农残检测方法

ThismanuscriptwasrevisedbytheofficeonDecember10,2020.农残检测方法农残检测方法1.农残试剂配置缓冲溶液：取一包缓冲剂，加入500ml蒸馏水，溶解搅拌均匀，密闭、避光、阴凉处保存。显色剂：取显色剂一瓶，加入15ml缓冲溶液溶解，4℃冰箱中保存。底物：取底物一瓶，加入15ml蒸馏水溶解，4℃冰箱中保存。乙酰胆碱酯酶：取乙酰胆碱酯酶一瓶，用3ml缓冲溶液溶解，4℃冰箱中保存。注：因农残试剂生产厂家众多，使用时请以试剂说明书为准！2.样品处理选取有代表性的蔬菜样品，擦掉样品表面泥土，剪成1cm见方碎片，取样品1g，放入烧杯或提取瓶中，加入5ml缓冲溶液，振荡1min～2min，倒出提取液，静置3min～5min，待用。注意：样品不可用水冲洗，应擦去表面泥土等杂物后取样。为了保证取样具有代表性，叶菜一般取来自不同植株叶片的叶尖部样本，果菜从不同个体的表皮处取样。3.对照溶液测试在提取瓶中加入2.5ml缓冲溶液，再加入100ul酶液、100ul显色剂，摇匀后于37℃放置15分钟(每批样品的控制时间必须一致)。15分钟后再加入100μL底物摇匀,此时检液开始显色反应,应立即倒入1cm比色皿，放入仪器比色池中，将仪器调到测量界面,按操作指示面板按键区的“对照”按钮，仪器开始做对照。3分钟后仪器自动对照完成，对照完成后将对照样取出，保持仪器界面不变。注意：对照测试必须在第一通道进行，对照测试△A应＞0.3，若对照测试的结果小于以上数值时，仪器会自动提示“对照错误”，须重新做对照，以保证测量结果的准确性。(对照测试△A<0.3的原因：一是酶的活性不够，二是反应温度太低。)4.样品溶液测试另取干净的提取瓶，放入2.5ml样品提取液，加入100ul酶液、100ul显色剂，摇匀后于37℃放置15分钟(放置的时间与对照液放置的时间必须一致)。15分钟后再加入100μL底物摇匀,此时检液开始显色反应,应立即倒入1cm比色皿，放入仪器比色池中，按操作指示面板按键区的“测量”按钮开始测量，3分钟后仪器测量完成，显示测量结果。结果以酶被抑制的程度（抑制率）表示，当蔬菜样品提取液对酶的抑制率≥50%时，表示蔬菜中有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药存在，样品为阳性结果，阳性结果的样品需要重复检验2次以上。对阳性结果的样品，可用其它方法进一步确定具体农药品种和含量。5.说明葱、蒜、萝卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中，含有对酶有影响的植物次生物质，容易产生假阳性。处理这类样品时，可采取整株（体）蔬菜浸提。对一些含叶绿素较高的蔬菜，也可采取整株（体）蔬菜浸提的方法，减少色素的干扰。甲醛检测方法1.试剂配置甲醛试剂（一）甲醛试剂（二）：将甲醛试剂（二）=1\*GB3①加少量热水溶解，再加入甲醛试剂（二）=2\*GB3②，冷却后定容于50ml容量瓶注意：所有试剂均需避光、低温（冰箱4℃）保存！甲醛试剂（一）有腐蚀性；配制好的甲醛试剂（二）可使用一个月。2.样品处理准确称取0.2g样品放入哈希管中，加入5滴甲醛试剂（一）和10ml蒸馏水，混匀后盖紧瓶盖，放入沸水中加热5min，取出冷却至室温，用0.45μm微孔滤膜过滤，以除去悬浮颗粒，此为待测溶液。3.空白取蒸馏水10ml于10ml比色管中，加入甲醛试剂（二）1ml，混合均匀，放入恒温水浴锅中50℃加热15分钟，取出冷却至室温，移入1cm比色皿中，放入仪器相应比色池中，按操作指示面板区的“对照”键进行对照，对照完成后，仪器会自动记录对照结果，并在显示屏下方显示为“对照测量完成”。4.测量移取处理好的样品溶液5ml于10ml比色管中，加入蒸馏水定容至10ml，然后再加入甲醛试剂（二）1ml，混合均匀，放入恒温水浴锅中50℃加热15分钟，取出冷却至室温，移入1cm比色皿中，放入已经做过对照的仪器通道中按操作提示面板区的“测量”键进行测量，测量完成后，仪器自动显示样品中甲醛浓度值X（mg/kg）。吊白块检测方法1.试剂配置吊白块试剂（一）吊白块试剂（二）：将吊白块试剂（二）=1\*GB3①加少量热水溶解，再加入吊白块试剂（二）=2\*GB3②，冷却后定容于50ml容量瓶注意：所有试剂均需避光、低温（冰箱4℃）保存！吊白块试剂（一）有腐蚀性；配制好的吊白块试剂（二）可使用一个月。2.样品处理准确称取0.2g样品放入哈希管中，加入5滴吊白块试剂（一）和10ml蒸馏水，混匀后盖紧瓶盖，放入沸水中加热5min，取出冷却至室温，用0.45μm微孔滤膜过滤，以除去悬浮颗粒,此为待测溶液。3.空白取10ml蒸馏水于10ml比色管中，加入吊白块试剂（二）1ml，混合均匀，放入恒温水浴锅中50℃加热15分钟，取出冷却至室温，移入1cm比色皿中，放入仪器相应比色池中，按操作指示面板区的“对照”键进行对照，对照完成后，仪器会自动记录对照结果，并在显示屏下方显示为“对照测量完成”。4.测量移取处理好的样品溶液5ml于10ml比色管中，加入蒸馏水定容至10ml，然后再加入吊白块试剂（二）1ml，混匀后放入恒温水浴锅中50℃加热15分钟，取出冷却至室温，移入1cm比色皿中，放入已经做过对照的仪器通道中按操作提示面板区的“测量”键进行测量，测量完成后，仪器自动显示样品中吊白块浓度值X（mg/kg）。双氧水检测方法1.试剂配置双氧水试剂（一）双氧水试剂（二）注意：所有试剂均需避光、低温（冰箱4℃）保存！双氧水试剂（一）有腐蚀性，双氧水试剂（二）有毒。2.样品处理准确称取1.0g样品放入哈希管中，加2ml双氧水试剂（一）和6ml蒸馏水，混匀后盖紧瓶盖，放入恒温水浴锅50℃下加热10min，取出冷却至室温，用0.45μm微孔滤膜过滤，滤液移入10ml比色管中，加0.2ml双氧水试剂（二），再加蒸馏水至10ml刻度，此为待测溶液。3.空白向比色管中加入2ml双氧水试剂（一）和0.2ml双氧水试剂（二），再加蒸馏水至10ml刻度，混匀，转入1cm比色皿，放入仪器相应比色池中，按操作指示面板区的“对照”键进行对照，对照完成后，仪器会自动记录对照结果，并在显示屏下方显示为“对照测量完成”。4.测量向待测液中加入2ml双氧水试剂（一）和0.2ml双氧水试剂（二），再加蒸馏水至10ml刻度，摇匀，转入1cm比色皿中，放入仪器比色池中进行测量，测量完成后，仪器会自动显示样品浓度结果X（mg/kg）。亚硝酸盐检测方法1.试剂配置亚硝酸盐试剂（一）：加少量热蒸馏水溶解，冷却后定容于50mL容量瓶。亚硝酸盐试剂（二）：加蒸馏水溶解，定容于50mL容量瓶。亚硝酸盐试剂（三）：将两种亚硝酸盐试剂（三）溶于少量热水中，冷却后定容于50ml容量瓶。亚硝酸盐试剂（四）：将亚硝酸盐试剂（四）①加亚硝酸试剂（四）②定容于100mL棕色容量瓶，避光保存。亚硝酸盐试剂（五）：加蒸馏水溶解，定容于100mL棕色容量瓶，避光保存。注意：除试剂（一）需常温保存外所有试剂均需避光、低温（冰箱4℃）保存！亚硝酸盐试剂（一）容易析出，请用50℃左右水浴加热1分钟后使用。配制好的亚硝酸盐试剂（五）有腐蚀性，可放置一个月左右，溶液变绿后不能使用。2.样品处理准确称取0.1g经搅碎混匀的试样，置于哈希管中，加入1mL亚硝酸盐试剂（一）和5mL的蒸馏水，密闭后于沸水浴中加热15min，取出后冷却至室温，然后一面转动一面加入1mL亚硝酸盐试剂（二），摇匀，再加入1mL亚硝酸盐试剂（三），以沉淀蛋白质。加水至10ml刻度，摇匀，放置0.5小时，除去上层脂肪，余液用0.45μm微孔滤膜过滤，滤液备用。3.对照测试取5ml蒸馏水于10ml比色管中，加入0.1mL亚硝酸盐试剂（四），混匀，放置5min后加入0.2ml试剂（五），混匀，静置15分钟，转入1cm比色皿，放入仪器相应比色池中，按操作指示面板区的“对照”键进行对照，对照完成后，仪器会自动记录对照结果，并在显示屏下方显示为“对照测量完成”。4.样品测定取5ml待测溶液于10ml比色管中，加入0.1亚硝酸盐试剂（四）混匀，放置5min后加入0.2ml试剂（五），混匀，静置15分钟，转入1cm比色皿，放入已经做过对照的仪器通道中按操作提示面板区的“测量”键进行测量，测量完成后，仪器自动显示样品中亚硝酸盐浓度值X（mg/kg）。六价铬检测方法1.试剂配置六价铬试剂（一）：加蒸馏水稀释，定容于100mL容量瓶六价铬试剂（二）：加蒸馏水稀释，定容于100mL容量瓶六价铬试剂（三）：加蒸馏水稀释，定容于100mL容量瓶六价铬试剂（四）：加蒸馏水稀释，定容于100mL容量瓶六价铬试剂（五）：将六价铬试剂（五）①溶解于六价铬试剂（五）②中，加水稀释至100ml，储存于棕色瓶中置冰箱内保存。注意：所有试剂均需避光、低温（冰箱4℃）保存！六价铬试剂（一）、六价铬试剂（二）、六价铬试剂（三）、六价铬试剂（四）有腐蚀性；当配制好的六价铬试剂（五）溶液色变深后不能使用。2.样品处理操作步骤将待测的粮食、蔬菜、水果类样品洗净晾干，碾碎，混匀备用。禽蛋、水产等洗净、晾干，取可食部分，混匀备用。取经过预处理的均匀样品1.000g于哈希管中（敞开），加入2.0mL试剂（一）纯硝酸，4.0mL试剂（二）过氧化氢溶液，轻轻摇匀，放入亚临界水萃取仪中，从温度升到140℃时开始计时，保持恒温lh，同时做试剂空白，取出哈希管待自然冷却后，将消解液移入l0mL比色管中，将哈希管用水洗净，合并洗液于比色管中，用水稀释至10ml刻度，混匀、待测。3.对照测试取10ml蒸馏水于10ml比色管中，向比色管内加入0.1ml六价铬试剂（三）和六价铬试剂（四），混匀，再加入0.4ml试剂（五）摇匀，放置10min后，转入1cm比色皿，放入仪器相应比色池中，按操作指示面板区的“对照”键进行对照，对照完成后，仪器会自动记录对照结果，并在显示屏下方显示为“对照测量完成”。4.样品测定取待测溶液，加蒸馏水稀释至刻度，再向比色管内加入0.1ml六价铬试剂（三）和六价铬试剂（四），混匀，再加入0.4ml试剂（五）摇匀，放置10min后，转入1cm比色皿，放入已经做过对照的仪器通道中按操作提示面板区的“测量”键进行测量，测量完成后，仪器自动显示样品中六价铬浓度值X（mg/kg）。重金属检测方法1.试剂配置重金属试剂（一）重金属试剂（二）重金属试剂（三）：加少量蒸馏水溶解，定容于100ml容量瓶重金属试剂（四）：加少量蒸馏水溶解，定容于100ml容量瓶注意：所有试剂均需避光、低温（冰箱4℃）保存！重金属试剂（一）、重金属试剂（二）有腐蚀性。2.样品处理操作步骤将待测的粮食、蔬菜、水果类样品洗净晾干，碾碎，混匀备用。禽蛋、水产等洗净、晾干，取可食部分，混匀备用。取经过预处理的均匀样品1.0g于哈希管中，加入2mL重金属试剂（一），2mL重金属试剂（二），4ml蒸馏水，轻轻摇匀，盖紧上盖，放入超声波提取仪中提取10分钟，取出哈希管待自然冷却后，打开上盖，过滤将溶液移入10ml比色管中，加重金属试剂（四）调节溶液PH=9，加水至刻度，此为待测溶液。3.对照测试取10ml蒸馏水于比色管内，加入1ml重金属试剂（三），混匀，放置10min后，转入1cm比色皿，放入仪器相应比色池中，按操作指示面板区的“对照”键进行对照，对照完成后，仪器会自动记录对照结果，并在显示屏下方显示为“对照测量完成”。4.样品测定取待测溶液，加蒸馏水稀释至刻度，再向比色管内中加入1ml重金属试剂（三），混匀，放置10min后，转入1cm比色皿，放入已经做过对照的仪器通道中按操作提示面板区的“测量”键进行测量，测量完成后，仪器自动显示样品中重金属浓度值X（mg/kg）。二氧化硫检测方法1.试剂配置二氧化硫试剂（一）：加蒸馏水溶解，定容于500ml容量瓶二氧化硫试剂（二）：加蒸馏水溶解，定容于50ml容量瓶二氧化硫试剂（三）二氧化硫试剂（四）：加蒸馏水溶解，定容于50ml容量瓶二氧化硫试剂（五）：将两种二氧化硫试剂（五）混合，用热水溶解，冷却后定容于50ml容量瓶二氧化硫试剂（六）：将二氧化硫试剂（六）=1\*GB3①溶解定容于50ml容量瓶中，取出20ml于100ml容量瓶中，滴加二氧化硫试剂（六）=2\*GB3②混匀使溶液由红变黄，加水至刻度二氧化硫试剂（七）：加蒸馏水溶解，定容于50ml容量瓶二氧化硫试剂（八）注意：所有试剂均需避光、低温（冰箱4℃）保存！二氧化硫试剂（一）有毒，二氧化硫试剂（七）、二氧化硫试剂（八）有腐蚀性。2.样品处理2.1水溶性固体样如白砂糖称取1.0g，用少量水溶解，置于10ml比色管中，加入0.4ml二氧化硫试剂（七），5分钟后加入0.4ml二氧化硫试剂（八），然后加入2ml二氧化硫试剂（一），加水至刻度，混匀，此为待测溶液。2.2其他固体样如饼干、粉丝称取1.0g研磨均匀的试样，以少量水润湿并移入10ml比色管中，加入2ml二氧化硫试剂（一），浸泡4小时以上，若上层溶液不澄清可加入二氧化硫试剂（四）及二氧化硫试剂（五）各0.25ml，混匀，过滤，加水至刻度，此为待测溶液。2.3液体试样如葡萄酒可直接吸取1mL，置于10ml比色管中，用少量水稀释，加入2ml二氧化硫试剂（一），摇匀，最后加水至刻度，混匀，此为待测溶液。3.空白取一支干净的10mL比色管，准确加入二氧化硫试剂（一）10ml，1ml二氧化硫试剂（二），1ml二氧化硫试剂（三）及1ml二氧化硫试剂（六），混匀，放置20分钟后，转入1cm比色皿，放入仪器相应比色池中，按操作指示面板区的“对照”键进行对照，对照完成后，仪器会自动记录对照结果，并在显示屏下方显示为“对照测量完成”。4.测量取待测溶液5ml于10mL比色管中，加入二氧化硫试剂（一）至10ml刻度，再加入1ml二氧化硫试剂（二），1ml二氧化硫试剂（三）及1ml二氧化硫试剂（六），混匀，放置20分钟后，转入1cm比色皿，放入已经做过对照的仪器通道中按操作提示面板区的“测量”键进行测量，测量完成后，仪器自动显示样品中二氧化硫浓度值X（mg/kg）。备注：本仪器在室温20°左右测量最准确。附录1常见故障及原因如果操作不当，相应的会出现下列出错提示信息。都可按取消返回。下表中若未说明生产问 题 快递公司问题件快递公司问题件货款处理关于圆的周长面积重点题型关于解方程组的题及答案关于南海问题 的原因，则与错误提示信息相同。错误提示信息产生问题原因对照测试错误酶的活性不高；温度太低查询单号输入错误查询单号输入的数据大于总数据量附录2各物质限量标准检测指标品名限量标准mg/kg农药残留蔬菜、水果≤50%甲醛水发产品≤10水产品不得检出零食不得添加大麦粉≤24小麦粉≤14绿豆粉≤2棉白糖≤7白砂糖≤4红糖≤3腐竹≤6粉丝≤1鳕鱼肉≤48吊白块面粉、米粉、豆制品不得检出双氧水水发品、肉制品、干果、椰果不得检出亚硝酸盐食盐、牛乳粉≤2鲜肉、鲜鱼、粮食≤3蔬菜≤4鲜蛋类≤5香肠、腊肠、香肚、腌菜、火腿≤20肉制品、火腿肠、灌肠≤30肉罐头≤50西式火腿、罐头≤70六价铬粮食、蔬菜、水果、皮蛋、盐蛋不得检出重金属粮食、蔬菜、水果、皮蛋、盐蛋不得检出二氧化硫银耳、莲子、龙眼、荔枝、虾仁、米粉、豆芽、生姜不得检出白糖≤50竹笋、蘑菇及罐头≤50薯类淀粉≤30葡萄、黑加仑浓缩汁≤50果汁浓浆≤15食糖、饼干、粉丝≤100发酵酒、葡萄酒、果酒≤50婴幼儿铁强化糖果≤50蜜饯、果脯≤500