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胶乳凝集透射终点法测定糖化血红蛋白
郑 彤"+刘洪斌$+戴友良"+王 峰"
’",宁波市李惠利医院检验科+浙江 *"-#)#.$,宁波大学医学院生化教研室+浙江 *"-$""(
关键词!胶乳凝集.透射终点法.糖化血红蛋白
中图分类号!/))0,0" 文献标识码!1
糖化血红蛋白’23456(是血红蛋白的成份之
一+其含量不受血糖浓度暂时波动的影响+可反映测
定前 %7"$周血糖的平均水平8测定 23456作为糖
尿病的诊断和评价糖尿病的控制+是一项具有重要
意义的实用指标9":8我们应用胶乳凝集透射终点法+
在自动生化分析仪上测定 23456的百分含量+得到
满意效果+现报道如下8
材 料 和 方 法
一;仪器和试剂
",1<6=>?@公司的AB@6CDE@FG-全自动生化
分析仪.HIJ0)#自动全波长分光光度仪8
$,23456胶乳凝集法测定试剂由卫生部临床
诊断试剂实验中心提供+试剂K甘氨酸缓冲液悬浮
胶乳.试剂L冻干抗人 23456鼠单克隆抗体和羊抗
鼠 MNO抗体’临用时用甘氨酸缓冲液稀释溶解+低
温 $7%P避光保存(.标本制备用溶血液.不同
23456百分浓度的标准液’#Q7"),&Q(8
*,23456离子捕捉免疫分析法’MFM4法(测定
试剂由 433ERR公司提供且推荐为参考MATCH_
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word文档格式规范word作业纸小票打印word模板word简历模板免费word简历
_1714158939950_0+适配
其 MSG免疫分析仪8
二;方法
",原理 利用抗原抗体反应原理直接测定
23456的百分含量的方法8样本中总 23和 23456
与胶乳有相同的非特异性吸附而固相化8当加入
23456的特异性鼠单克隆抗体后形成胶乳J23456J
抗人 23456鼠单克隆抗体的复合物+此复合物由于
羊抗鼠 MNO抗体而形成凝集+凝集量因胶乳表面固
相化的 23456量的不同而异8通过测定透射吸光度
的变化来表示凝集量+与 23456百分浓度的标准曲
线比较后+求出样品中 23456的百分含量8
$,标本制备 采用肝素抗凝+从*###DT>U@$
>U@离心分离后的血红细胞层中取样"#V5+加入">5
溶血液溶血+溶血后标本$7%P条件下保存待测8
*,操作参数 反应类型为双试剂终点法.反应
温度 *&P.主波长 0-#@>+副波长 -$#@>.样品 0
V5+试剂K $$-V5+反应 ->U@+再加试剂L &-V5+立
即读吸光度+以此吸光度为空白吸光度+->U@后反
应停止+再读终点吸光度+根据终点吸光度和空白吸
光度的差值+对照标准曲线’仪器检测不同浓度梯度
的 -个标准品后自动回归计算+曲线参数贮存于仪
器数据库中(+得出结果8
结 果
一;空白吸光度测定时间的选择 通过 HIJ
0)#自动分光光度仪全程监测反应过程+当样本和
试剂K’胶乳液(反应完全后+吸光度呈稳定状态+当
加入试剂L后+因稀释效应+吸光度立即有较大的变
动+而此时胶乳化的 23456和检测抗体还没有立即
反应+故利用加入试剂L后的瞬间测空白吸光度+既
可减去样品空白+又可消除因加入试剂L后引起吸
光度较大变动而造成的系统误差8
二;线性范围 取高 23456浓度样本 "份+按
梯度’#Q+-Q+"#Q+W"##Q(用溶血液依次稀释后
分别测定+在 $,*Q7"-,)Q范围内 23456的检测
浓度和百分稀释度呈良好线性关系’XY#Z[0"+\]
#,#"(8
三;重复性试验 选择正常’),0Q(和异常
’"#,&Q(样本各 "份+在 "次实验中测 $#次+批内
F^ *,$Q和 ),"Q.每天不同时间测 $次+连续测
"#_+批间 F^ ),*Q和 -,)Q8
四;比较试验 取 *#例临床样本’23456含量
*,%Q7"),$Q(+分别用本法’‘(与 MFM4法’G(同
时 测 定+‘Y #,[0%Ga #,)"$Q+XY #,[[%+\
]#,#".MFM4法bcde为-,)%Qd$,#0Q+本法为
’下转第 $*)页(
f"*$f上海医学检验杂志 $##"年第 "0卷第 )期
万方数据
细胞因子!通常认为病原体反复感染!血中免疫复合
物的长期刺激以及肝硬化失代偿期所产生的门脉高
压!肠道缺血缺氧等等原因可以导致 "#$%&水平蓄
积而升高!因此!同正常对照组相比!肝硬化失代偿
期组 "#$%&水平升高!而细菌感染所释放的 ’()
应是引起 "#$%&水平升高的最主要原因!所以!如
果肝硬化失代偿一旦合并细菌感染!"#$%&水平又
呈现数倍的大幅度上升*作为白细胞共同抗原的
+,-.!既可以存在在淋巴细胞上!又可以存在在粒
细胞上!其中的 +,-./0是由幼稚细胞 +,-./1
衍生而成!在一定程度上也可以反映出炎症反应的
过程和严重程度*从以上的结果可见!在肝硬化失代
偿 期 组 和 肝 硬 化 失 代 偿 期 合 并 细 菌 感 染 组
+,-./02粒细胞数和 +,-./02淋巴细胞数呈现
不同程度的提高!其中!因 +,-./02粒细胞数在细
菌感染时变化更加显著!因此!+,-./02粒细胞数
和血清 "#$%&浓度的变化对辅助判断是否合并细
菌感染有一定帮助*此外!"#$%&本身在促进肝硬
化方面也起着十分重要的作用!例如!它能刺激储脂
细胞转化为肌纤母细胞样细胞并合成胶原!并且通
过刺激成纤维细胞增殖!以参与慢性肝病纤维化过
程*所以!血清 "#$%&浓度在一定程度上又可以反
映出疾病的严重程度!因此!通过对血清 "#$%&水
平和 +,-./02粒细胞数的检测!对了解炎症反应
和肝硬化严重程度也有一定的临床意义*
参 考 文 献
345丁一娟6腹水 "#$%&!7’%8!7’%9测定及其临床价知值
3:56中国现代医学杂志64;;;!4<=>?@;A4
5谢元林6肝纤维化相关性细胞因子研究进展3:56国外医
学6生理D病理科学与临床分册64;;9!49A>BC<9>%<9.6
3-5李东复6慢性肝病肝癌患者 7’%4D7’%9及 "#$<活性测
定3:56中国免疫学杂志64;;8!44页B
.=>.HI<=<9H!JK?=><;!LM?=?.*
五D 回收试验 在浓 度 为 >==<
SSTPU’及胆红素浓度达 <<.VSTPU’时!对本法无
明显干扰*
八D参考值 健康体检正常者 448例!男 8F
例!女 -;例!年龄 4;W8?岁!用本法测血浆 NO1PQ!
平均值 .=?HI?=8H!按 XYI=9HI8=!48A;BC4-?9%4-?;=
A收稿C??%?9%<. 修回C?4%?>%4;B
A本文编发C龚晓霖B
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