].食品研究与开发():。]LinWTNianBYWangZM.StudyonultrasoundfortifiedextractedpolysaccharidesfromAgaricusblazeiMurillandmechanism[J].BaojiUniversityArtsandScience():。熊先锋曲静然李雨等超声波酶法提取水溶性灵芝多糖的研究J山东轻工业学院学报,():郑静常遁滔林英,等超声波法和超声波酶法提取灵芝多糖的条件研究J食用菌学报,():~林树钱,王赛贞,林志彬草栽与段木栽培灵芝活性成分的分离与鉴定mdash多糖肽成分的提取、纯化及性质J中草药,,():~谢意珍,张智,李森柱,等灵芝的开发及加工研究新进展冈微生物学杂志,,王新灵芝多糖的提取及抗氧化活性研究D江苏:江苏大学陈国符植物纤维素化学北京:轻工业出版社,。PAGE

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