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支气管肺泡灌洗液细胞学检测技术规范(草案)

支气管肺泡灌洗液细胞学检测技术规范(草案) ·诊治方案· 支气管肺泡灌洗液细胞学检测技术规范（草案）中华医学会呼吸病学分会支气管肺泡灌洗（!"#）能直接获取肺内炎症免疫效应细胞，是探讨肺局部免疫病理过程的一种比较安全和有用的检查方法。对某些肺疾病，特别是弥漫性间质性肺疾病（如特发性肺纤维化、结节病、外源性过敏性肺泡炎、肺泡蛋白沉积症、风湿性疾病伴肺纤维化和 #$%&’()$%*组织细胞增生症等）、肺部肿瘤以及免疫受损患者的肺部感染等，!"#已成为辅助临床诊断和预后判断的重要检测手段。近 +, 年间支气管肺泡灌洗液（!"#-）...

·诊治方案 · 支气管肺泡灌洗液细胞学检测技术规范（草案）中华医学会呼吸病学分会支气管肺泡灌洗（!"#）能直接获取肺内炎症免疫效应细胞，是探讨肺局部免疫病理过程的一种比较安全和有用的检查方法。对某些肺疾病，特别是弥漫性间质性肺疾病（如特发性肺纤维化、结节病、外源性过敏性肺泡炎、肺泡蛋白沉积症、风湿性疾病伴肺纤维化和 #$%&’()$%*组织细胞增生症等）、肺部肿瘤以及免疫受损患者的肺部感染等，!"#已成为辅助临床诊断和预后判断的重要检测手段。近 +, 年间支气管肺泡灌洗液（!"#-）检测无论从检测范围和检测项目上都有了长足的进展。由于 !"#-检测受诸多因素的影响，如 !"#操作时混血，大气道分泌物混入，吸引负压大小，灌洗量，回收量，灌洗液在肺内停留时间的长短以及肺泡上皮通透性的改变等不同，所得结果亦有一定差异。因此，建立标准化和规范化的 !"#操作和 !"#-实验室检测程序是获得准确结果的关键和前提。现将 !"#操作及 !"#- 实验室检查技术做一原则规范。支气管肺泡灌洗操作方法一、术前准备同纤维支气管镜（纤支镜）术前准备，常规在纤支镜气道检查后于活检刷检前做 !"#。局部麻醉剂为 +.利多卡因。二、!"#操作技术 / 0灌洗部位选择：对弥漫性间质性肺疾病选择右肺中叶（!1或 !2）或左肺舌段，局限性肺病变则在相应支气管肺段进行 !"#。 + 0!"#操作步骤：（/）首先在要灌洗的肺段经活检孔通过一细硅胶管注入 +.利多卡因 / 3 + 45，做灌洗肺段局部麻醉；（+）然后将纤支镜顶端紧密楔入段或亚段支气管开口处，再经活检孔通过硅胶管快速注入 678灭菌生理盐水。每次 +2 3 2, 45，总量 /,, 3 +2, 45，一般不超过 6,, 45；（6）立即用 2, 3 /,, 44 9&（/ 44 9& : ,0/66 ;<$）负压吸引回收灌洗液，通常回收率为 1,. 3 =,.；（1）将回收液体立即用双层无菌纱布过滤除去粘液，并记录总量；（2）装入硅塑瓶或涂硅灭菌玻璃容器中（减少细胞粘附），置于含有冰块的保温瓶中，立即送往实验室检查。支气管肺泡灌洗液实验室检查一、!"#-细胞总数和分类计数检测 / 0将上述回收灌洗液装入塑料离心管内，在 18下以 / +,, ( > 4?%离心 /, 4?%，上清（原液或 /,倍浓缩）@ 7,8储存，用做可溶性成分的检测。 + 0经离心沉淀的细胞成分用 9$%;A * 液（不含 B$C C、D&C C）在同样条件离心冲洗 + 次，每次 2 4?%。弃去上清后加 9$%;A*液 6 3 2 45制成细胞悬液。也可以应用灌洗原液以减少细胞丢失。 6 0在改良的 E’FG$F’(计数台上计数 !"#-中细胞总数，一般以 / H /,I > # 表示。如果细胞数过高时，再用 9$%;A*液稀释，调整细胞数为 2 H /,I > #，并同时将试管浸入碎冰块中备用。 1 0细胞分类计数：采用细胞离心涂片装置，加入备用细胞悬液（细胞浓度为 2 H /,I > #）/,,!5，在 18 下以 / +,, ( > 4?%离心 /, 4?%，通过离心作用将一定数量的 !"#-细胞直接平铺于载玻片上。取下载玻片立即用冷风吹干，置于无水乙醇中固定 6, 4?%后进行染色，一般用 J(?&)K或 9L染色。 2 0在 1,倍光学显微镜下计数 +,,个细胞，进行细胞分类计数。二、!"#-中 M淋巴细胞亚群的检测 / 0采用间接免疫荧光法，将上述获得的 !"#- 细胞成分，用 /,.小牛血清 N *+< - 8，其中肺泡巨噬细胞 + " <4 ? +" +4，淋巴细胞 + " +@ ? +"+*，中性和嗜酸细胞均 = +" +*。（)）A淋巴细胞亚群：总 A细胞（BCD4 ）+ "@，A辅助细胞（BCD1 ）+ " !，A抑制细胞（BCDE ）+ "4，BCD1 - BCDE 比值 * "! 0 * "E。（收稿日期：)++)F+1F+1）（本文编辑：韩锟） ·征文· 重症肺炎论坛征文通知重症肺炎是呼吸系统感染临床处理中面临的最重要的挑战之一。为促进和交流该领域的研究，提高重症肺炎的临床诊治水平，中华医学会呼吸病学分会感染学组与中华结核和呼吸杂志编辑部定于 )++)年 *+月在江苏省镇江市举办重症肺炎论坛，欢迎参加，踊跃投稿。如无论文者，欢迎参会并授予继续教育学分。征文内容：（*）重症肺炎的流行病学研究；（)）病原学（社区获得性和医院获得性重症肺炎）及其抗生素敏感性；（4）抗菌治疗与评价（包括经验性治疗）；（1）免疫抑制和其他特殊人群肺炎；（!）预防与控制；（5）基础研究；（@）其它。来稿必须是在国内、外未公开发表者，全文字数限在 1 +++字左右，并附 * +++ 0 * !++字非结构式摘要 *份。截稿日期为 )++)年 5月 4+日。来稿请寄：北京市东四西大街 1)号中华结核和呼吸杂志编辑部收，并请于信封左上角注明“重症肺炎论坛征文”字样。《重症肺炎论坛》专题讲座选题（*）重症肺炎的新界定及相关问题（邓伟吾教授）；（)）重症肺炎病原学诊断采样技术及其临床应用上的争议（罗文侗教授）；（4）细菌耐药机制与对策（陈文彬教授）；（1）"F内酰胺酶研究及其进展（唐英春教授）；（!）呼吸机相关肺炎诊断治疗进展（何冰教授）；（5）呼吸机相关肺炎内源性感染机制（李华茵博士）；（@）抗革兰阳性菌抗生素研究进展（殷凯生教授）；（E）抗革兰阴性菌和抗真菌药物研究进展（刘又宁教授）；（<）重症肺炎抗菌治疗及其策略（何礼贤教授）；（*+）老年人和急危重症患者的肺部感染（孙铁英教授）；（**）GBH内肺部真菌感染的诊断及其争议（姚婉贞教授）；（*)）免疫受损宿主的肺部感染（瞿介明教授）；（*4）重症感染的生物调节治疗（郑金旭教授）；（*1）感染、7ICJ和 KL9（刘大为教授）；（*!）医院获得性肺炎的预防控制及 BCB指南（黄绍光教授）；（*5）临床流行病学 -循证医学在肺部感染中的应用（胡必杰教授）。 ·*<4·中华结核和呼吸杂志 )++)年 @月第 )!卷第 @期 BM/% N AOPQ,R IQ(S/, C/(，NO2T )++)，UV2 )!，WV"@

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