当归治疗阿托品诱发小鼠肠蠕动迟缓
JT
CVM
2016年第1期
当归治疗阿托品诱发小鼠肠蠕动迟缓实验研究
2
张彩霞1,刘峰林1,,任
22
远1,,马文梅1,袁菊丽1,王瑞琼1,吴国泰1,
(1.甘肃中医药大学,甘肃兰州730000;2.甘肃省中药药理与毒理学重点实验室,甘肃兰州730000)
摘要:目的:观察当归对阿托品诱发小鼠便秘的治疗作用。方法:动物分为对照组、阿托品组、当归低剂量组、当归中剂量组、当归高剂量组,对照组灌胃0.4mL生理盐水,其余各组以8mg/kg剂量连续灌胃阿托品4d,同时以4.8g/kg、9.6g/kg、14.4g/kg剂量连续灌胃当归水煎液4d,末次给药前12h停食给水,当归药液、生理盐水均含10%活性炭,给药30min后,颈椎脱臼处死各组8只小鼠,以炭末推进率、6h时间内的排粪重量为指标,观察当归对阿托品诱导小鼠肠运动的影响。采用SPSS17.0数据
分析
定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析
软件,应用单因素方差分析SNK进行组间比较。结果:与阿托品组比较,当归中剂量组炭末推进率差异显著(P<0.05),高剂量组差异极显著(P<0.01);与空白组6h内阿托品组排粪数量、粒数差异不显著;与阿托品组比较,当归中剂量组、当归高剂量组排粪数量、粒数差比较,
当归可以改善阿托品诱发的肠蠕动迟缓,其机制可能为解除阿托品引起的肠肌异不显著,但有促进排粪趋势。结论:麻痹。
关键词:当归;阿托品;便秘;肠蠕动;炭末推进率;肠平滑肌麻痹;蠕动迟缓中图分类号:S857.3
文献标志码:A
文章编号:1000-6354(2016)01-0032-04
DOI:10.13823/j.cnki.jtcvm.2016.01.009便秘不是一个独立的疾病或综合征,而是多种疾病的排粪次数减少、粪质变一种症状,主要症状包括排粪困难、硬干结等,临床可以分为功能性便秘和继发性便秘,后者是指有确定病因导致便秘,如结肠、直肠、肛门病变、内分泌代谢性疾病、中枢神经系统疾病、结直肠结构异常以及
收稿日期:2015-09-16
基金项目:甘肃省自然科学基金(N0BH2012-122);甘肃省中药
药理与毒理学重点实验室2015年度开放基金(NoZDSYS-KJ-2015-008)
作者简介:张彩霞(1966-),女,实验师,主要从事无机药理学研
E-mail:996564553@qq.com究,
通讯作者:刘峰林(1971-),男,副教授,博士,主要从事中药药效
与毒理研究,Tel:13519440955,E-mail:lfl@gszy.edu.cn
实
验技术
药源性便秘。阿托品临床用于治疗中毒性休克、锑剂中毒有机磷农药中毒、内脏绞痛、慢性心引起的阿斯氏综合征、
律失常等,近年来报道其毒副反应主要表现为吞咽困难、头躁动不安、疲倦感、发热、排尿困难、肠蠕动减少等[1]。胆痛、
碱通过作用于肠黏膜下小动脉的节前神经,抑制三磷酸腺苷导致的肠黏膜下小动脉收缩[2],调节肠液分泌,反之,阿托品则可能导致肠道黏膜下小动脉收缩,肠黏膜下灌流减少,引起肠液分泌减少,粪便干燥;阿托品也有用来治疗肠
4]
,也可导致便秘并用来制作肌痉挛性便秘的文献报道[3,
便秘模型[5]。文献记载当归有润肠通便的功效,基于近年研究表明其有兴奋正常肠平滑肌、提高肠蠕动促进炭末推进、治疗便秘的作用[5,6]。目前尚无文献研究当归对阿托品引起的肠蠕动与便秘治疗作用的报道,笔者等通过给予阿
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Optimizationoncellulase-assistedextractionoftotalflavonoidsfromFructusRosae
Laevigataebysinglefactorexperiment
CHENZhi-gang,SHANGuang-qiang,LEIHong-yu,TANYu-qin,SUJian-ming
(CollegeofVeterinaryMedicine,HunanAgriculturalUniversity,ChangshaHunan410128,China)
Abstract:Tooptimizetheprocessforcellulase-assistedextractionoftotalflavonoidsfromFructusRosaeLaevigatae,theeffectsofethanolconcentration,ratioofliquidtomaterial,extractiontime,cellulasedosage,pHvalueandextractiontimesontheyieldoftotalflavonoidsfromFructusRosaeLaevigataewasinvestigatedbysinglefactortest.Theresultsshowedthattheoptimumextractionconditionswere40%ofethanol,ratioofliquidtomaterialof30∶1,extracting2timesand120mineverytime,cellulasedosageof1.0%,pHof6,andextractiontemperatureof60℃.Undertheseconditions,yieldoftotalflavonoidsfromFructusRosaeLaevigataewas(79.30±1.59)mg/g.Therefore,itisfeasiblethatthetotalflavonoidsfromFructusRosaeLaevigataefruitswereextractedbycellulase-assistedextractionmethod,andtheyieldwasrelativelyhigh.Keywords:cellulase;FructusRosaeLaevigatae;totalflavonoids;yield
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2016年第1
期
托品造成肠蠕动减慢动物模型,采用灌胃给药观察当归对小鼠模型肠蠕动减慢及排粪的影响,探究当归对阿托品引起的肠蠕动迟缓的疗效。11.1
材料与方法试验药物
当归药材,购于甘肃岷县当归城,甘肃中医药大学鉴定教研室杨扶德教授鉴定为AngelicaesinensisOlive.的干加水500mL,浸燥根,取当归药材200g粉碎为10目粉末,泡10min,加盖煎煮,微沸20min,药液过滤,药渣压榨取汁合并,3000r/min离心,除去沉淀,上清液调整至0.3g/mL、0.6g/mL、0.9g/mL,备用。1.2
试剂
0.5g/mL炭末溶液(1%羧甲基纤维素液配制);硫酸阿托品(天津药业集团新郑股份有限公司,规格:0.5mg/mL;生产批号:1402231),实验时稀释至所需浓度。1.3
试验器材
灌胃针头(1mL/只)、手术剪、镊子、直尺(20cm)、分。析天平(0.001赛多利斯BL120F)1.4
动物
雄性昆明种小鼠80只,体质量(22-26)g,购于甘肃中医药大学实验动物中心提供,许可证号:SCXK(甘)2011-001,0002380,实验室温度:20-25℃,湿度:45%~55%,合格证号:
随机分组后,喂养1周,给予人道主义关怀,小鼠状况正常,开始试验。1.51.5.1
方法
便秘模型建立条件筛选实验
7]
参考有关献[4,,将小
照组、阿托品组、当归高剂量组、当归中剂量组、当归低剂量组。对照组每天灌胃生理盐水,其他组每天灌胃阿托品8.0mg/kg,30min后,当归高、中、低剂量组分别灌胃当归煎液(相当于生药剂量)14.4g/kg、9.6g/kg、4.8g/kg,阿托对照组灌胃同体积生理盐水,灌胃体积0.4mL/只,品组、
按照上述方法连续灌胃给药4d,末次给药前12h停食给水,给药后计时,收集6h内排泄物,观察粪便性状,记录每只小鼠6h内累计排粪便的总重量。1.5.4
数据处理
数据均用±S表示,数据采用SPSS17.0数据分析软件,应用单因素方差分析处理进行组间比较。2
结果
阿托品对小鼠炭末推进的影响、当归对阿托品干预的小鼠炭末推进的影响、当归对小鼠排便量的影响见表1-表3。表1阿托品对小鼠炭末推进的影响(n=6)
Table1Effectofatropineoncharcoal-powderpropellingrateinmice
组别对照组
阿托品低剂量组阿托品中剂量组阿托品高剂量组
动物/只6666
剂量/mg·kg-1生理盐水
248
炭末推进率/%83.35%±6.2982.80%±8.2571.80%±9.1970.06%±2.74*
实验技术
注:*与对照组比较P<0.05。Notes:*VScontrolP<0.05.
鼠24只分为4组与即空白对照组,阿托品低剂量2mg/kg、中剂量4mg/kg、高剂量8mg/kg,灌胃体积0.4mL/次,连续4d;末次给药前12h停食给水,给药30min后,灌服10%活性25min后颈椎脱臼处死各组动物,打开腹腔,分炭0.4mL,
离肠系膜,剪取上端至幽门、下端至回盲部的肠管,轻轻将小肠拉成一条直线,测量小肠长度和炭末推行长度,按公式计算炭末推进率,结果见表1。0.5mg/mL阿托品可以引起便秘,选用该浓度阿托品进行便秘模型的建立。
炭末推进率/%=炭末前沿与幽门的距离(cm)/幽门至回盲部小肠全长(cm)1.5.2
炭末推进实验
实验动物40只,随机分成5组,
阿托品组、当归高剂量组、当归中剂量组、当归即对照组、
低剂量组。对照组每天灌胃生理盐水,其他组每天灌胃阿托品8.0mg/kg,30min后,当归高、中、低剂量组分别灌胃当归煎14.4g/kg、9.6g/kg、4.8g/kg,阿托品液(相当于生药剂量)
组、对照组灌胃同体积生理盐水,灌胃体积0.4mL/只,按照上述方法连续灌胃给药4d,末次给药(当归药液、生理盐水均含10%活性炭)前12h停食给水,给药30min后,颈椎脱臼处死各组动物,打开腹腔,分离肠系膜,剪取上端至幽门、下端至回盲部的肠管,轻轻将小肠拉成一条直线,测量小肠长度和炭末推行长度,按“1.5.1”中公式计算炭末推进率。1.5.3
小鼠排粪实验
小鼠40只,随机分成5组,即对
表2当归对阿托品干预的小鼠炭末推进的影响
Table2EffectofRadixAngelicaSinensisoncharcoal-powderpropellingrateinmiceintervenedbyatropine
组别对照组模型组
当归低剂量组当归中剂量组当归高剂量组
动物/只88888
剂量生理盐水(0.4mL)
8.0mg/kg4.8g/kg9.6g/kg14.4g/kg
炭末推进率/%0.82±0.150.74±0.050.87±0.040.88±0.10*0.89±0.08**
注:*与模型组比较P<0.05,**与模型组比较P<0.01。Notes:VSmodelgroup,*P<0.05,**P<0.01.
表3当归对小鼠排粪量的影响
Table3EffectofRadixAngelicaSinensisonfecesamountsofmiceintervenedbyatropine
组别对照组阿托品组当归中剂量组当归高剂量组
动物数/只粪便数/粒排粪质量/mg粪粒均重/mg粪便形状
8888
2.88±2.52127±1531.50±1.1266±803.50±2.24142±613.88±2.93175±170
44.144.540.545.2
正常紧实细小松散、粒径较大松散、粒径较大
由表1可知,小鼠经灌胃阿托品后,与空白组比较,8.0mg/kg剂量阿托品对小鼠肠蠕动明显抑制(P<0.05),
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故选择8.0mg/kg剂量为肠蠕动迟缓剂量。由表2可知,模型组与对照组组间差异不显著,但模型组小鼠肠蠕动被抑制,这与阿托品易产生耐受作用有关[8];与模型组比较,当归中剂量组差异显著(P<0.05),高剂量组差异极显著,提示当归对阿托品诱导的小鼠肠蠕动抑制有治(P<0.01)
疗作用。由表3可以看出,与空白组比较,6h内阿托品组排粪数量、粒数差异不显著;与阿托品组比较,当归中剂量当归高剂量组均差异极显著。本次实验结果显示,当归组、
可以改善阿托品导致的肠蠕动迟缓,各剂量组有促进肠道
内容
财务内部控制制度的内容财务内部控制制度的内容人员招聘与配置的内容项目成本控制的内容消防安全演练内容
物排出的作用,各剂量组小鼠排出粪便较阿托品组软,粒径较大,质地较松散,显示当归对粪便的成型有影响,可能有助于粪便排出。3
讨论
小肠平滑肌α-受体被阻断剂阻断后,阿托品对小肠平滑肌蠕动的抑制会部分或完全消失[9],胆囊收缩素、P物质对肠蠕动有促进作用,去甲肾上腺素抑制肠蠕动可能基阿托品能引起小肠肌层肾上腺于抑制这些物质的释放[10]。
ationofneurogenicandappliedATPconstrictionsinthesubmucosalarteriolesoftheguinea-pigsmallintestine[J].BritishJournalofPharmacology,1999,126(7):1625-1633.[3]GramschH.Contributiontothetreatmentofspasticobstip-ation[J].TherapiederGegenwart,1958,97(5):194-195.[4]BazanovaSV,Klement'EvFV,KiselevaKI.Comparative
effectsofatropin,lidolandthiphenintherapyofdiskineticconstipation[J].SovetskaiaMeditsina,1954,18(4):29-31.吴国泰,朱书强.油当归炮制前后润肠通便作[5]龙全江,
用研究[J].甘肃中医学院学报,2006,23(1):51-53.[6]王志旺,魏舒畅,冯祥瑞,等.不同提取
工艺
钢结构制作工艺流程车尿素生产工艺流程自动玻璃钢生产工艺2工艺纪律检查制度q345焊接工艺规程
所得当归精
2013,油对平滑肌作用的比较[J].中国医院药学杂志,33(13):1061-1065.
[7]崔生辉,李业鹏,李玉伟,等.抑制肠蠕动的小鼠模型的
建立[J].卫生研究,2000,29(6):385-386.
[8]KitazawaT,FuruhashiH,UmezawaK,etal.Pharma-cologicalpropertiesoftheatropine-resistantcontractionofthecarp(Cyprinuscarpio)intestinalbulbinducedbytransmuralstimulation[J].ComparativeBiochemistryandPhysiologyC,1987,88(2):225-232.
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musclecontractionsafteradministeringalpha-adrenore-ceptorblocka-ders[J].FiziologicheskiizhurnalSSSRimeniIMSechenova,1984,70(2):173-179.
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1984,19(8):561-565.作用的实验研究[J].药学学报,
胆素能神经肾上腺素释放增加,间接导致肠蠕动P物质、囊收缩素释放减少,从而使肠蠕动减慢;当归对乙酰胆碱、组织胺以及氯化钡引起的气管平滑肌痉挛收缩有明显的解痉作用,该作用不能被心得安所阻断[11],说明当归不是通过肾上腺素能受体作用导致胆囊收缩素、P物质释放而促进肠蠕动。该研究结果显示,当归可以治疗阿托品引起的肠运动迟缓,机制可能在于解除阿托品引起的肠肌麻痹,增加肠肌蠕动节律的协调性,干预肠黏膜对肠内容物水分的吸收而发挥润肠通便的功效。参考文献:
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物应用,2010,4(11):118-119.
[2]KotechaN.MechanismsunderlyingAChinducedmodul-
实验技术
EffectsofRadixAngelicaSinensisintherapyofintestinalhypoperistalsisinducedby
atropineinmice
ZHANGCai-xia1,LIUFeng-lin1,2,RENYuan1,MAWen-mei1,YUANJu-li1,
WANGRui-qiong1,WUGuo-tai1,2
(1.GansuUniversityofChineseMedicine,LanzhouGansu730000;2.KeyLaboratoryofTCMPharmacologyandToxicologyof
GansuProvince,LanzhouGansu730000,China)
Abstract:Objective:TodeterminethetherapeuticeffectofAngelicaSinensis(AS)onatropine-inducedconstipation.Methods:Micewererandomlydividedintocontrol,atropinegroup(8mg/kg),AShigh-dose(14.4g/kg),ASmedium-dose(9.6g/kg)andASlow-dose(4.8g/kg)groupswith8ineach.Controlgroupwasgiven0.4mLofnormalsalinebygavage,othergroupsweregiven8.0mg/kgofatropineanddifferentdoseofASextractwithwaterfor4dayssimultaneously.Afterfoodsupplywereprohibitedfor12h,everytestedsamplemixed10%powderofcarbonisadministratedinlastig,30minlater,partialmiceofeverygroupwereexecutedbyremovingcervicalvertebraforobservingcharcoal-powderpropellingrate,andothermiceofeverygroupwererecordedtotheiramountoffecesin6hoursafteradministration.Results:Comparedwithatropinegroup,Charcoal-powderpropellingratewasincreasedinAShigh-dosegroup(ASHDG,P<0.01)andASmedium-dosegroup(ASMDG,P<0.05).ThefecesamountsinASHDGandASMDGhadnostatisticsignificancecomparedwithcontrolgroup.Conclusion:RadixAngelicaSinensiscanresistintestinalhypoperistalsisinducedbyatropine,themechanismmaybeabolishmentofintestinalmuscleparalysiscausedbyatropine.
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2016年第1
期
两种多糖对家兔眼刺激性试验
张哲1,李新圃1,杨峰1,罗金印1,李晓强2,刘龙海1,李宏胜1
(1.中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所
验室,甘肃兰州
农业部兽用药物创制重点实验室
甘肃省新兽药工程重点实730000)
730050;2.西藏奇正藏药股份有限公司,甘肃兰州
摘要:为了检测低聚糖硫酸酯与右旋糖酐硫酸酯2种多糖对家兔的眼刺激性,评价其安全性,试验采用同体左右侧眼珠自身对比法,以生理盐水为对照,将不同浓度的两种多糖溶液滴入家兔眼睛,每天用药3次,连续使用7d。参照国家食品药监局颁布的眼刺激反应评分标准计算其总分值,评价2种多糖对家兔的眼刺激性。结果表明,2种多糖不同浓度给药组和对照组眼刺激反应平均分值均为0,表明2种多糖对家兔眼睛均无刺激性,临床使用安全。
关键词:低聚糖硫酸酯;右旋糖酐硫酸酯;奶牛乳房炎;刺激性试验中图分类号:S859.83
文献标志码:A
文章编号:1000-6354(2016)01-0035-03
DOI:10.13823/j.cnki.jtcvm.2016.01.010多糖又称多聚糖,是一类由相同或不同的单糖及糖醛酸通过糖苷键连接缩合而成的重要的生物大分子,在自然界中分布极为广泛。研究表明,多糖不仅具有抗肿瘤作用,抗病毒、免疫调节等方面也有广泛的药理活性,并在抗菌、
且对机体的毒副作用较小,故对于多糖的研究己成为当前生物科学的热门领域[1]。低聚糖是由2-10个单糖以糖苷键连接起来的糖类聚合物,由于其聚合度低,所以被称为低聚糖。右旋糖酐又名葡聚糖,是蔗糖经肠膜状明串珠菌发酵产生的高分子葡萄糖聚合物,大量研究表明,这2种糖类聚合物均具有较强的生物活性,已被广泛应用于化学、食品、医药等多个领域[2-7],且有研究表明,低聚糖和右旋糖酐经硫酸酯化后,拥有更广泛的生物活性,如抑菌、抗病毒及增强机体免疫功能等[8-11]。
笔者等前期的相关试验已证实,2.5%的低聚糖硫酸酯与右旋糖酐硫酸酯在体外对金黄色葡萄球菌和无乳链球菌具有一定的抑菌作用,但能否将其用于奶牛乳房炎治疗药为此,本物,首先要检测这2种多糖对动物机体的刺激性,试验以新西兰家兔为试验动物,进行了眼刺激性试验,为这2种多糖用于奶牛乳房炎的治疗奠定基础。
11.11.1.11.1.2
材料与方法材料实验动物
健康新西兰家兔8只,公母各半,体质
购于兰州大学实验动物中心。量约2kg,
试验药物低聚糖硫酸酯(DEAE)及右旋糖酐硫酸
酯(DS-4000),外观为白色粉末状,由西藏奇正藏药股份有限公司生产并提供。1.21.2.1
方法
多糖溶液的配制
电子天平精确称取DEAE和
实
验技术
DS-4000适量,使用生理盐水配制成2.5%和1.0%的多糖溶液,高压灭菌备用。1.2.2
试验动物分组及给药方法
将家兔分成4个组,每
(公母各半),第1组家兔右眼滴入2.5%的DEAE,左组2只
眼滴入生理盐水作为对照;第2组家兔右眼滴入1.0%的DEAE,左眼滴入生理盐水作为对照;第3组家兔右眼滴入2.5%的DS-4000,左眼滴入生理盐水作为对照;第4组家兔右眼滴入1%的DS-4000,左眼滴入生理盐水作为对照。使用剂量均为每次2滴,约0.1mL,给药后使眼睑被动闭合5-10s,每天用药3次,连续使用7d。1.2.3
眼刺激性评价
在每天给药前以及最后1次给药
后的1、2、4、24、48和72h,使用手持式裂隙灯检查并记
收稿日期:2015-10-13
基金项目:甘肃省科技支撑
计划
项目进度计划表范例计划下载计划下载计划下载课程教学计划下载
(144NKCA240);甘肃省农业科技
创新项目(GNCX-2013-59)
作者简介:张哲(1990-),男,硕士研究生,研究方向:奶牛乳房炎
防制,E-mail:Hkdzhangzhe@163.com
通讯作者:李宏胜(1964-),男,研究员,博士,主要从事奶牛疾病免
疫及预防,E-mail:myslhs@163.com
《化学药物刺激性、过敏性和溶血性录眼部异常反应,参照(国食药监注[2005]106号)中的评分研究技术指导原则》
标准(表1)进行评分。将每只家兔的眼角膜、虹膜和结膜的刺激反应分值相加即为该兔眼刺激反应的总积分,将每只家兔眼刺激反应总积分相加后除以家兔数,即为该受试按表2的评价标准判断不物对家兔眼刺激性的最后分值。同浓度2种多糖的眼刺激性。
Keywords:AnagelicaeSinensis;atropine;constipation;intestineperistalsis;Charcoal-powderpropellingrate;intestineparalysis;hypoperistalsis