轻中度高血压患者中MTHFRC677T与血清叶酸水平变化的相关性研究

轻中度高血压患者中 M THFR C677 T 与血清叶酸 水平变化的相关性研究 项青云1 ,2 , 霍勇3 , 王梦德2 , 邢厚恂2 , 刘平2 , 李建平3 , 臧桐华2 , 徐希平2 【摘要】　目的 　探讨轻中度高血压患者亚甲基四氢叶酸还原酶 (MTHFR) C677 T 多态性位点与血 清叶酸水平变化间的关系。方法 　从哈尔滨、沈阳、北京、西安、上海、南京 6 城市收集的 480 位 28～75岁轻中度原发性高血压患者 ,按 1∶1∶1 的原则随机分为 3 组 ;对照组、0. 4 mg叶酸组、 0. 8 mg叶酸组每日分别服用10 mg马来酸依那普利、10 mg马来酸依那普利 + 0. 4 mg叶酸、10 mg马 来酸依那普利 + 0. 8 mg叶酸 ,连续服用 8 周。收集治疗前后的血清叶酸水平、MTHFR C677 T 位 点的基因型及其他相关指标。本研究对主要资料完整者 371 人 (男 156 人 ,女 215 人) 的 MTHFR C677 T 位点与血清叶酸水平变化间的关系进行统计分析。结果 　①对照组中 C677 T 基因型对叶 酸变化水平无明显作用 ,各基因型间的差异均无统计学意义。②试验组中血清叶酸变化水平在 C677 T CC、CT 和 TT 基因型间的变化趋势基本一致 , TT 型增加水平最少 ,CC 型增加最多。以 677 CC 基因型人群的叶酸变化水平为参照 ,合并叶酸组中 TT 基因型在调整前 (β= 3. 99 , P = 0. 034)后 (β= 5. 68 , P < 0. 001)差异均有统计学意义 ;0. 4 mg叶酸组和0. 8 mg叶酸组 TT 基因 型在调整前 (β分别为5. 33和2. 64 , P 分别为0. 061和0. 280) 差异无统计学意义 ,调整后 (β分别为 5. 60和4. 68 , P 分别为0. 031和0. 050)差异有统计学意义。各组中 CT 基因型调整前后的差异均无 统计学意义 ( P > 0. 05) 。结论 　轻中度高血压患者中 MTHFR C677 T 的基因型对叶酸的疗效具有 一定的作用。 【关键词】　高血压 ; 亚甲基四氢叶酸还原酶 ; 叶酸 ; 基因型 【中图分类号】R544. 11 ; R346. 38 　【文献标识码】A 　【文章编号】167423679 (2010) 0320192204 Association test of MTHFR C677T genotype and the changes of serum folic acid level in mild2to2moder2 ate hypertensive patients 　XIAN G Qing2yun1 ,2 , HUO Yong3 , WAN G Meng2de2 , XIN G Hou2xun2 , L IU Ping2 , L I Jian2ping3 , ZAN G Tong2hua2 , XU Xi2ping2 . 　1 . Chaohu V ocational and Technical College , Chaohu 　238000 , China ; 2 . Biomedical Institute of A nhui Medical U niversity , Hef ei 　 230032 , China ; 3. The First Hospital of Beijing U niversity , Beijing 　100034 , China 【Abstract】　Objective 　To test association of changes of serum folic acid level with MTHFR C677 T genotype in the mild2to2moderate hypertensive patients. Methods 　A total of 480 eligible patients with essential hypertension , aged 28～75 , from Harbin , Shenyang , Beijing , Xi’an , Shanghai and Nanjing were recruited , and randomly divided into three groups separately with different drug combination treat2 ments , for consecutive 8 weeks , where 10 mg enalapril treatment group defined as the control group , and combined with different daily dose of 0. 4 mg or 0. 8 mg folic acid as the trials. In this present study , major variables containing pre2and post2treatment serum folic acid , and MTHFR C677 T genotyp2 ic data were collected. Then we chose of them 371 individuals (male 156 vs female 215) with complet2 ing information and further analyzed for the inter2relationships of changes of serum folic acid level with MTHFR C677 T genetype by general statistical methods (i. e. t2test , ANOVA , and multivariate regres2 sion models) . Results 　①There was no association of changes of serum folic acid level with C677 T genetype. ②The changes of the serum folic acid level was the highest in the individuals with CC geno2 type of C677 T and the lowest in those with TT genotype and the middle in those with CT genotype in the trial groups. Compared with the changes of serum folic acid level of individuals with 677 CC geno2 type , that of those with TT genotype was significantly different in the total trial groups ; and is also sig2 nificantly different after adjusted , but no significantly difference before adjusted for sex , age , BMI and so on in the 0. 4 mg and 0. 8 mg trial groups. There was no significant difference of the changes of serum folic acid level between the individuals with heterozygous CT genotype and those with homozygous CC genotype in all groups. Conclusions 　MTHFR C677 T polymorphisms can moderately modify therapeutic effect of the folic acid in the mild2to2moderate hypertensive patients. 【Key words】　Hypertension ; Methylenetetrahydrofolate reductase ; Folic acid ; Genetype ( Chin J Dis Cont rol Prev 2010 ,14 (3) :1922195 ) 【作者单位】1巢湖职业技术学院医学分院公卫学科 , 安徽 巢湖 　238000 2安徽医科大学生物医学研究所 , 安徽 合肥 　230032 3北京大学第一医院心内科 , 北京 　100034 【作者简介】项青云 (1974 - ) ,女 ,安徽巢湖人 ,讲师 ,硕士。主要研究方向 :遗传流行病学。 【通讯作者】徐希平 ,E2mail :xipingxu @hotmail. com ·291· Chin J Dis Cont rol Prev 　2010 　Mar ; 14 (3) 　　亚 甲 基 四 氢 叶 酸 还 原 酶 ( methylenete2 t rahydrofolate reductase , M THFR) 是同型半胱氨酸 (homocysteine ,Hcy) 和叶酸代谢过程中的关键酶 , 与体内叶酸水平、Hcy 水平及它们的变化密切相关。 M THFR 主要是催化 5 ,102亚甲基四氢叶酸到 52亚 甲基四氢叶酸的还原反应 ,从而影响体内活性叶酸 的形成和使用。研究显示 M THFR C677 T 和血清 叶酸、Hcy 水平显著相关 ,而且 M THFR 677 TT 和 血清叶酸间存在很强的交互作用 [1 ] ; M THFR C677 T 的基因型和冠心病[2 ] 、抑郁症[3 ]等疾病密切 相关。 原发性高血压是心血管系统的常见多发病和冠 心病等的独立危险因素 ;血清叶酸和 Hcy 的浓度是 心脑血管病的危险因素[4 ] 。故本次在轻中度高血压 患者中讨论 M THFR C677 T 基因多态性与叶酸水 平变化间关系 ,为更好地预防高血压等疾病的发生、 发展提供依据。 1 　对象与方法 1 . 1 　对象 　2005 年 9 月至 11 月在哈尔滨、沈阳、 北京、西安、南京、上海 6 城市共收集 28～75 岁符合 原发性高血压诊断标准的轻中度原发性高血压患者 480 例 ,排除了妊娠和哺乳期妇女、继发性高血压患 者、重度高血压患者、肝肾功能异常者及正在服用叶 酸、B 族或复合维生素者。本课题 方案 气瓶 现场处置方案 .pdf气瓶 现场处置方案 .doc见习基地管理方案.doc关于群访事件的化解方案建筑工地扬尘治理专项方案下载 经安徽医科 大学伦理委员会讨论通过 ,所有研究对象均自愿参 加 ,并签署了书面知情同意书。 1 . 2 　轻中度原发性高血压诊断标准　根据 1999 年 《中国高血压防治指南》和《1999 WHO/ ISH 高血压 指南》建议的标准 ,患者 3 次坐位血压均值符合以下 标准 : 90 mmHg ≤舒 张 压 < 110 mmHg , 和/ 或 140 mmHg ≤收缩压 < 180 mmHg。 1 . 3 　测量指标 　测量身高、体重、血压等人体学特 征 ;实验室采用全自动生化检测仪检查总胆固醇、甘 油三酯、高密度脂蛋白等生化指标。 1 . 4 　叶酸测定 　取空腹非抗凝静脉血3 ml ,静置 30 min后离心 (3 000 r/ min ,10 min) ,分离后血清由 北京大学第一医院利用 Beckman Coulter ACCESS Immunoassay System ,选择化学发光免疫分析法测 定 血 清 叶 酸 水 平。叶 酸 浓 度 测 定 范 围 为 0～45. 31 nmol/ L 。在统计分析中 ,将 2 例叶酸水平 超 出 45. 31 nmol/ L 的 测 定 数 值 均 设 为 45. 32 nmol/ L 。 1. 5 　MTHFR C677T位点基因型测定 　抽取空腹 静脉血 ,采用 Q IAamP Blood Kit (标准的盐析法) 从 白细胞提取基因组 DNA。用提取的 DNA 通过聚合 酶链反应 - 限制性片断长度多态性 ( polymerase chain reaction 2 rest riction fragment length polymor 2 phism , PCR2RFL P)的方法获得 M THFR C677 T 位 点的基因型。具体实验步骤如下 : ①PCR 反应 :用 PCR 方法扩增 M THFR C677 T 多态性位点及其侧 翼序列 ,M THFR C677 T 基因多态性的正反引物分 别为 5’2CAAA GGCCACCCCGAA GC23’和 5’2A G2 GACGGTGCGGTGA GA GTG23’。PCR 反应体系为 6μl ,其中含有 60ng 基因组 DNA、10 ×PCR buffer (含 Mg2 + ) 0. 6μl、1. 25 mM 的 dN TP 0. 96μl、 20 nm的正反引物各0. 09μl及 5U 的 Taq DNA 聚合 酶0. 03μl和 PCR 用水4. 23μl。PCR 反应条件为 94 ℃解链10 min ×1 个循环 ; 94 ℃变性45 s、62 ℃ 退火40 s、72 ℃延伸 45 s , ×39个循环 ; 72 ℃延伸 7 min ×1 个循环。②限制性酶切反应及基因型判 断 :在 PCR 产物中加入 4 U Hinf I 限制性内切酶 , 置于37 ℃酶切 10 h 以上。酶切产物经 2 %的琼脂 糖凝胶电泳 ,溴化乙啶染色 ,并在紫外线下观察 ,如 出现 1 个 245 bp 片断的为 CC 基因型 , 如出现 245 bp、175 bp和70 bp 3 个片断的是 CT 基因型 ,如 出现175 bp和70 bp 2 个片断的是 TT 基因型 (酶切 图谱见图 1) 。 图 1 　MTHFR C677T多态性位点基因型检测的 琼脂糖电泳图谱 Figure 1 　The gelose electrophoresis pattern of MTHFR C677T genotype 　　每块 96 孔 PCR 反应板中加入 4 孔已知基因型 样本作为阳性对照 ,用作板内质控。另外随机抽取 整个样本的 10 %重复检测 ,作为整体质控。只有板 内质控样本完全正确 ,且整体质控样本和第一次检 测结果的一致率达 99 %以上 ,整板基因型数据才有 效。 1 . 6 　统计处理 　采用 Epi Data 3. 1 双重录入并检 错 ,SAS 8. 2 统计分析处理。剔除基因型等主要指 ·391·中华疾病控制杂志 2010 年 3 月第 14 卷第 3 期 标缺乏者 ,多组定量资料比较采用 F 检验、多元回 归分析等方法 ,分类资料采用χ2 检验 ;双侧检验检 验水准α= 0. 05。 2 　结果 2 . 1 　一般人口学特征 　480 例研究对象中 ,有 371 例 (男 156 人 ,女 215 人)有 DNA 样本并被成功的进 行了基因型检测 ,该 371 例研究对象与剩余 109 位 研究对象的一般人口学特征差异无统计学意义 ( P > 0. 05) ,故将 371 例有完整基因型数据库的研 究对象确定为本次分析的最终人群。又因为叶酸下 降水平、组别、M THFR C677 T 基因型等指标性别间 差异无统计学意义 ( P > 0. 05) ,加上样本量的限制、 分组过多 ,会导致检验效率降低、偏倚增加 ,故在分 析中将男女合并处理。一般特征分析显示 ,不同实 验组间除了 8 周叶酸水平和叶酸变化水平的差异有 统计学意义外 ,其他各指标的差异均无统计学意义 ( P > 0. 05) ( 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 1) 。 表 1 　不同组别一般特征的比较 Table 1 　Comparison of the clinical and demographic characteristics of the trial and control groups 变量 对照组( n = 123) 0. 4 mg叶酸组 ( n = 121) 0. 8 mg叶酸组 ( n = 127) F/χ 2 P 年龄 56. 98 ±9. 73 　 57. 09 ±10. 04 　 56. 44 ±9. 27 　 0. 16 0. 850 体质指数 (kg/ m2) 25. 72 ±3. 30 25. 68 ±3. 72 25. 75 ±3. 42 0. 01 0. 974 叶酸 (nmol/ L) 　基线叶酸 14. 02 ±5. 50 13. 92 ±6. 32 13. 78 ±6. 49 0. 05 0. 955 　8周叶酸 15. 55 ±7. 01 25. 62 ±10. 58 ★ 28. 49 ±10. 11 ★★65. 26 < 0. 001 　叶酸△ - 1. 53 ±5. 26 - 11. 70 ±11. 13 ★ - 14. 70 ±9. 80 ★★ 71. 74 < 0. 001 血脂 (mmol/ L) 　甘油三酯 1. 74 ±1. 43 1. 66 ±1. 14 1. 76 ±1. 24 0. 20 0. 816 　总胆固醇 4. 92 ±0. 91 5. 00 ±1. 33 5. 06 ±1. 11 0. 49 0. 615 　高密度脂蛋白 1. 30 ±0. 35 1. 32 ±0. 34 1. 31 ±0. 37 0. 10 0. 908 　低密度脂蛋白 2. 88 ±0. 73 2. 88 ±0. 77 2. 97 ±0. 88 0. 54 0. 580 血糖 (mmol/ L) 5. 51 ±1. 35 5. 54 ±1. 25 5. 40 ±1. 24 0. 39 0. 678 收缩压 (mmHg) 154. 15 ±11. 18 153. 65 ±11. 00 154. 67 ±11. 25 0. 26 0. 773 舒张压 (mmHg) 93. 20 ±7. 80 92. 54 ±8. 72 93. 39 ±8. 19 0. 37 0. 694 性别 　男[ n ( %) ] 46 (29. 49) 51 (32. 69) 59 (37. 82) 2. 10 0. 349 　女[ n ( %) ] 77 (35. 81) 70 (32. 56) 68 (31. 63) MTHFR C677 T基因型 　CC[ n ( %) ] 33 (34. 02) 30 (30. 93) 34 (35. 05) 0. 42 0. 981 　CT[ n ( %) ] 57 (31. 84) 60 (33. 52) 62 (34. 64) 　TT[ n ( %) ] 33 (34. 74) 31 (32. 63) 31 (32. 63) 注 :表中数据计量资料以 …x ±s表示 ,采用成组资料的 F检验 ;分类资料以 n ( %)表示 ,采用χ2 检验 ; △表示基线与 8周的下降水平 ; ★表示和对照组间差异有统计学意义 ; ★★表示和对照组及0. 4 mg叶 酸组间的差异均有统计学意义 2. 2 　MTHFR C677T基因型对不同组别叶酸水平 变化的影响 　M THFR C677 T 3 种基因型 CC、CT、 TT 的频数和百分比分别为 97 ( 26. 1 %) 、179 (48. 3 %) 、95 (25. 6 %) ,等位基因 C 和 T 的频数和 百分比分别为 373 (50. 3 %)和 369 (49. 7 %) ,在人群 中的分布符合 Hardy2Weinberg 平衡 (χ2 = 0. 455 , P = 0. 500) 。 分别对不同组别中 M THFR C677 T 3 种基因型 间叶酸变化水平进行方差分析发现 ,各组中 CC、 CT、TT 3 种基因型间叶酸变化水平的差异均无统 计学意义 ( P > 0. 05) 。除对照组 ,其他各组血清叶 酸变化水平在 M THFR C677 T CC、CT 和 TT 基因 型间的变化趋势基本一致 , TT 基因型增加最少 ,CC 基因型增加最多。以 M THFR 677 CC 基因型人群 的叶酸变化水平为参照的多元线性回归分析发现 , 合并叶酸组中 TT 基因型在调整前 (β= 3. 99 , P = 0. 034)后 (β= 5. 68 , P < 0. 001)的差异均有统计 学意义 ;0. 4 mg叶酸组和0. 8 mg叶酸组 TT 基因型 在调整前 (β分别为5. 33和2. 64 , P 分别为0. 061和 0. 280)差异无统计学意义 ,调整后 (β分别为5. 60和 4. 68 , P 分别为0. 031和0. 050) 差异有统计学意义 ; 对照组中调整前 (β= 0. 28 , P = 0. 831) 后 (β= 0. 51 , P = 0. 698)的差异均无统计学意义。各组中 CT 基 因型调整前后的差异均无统计学意义 ( P > 0. 05) (表 2) 。 表 2 　不同组别 MTHFR C677T不同基因型与叶酸 下降水平的多元线性回归 Table 2 　The association of the changes of the serum folic acid level with MTHFR C677T genetype by the method of multiple linear regression in the trial or control groups , respectively MTHFR C677 T n …x ±s 调整前β SE t P 调整后β SE t P 对照组 　CC 33 - 1. 53 ±3. 50 Ref - - - Ref - - 　 - 　CT 57 - 1. 69 ±5. 36 - 0. 16 1. 16 - 0. 14 0. 888 - 0. 62 1. 21 - 0. 51 　0. 613 　TT 33 - 1. 25 ±6. 53 　0. 28 1. 30 　0. 21 0. 831 　0. 51 1. 34 　0. 38 0. 698 0. 4 mg叶酸组 　CC 30 - 15. 35 ±9. 93 Ref - - - Ref - - 　- 　CT 60 - 10. 75 ±11. 88 　4. 60 2. 46 　1. 87 0. 064 　3. 80 2. 26 　1. 68 0. 097 　TT 31 - 10. 01 ±10. 23 　5. 33 2. 82 　1. 89 0. 061 　5. 60 2. 55 　2. 19 0. 031 0. 8 mg叶酸组 　CC 34 - 15. 40 ±9. 13 Ref - - - Ref - - 　 - 　CT 62 - 15. 30 ±10. 06 　0. 10 2. 09 　0. 05 0. 961 　0. 59 1. 96 　0. 30 0. 758 　TT 31 - 12. 75 ±10. 02 　2. 64 2. 44 　1. 09 0. 280 　4. 68 2. 36 　1. 98 0. 050 合并叶酸组 　CC 64 - 15. 37 ±9. 43 Ref - - - Ref - - 　 - 　CT 122 　 - 13. 06 ±11. 19 　2. 32 1. 62 　1. 43 0. 154 　2. 48 1. 48 　1. 68 0. 088 　TT 62 - 11. 38 ±10. 14 　3. 99 1. 87 　2. 13 0. 034 　5. 68 1. 74 　3. 26 < 0. 001 注 :调整因素 :性别 ,年龄 ,收缩压 ,舒张压 ,体质指数 ,地区 ,基线叶酸 ,甘油三酯 ,总胆固醇 ,高密度脂蛋 白 ,低密度脂蛋白 ,血糖 3 　讨论 除了对照组 ,其他各组高血压患者血清叶酸变 化水平在 M THFR C677 T 的 CC、CT 和 TT 基因型 间基本趋势一致 ,以 TT 基因型增加最少 ,CC 基因 型最多 ,CT 基因型居中 ;并在合并叶酸组中 M TH2 FR TT 基因型叶酸变化水平和 CC 基因型间的差异 有统计学意义。与 Vesela 等[1 ]人的研究结果一致 , ·491· Chin J Dis Cont rol Prev 　2010 　Mar ; 14 (3) 与 Aléssio 等[5 ]人的研究结果不完全相同。 3. 1 　52亚甲基四氢叶酸可能与同型半胱氨酸相关 　M THFR C677 T 将 5 ,102亚甲基四氢叶酸还原为 52亚甲基四氢叶酸或通过β甲基转移酶合成 52亚甲 基四氢叶酸[6 ] 。服用叶酸能显著降低 Hcy 水平[7 ] ; 而 Hcy 代谢的控制与甲基四氢叶酸还原酶变构抑 制相关 ,故 M THFR C677 T 基因的突变与血清叶酸 的变化密切相关。 3 . 2 　与叶酸状态有关 　毛莉等[8 ]人认为高叶酸弥 补了 C677 T 突变造成 M THFR 活力下降 , 导致 M THFR基因 C677 T 突变与某些疾病的发生不相 关 ;Eskes 等[9 ]认为 M THFR 及蛋氨酸合成还原酶 (M TRR)的纯合突变能导致胎儿出现 21 号三倍体 , 但在孕期补充叶酸能降低唐氏综合症的频率 ,并预 防神经管畸形 ;叶酸处于充足状态时 ,缺血性冠心病 与 M THFR ,蛋氨酸合酶 (M TR) ,M TRR 等基因多 态性也无相关性 [10 ] 。可见叶酸状态也能影响 M THFR C677 T 的基因型对叶酸疗效的作用。 3 . 3 　其他因素的影响 　研究还发现了基因多态性 存在地理差异 ,可能存在基因与营养或基因与基因 或基因、营养与环境间的交互作用 ; Guéant2Ro2 driguez 等[11 ]人认为 M THFR C677 T 和唐氏综合症 危险性间的研究结果不一致 ,可能和不同地区的营 养环境和人群的遗传特征不同有关。而基因与膳食 间交互作用的研究显示 ,携带 M THFR 677 TT 基因 型人群 ,叶酸水平越高 (或高甲基膳食) ,患结、直肠 癌的危险性越低 ;携带 M THFR 677 TT 基因型人 群 ,酒精摄入量越高 , 患结、直肠癌的危险性越 高[12 ] 。 本次研究显示在高血压患者中 M THFR C677 T 的基因型对叶酸的疗效具有一定的作用。但因为血 清叶酸水平受多种环境和遗传因素的影响 ,任何单 一因素的影响可能都是“微效”的 ,加上样本量有限 , 因此要正确揭示高血压患者 M THFR C677 T 基因 多态性对叶酸疗效的影响 ,需要在控制环境等混杂 因素的影响下 ,进一步在大规模的人群中进行多因 素的综合分析。 致谢 :哈尔滨医科大学第一临床医学院 (李为 民 ,关德明) ,上海复旦大学附属中山医院 (葛均波 , 西雁) ,中国医科大学附属第一医院 (胡健) ,西安交 通大学第一医院 (王燕妮 ,王东奇 ,雷新军) ,南京医 科大学第一附属医院 (张馥敏) 【参考文献】 [1 ] 　Vesela K , Pavlikova M , Janosikova B , et al . Genetic determi2 nants of folate status in Central Bohemia [J ] . Physiol Res , 2005 , 54 (3) :2952303. [ 2 ] 　顾园园 ,沈晓丽 ,浦晓东 ,等. 冠心病患者亚甲基四氢叶酸还原 酶基因的多态性 [J ] . 福建医科大学学报 , 2005 ,39 (4) :4022 405. [3 ] 　Kelly CB , McDonnell AP , Johnston TG , et al . The MTHFR C677 T polymorphism is associated with depressive episodes in pa2 tients from Northern Ireland [J ] . J Psychopharmacol , 2004 ,18 (4) :5672571. [ 4 ] 　李丹 ,吴坤. 叶酸和同型半胱氨酸对血管病的影响及其机制 [J ] . 疾病控制杂志 , 2006 ,10 (3) :2992302. [ 5 ] 　Aléssio AC , Annichino2Bizzacchi J M , Bydlowski SP , et al . Poly2 morphisms in the methylenetetrahydrofolate reductase and me2 thionine synthase reductase genes and homocysteine levels in Brazilian children [J ] . A m J Med Genet A , 2004 ,128A(3) :2562 260. [6 ] 　Fowler B. Homocysteine : overview of biochemistry , molecular biology , and role in disease processes [ J ] . Semin V asc Med , 2005 ,5 (2) :77286. [7 ] 　Fillon2Emery N , Chango A , Mircher C , et al . Homocysteine concentrations in adults with trisomy 21 : effect of B vitamins and genetic polymorphisms [ J ] . A m J Clin N ut r , 2004 , 80 ( 6 ) : 155121557. [ 8 ] 　毛莉 ,高玉芬 ,秦文浩 ,等. 5 ,102亚甲基四氢叶酸还原酶基因 C677 T突变的相关性研究与 2 型糖尿病合并脑梗死 [J ] . 南 通医学院学报 , 2004 ,24 (2) :1462147. [ 9 ] 　Eskes TK. Abnormal folate metabolism in mothers with Down syndrome offspring : review of the literature [J ] . Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol , 2006 ,124 (2) :1302133. [ 10 ] 　Bosco P , Guéant2Rodriguez RM , Anello G , et al . Association of homocysteine (but not of MTHFR 677 C > T , MTR 2756 A > G , MTRR 66 A > G and TCN2 776 C > G) with ischaemic cere2 brovascular disease in Sicily [ J ] . Thromb Haemost , 2006 , 96 (2) :1542159. [11 ] 　Guéant2Rodriguez RM , J uilliére Y , Candito M , et al . Associa2 tion of MTRRA66 G polymorphism (but not of MTHFR C677 T and A1298C , MTRA2756 G , TCN C776 G) with homocysteine and coronary artery disease in the French population [ J ] . Thromb Haemost , 2005 ,94 (3) :5102515. [12 ] 　Sharp L , Little J . Polymorphisms in genes involved in folate metabolism and colorectal neoplasia : a HuGE review [J ] . A m J Epidemiol , 2004 ,159 (5) :4232443. (收稿日期 :2009206222) (修回日期 :2009208215) (丁蕾校) ·591·中华疾病控制杂志 2010 年 3 月第 14 卷第 3 期