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急性白血病的诊断分型.ppt

急性白血病的诊断分型

六月的雪
2018-09-22 0人阅读 举报 0 0 暂无简介

简介:本文档为《急性白血病的诊断分型ppt》,可适用于医药卫生领域

白血病的概念白血病是造血干祖细胞发生恶变白血病的概念分化障碍增殖失控原始和幼稚细胞增生累积凋亡受阻浸润其它器官和组织原始和幼稚细胞(白血病细胞)白血病的概念临床表现:正常造血受到抑制:乏力、面色苍白、发热、出血浸润:肝脾淋巴结肿大、皮肤、中枢神经系统等浸润急性白血病分型FAB分型:细胞形态学及细胞化学染色AML:M、M、M、M、M、M、M、MALL:L、L、LWHO分型:年修订MICMMICM整合诊断M:形态学、细胞化学、病理I:免疫学包括免疫组化、流式细胞分析C:染色体、荧光标记探针的原位杂交(FISH)M:分子生物学:白血病融合基因、基因突变、克隆性基因重排、正常基因表达水平过高*MICM整合诊断对恶性血液病进行诊断和分型重复性更好、更客观并且能更好地帮助判断预后指导制定治疗方案及策略监测疗效细胞形态及细胞化学分析的优缺点优点:直观:镜下直接观察细胞形态对MDS的诊断、一些少见的、大的恶性细胞的确定优于流式细胞分析恶性细胞的比例更准确:简单快速有显微镜即可完成报告缺点:人为因素影响大难以鉴别细胞的成熟阶段B、T等系列的恶性细胞细胞较成熟时难以鉴别良恶性不能提供太多的预后信息形态M*病理及免疫组织化学的优缺点标本直接固定不容易损失信息恶性细胞比例更客观对一些抽不出或少见细胞仍可诊断。如伴骨髓纤维化、MM、淋巴瘤、转移癌、组织细胞、巨噬细胞、树突细胞、何杰金细胞等可以直接观察到组织结构容易确定恶性细胞的组织部位诊断慢、受诊断者个人经验及知识水平影响大对一些组织结构无破坏、细胞形态改变不大的细胞难以鉴定良恶性及成熟度有些恶性细胞在液体中难以获取组织标本难以判断组织结构形态M*FCM的工作原理摘自FlowCytometry:FirstPrinciple流式I*FCM检测的参数FSC:细胞大小SSC:细胞内颗粒多少及细胞内构造的复杂性FL:多种(荧光素耦联的单克隆抗体)流式I*正常BM细胞的图形(CDSSC)流式IR:幼稚细胞群正常骨髓中此群细胞数量极低或空缺*流式I流式细胞术判断急性白血病:或者以上细胞表达早期标志(CD、HLADR、TdT)或者不表达成熟标志系别标志:髓系B系T系白血病细胞的系列特异性标志如有系或以上的特异性标志可诊断为急性混合性白血病流式I髓系MPO(用FCM免疫组织化学染色细胞化学染色证实)或单核细胞(至少有以下标志中的项阳性:NSE、CDc、CD、CD、CD*、溶酶体T细胞系cCD(用抗CDepsilon链的单抗及FCM分析不能用免疫组化的抗CDzeta链多克隆来检测因为后者不是T细胞特异性抗原)或sCDB细胞系CD强阳性并同时有以下标志中的至少项阳性:CDa、cCD、CD或CD弱阳性并同时有以下标志中的至少项阳性:CDa、cCD、CDAML(病例)流式I*ALL(病例)流式IFCM的优缺点优点:一次可检测数万至数十万个细胞上的数十种标记可同时检测每个细胞的六个以上参数敏感性高分析全面更容易区分良恶性恶性细胞的系列及成熟度可帮助确定免疫治疗的靶点并监测疗效如CD、CD是监测MRD覆盖面最广的方法。快速、简便、重复性好缺点:不能确定组织结构一些罕见的大细胞不能分析到一些细胞粘附性高难以抽出。因此对HL等难以确诊。判断恶性细胞的比例不如形态准确对M、MDS的诊断不如形态预后价值不如染色体和基因流式I*诊断误区举例原始细胞增多是诊断前体恶性血液病尤其AL的重要指标但原始细胞应根据免疫学标志基因染色体证实为恶性造血前体细胞一些形态上的原始细胞可以是正常造血细胞(尤其见于儿童感染后GCSF,GMCSF等刺激或化疗后或移植后)病例儿童BALL,化疗年后停药来我院复查骨髓涂片的幼稚细胞流式幼稚B淋巴细胞增生未见异常表型病例NK细胞白血病移植后天骨髓涂片的幼稚细胞流式:未见表型异常细胞CD阳性细胞为幼稚B淋巴细胞中期分裂相的染色体分析细胞遗传学CAML:~的患者细胞遗传学可检出异常克隆ALL:大约~的患者可检出克隆性染色体畸变细胞遗传学C一些染色体有诊断价值:如重现性染色体异常如t()inv()、t()、t()(qq)t()(qq)t(),t()可直接诊断急性白血病一些染色体和或基因有辅助诊断价值如q、CEP、q、CEP、q、CEPY、P高度疑似MDS等有、q、t()、t()、t()、复杂染色体等的急性白血病预后不好染色体的诊断价值细胞遗传学C*有丝分裂相少或缺如染色体质量低劣显带不佳染色体异常复杂如果恶性细胞不分裂其结果是假阴性由于分析的细胞少有部分白血病患者无染色体异常监测残留白血病不敏感白血病染色体分析存在的问题:细胞遗传学C*荧光原位杂交(FISH)利用已知核酸序列作为探针以荧光素直接标记后与靶DNA进行杂交最后在荧光显微镜下观察杂交信号从而对标本中待测核酸进行定性、定位和定量分析细胞遗传学CBCRABL双色双融合探针BCRABL额外信号探针有独立的诊断及预后价值可以检测出显微镜下人眼难以分辨的染色体异常诊断时间比染色体短与染色体分析比较对诊断人员的经验依赖程度低对不分裂的细胞也可以分析分析的细胞数量比染色体多更能反映正常和恶性细胞的比例监测残留白血病比染色体敏感可以对既往的骨髓片回顾分析进一步明确或排除诊断探针昂贵每次只能分析种异常只能分析已知的染色体或基因异常FISH的优缺点细胞遗传学C*急性白血病按照细胞遗传学亚型的预后分级预后AMLALL低危中危高危inv()或t()t()t()正常核型t(),其它复杂异常(累及三条以上染色体异常)qqinv(),t()q非t()t()t()>超二倍体t()正常核型q,t()t()t()t()t()亚二倍体,近二倍体单体核型(monosomalkaryotype,MK)AML,MDS中的预后价值定义:有两条以上的常染色体为单体或一条常染色体为单体另一条染色体是结构异常细胞遗传学C日本两个移植中心进行异基因造血干细胞移植的AML和MDS共例患者显示MK组患者年的OS最短为细胞遗传学CEBMT登记的在CR进行异基因造血干细胞移植的初发AML例MK的yrOS:~MK的yrOS:~细胞遗传学C有独立的诊断及预后价值可以检测出染色体或FISH不能检测出的异常联合染色体和FISH增加了对疾病预后的判断能力。诊断时间比染色体及FISH短与染色体及FISH分析比较对检测人员的经验依赖程度低是最敏感的监测残留白血病的指标对试验设计、试验质控要求高对无基因异常的疾病难以诊断疾病是复杂的仅有基因异常未必完全决定预后基因检测的优缺点分子生物学M*种白血病融合基因(种变异体)筛查分子生物学MAMLEAP()AMLETO()AMLMDS()BCRABL()CBFbetaMYH()DEKCAN()dupMLL()EAHLF()EAPBX()FIPLPDGFRalpha()MLLAF()MLLAF()MLLAFp()MLLAFq()MLLAF()MLLAF()MLLAF()MLLAFX()MLLELL()MLLENL()NPMALK()NPMMLF()NPMRARalpha()PLZFRARalpha()PMLRARalpha()SETCAN()SILTAL()TELABL()TELAML()TELPDGFR()TLSERG()*白血病的诊断与分类步骤增加的血液细胞是良性还是恶性前体与外周(成熟)恶性淋巴瘤白血病的区别也就是急性和慢性白血病的区别恶性细胞的系列来源预后评估*白血病的诊断与分类步骤增加的血液细胞是良性还是恶性细胞形态:急性白血病原始细胞明显增加一些白血病有明显的特征如auerrsquos小体APL的异常早幼粒细胞有外浆、大量的颗粒等免疫标志异常表达:跨系表达、早晚期同时表达、罕见细胞大量存在等单克隆轻链表达、克隆性TCR基因重排、DNA异常急性白血病特有的染色体和或基因*恶性前体与外周(成熟)淋巴细胞疾病的鉴别前体细胞型:ALL,淋巴母细胞淋巴瘤B:除了B细胞标志外,CDdim、CD、TdT、CDT:除了T细胞标志外,CDdim、CD、TdT、cCD、sCD、CDa外周(成熟)细胞:无以上前体细胞标记BT*AML危险分层指标高危险:染色体单体异常、Inv()t()、ge个的复杂染色体异常、、q、、q、T()(BCRABL)、、伴其它改变的p异常、除t()MLLAF以外的累及qMLL基因的异常、t()(pq)RBMMKL、t()(pq)DEKNUP血WBCLFLTITD基因突变同时合并以下指标至少一种:TET、DNMTA、MLLPTD突变或染色体异常年总生存率为无FLTITD突变但有TET、ASXL、PHF和或MLLPTD突变混合型*AML危险分层指标低危险AML:染色体正常且无FLTITD基因突变但有NPM及IDH或IDH突变者无cKIT基因突变及Y的t()(qq)AMLRUNX(AMLETO)AML、inv()(pq)t()(pq)CBFbetaMYHAML中等危险AML:不符合以上*摘自:PatelJP,*治疗后白血病缓解(用形态学方法检测不出其它部位也无肿瘤浸润)但用更敏感的技术仍可检测到白血病细胞称为微小残留肿瘤(MRD)检测MRD的方法主要包括流式细胞分析技术(FCM)或基因定量或荧光标记的原位杂交技术(FISH)微小残留肿瘤(MRD)用流式细胞技术检查出急性淋巴细胞白血病即使只有,均复发而对AML复发PMLRARA阳性的APL如反复检测出PMLRARA即使仅有~几乎都复发需要积极处理AMLETO基因如持续复发率较低不需要太强烈的治疗*******************

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