血糖的测定实验四血糖及血糖水平的概念：血糖：指血液中的单糖：葡萄糖血糖水平：血浆中葡萄糖浓度血糖总维持在恒定水平：3.9~6.7mmol/L 调节血糖水平的激素：胰岛素、胰高血糖素、糖皮质激素和肾上腺素。 血糖水平异常：⑴高血糖及糖尿病；⑵低血糖临床：血糖检测是目前诊断糖代谢异常相关疾病的主要依据。科研：在代谢疾病的研究中，常测定血糖。在某些药物的研究中，也涉及血糖的测定。测定血糖的意义测定方法无机化学法：Folin-Wu法有机化学法：邻甲苯胺法酶法：葡萄糖氧化酶法血糖测定的常用方法葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法原理（1）葡萄糖＋O2＋H2O（2）H2O2＋4-氨基安替吡啉＋苯酚葡萄糖酸＋H2O2葡萄糖氧化酶（GOD）H2O＋红色醌式物质过氧化物酶（POD）Trinder反应505nm光吸收法测定相对血糖浓度*方法评价：此方法特异性高、准确、简便，还可用于自动
分析
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仪分光光度计的工作原理朗伯-比尔定律朗伯定律：A=k1L比尔定律：A=k2C朗伯-比尔定律：如同时考虑液层厚度和溶液浓度对吸光度的影响，则吸光度与溶质的浓度和溶液的厚度的乘积成正比。A=KLC朗伯-比尔定律应用A标=KC标LA样=KC样L标准品法测定未知样品含量1.接通电源，调整波长。2.比色杯中加入空白及待测样品，并放入分光光度计中，注意：加入样品量不超过比色杯体积的2/3。3.调模式为“透射比”，对空白对照进行调“0”（开盖）和调“100”（闭盖）。4.调模式为“吸光度”，将空白对照调“0”，测定待测样品的吸光度值。分光光度计的使用葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法检测激素对血糖浓度的影响方法（1）取4支试管，按下表加入试剂:实验步骤：充分混匀，37℃水浴中保温20min；冷却至室温后，505nm处比色比色方法：以空白管调零，读取标准管及测定管光密度值。 试剂 标准管(ml) 测定管1(ml) 测定管2(ml) 空白管(ml) 血清样品 – 0.02 0.02 – 葡萄糖标准液 0.02 – – – 蒸馏水 – – – 0.02 酶酚混合试剂 3.00 3.00 3.00 3.00（2）计算：依据朗伯-比尔定律：A=KLC标准管葡萄糖浓度：5mmol/L正确使用比色器皿：手拿比色皿的毛面；比色液应占比色皿的2/3。血糖测定应在取血后2小时内完成，放置太久，血糖易分解，故使含量降低。酶酚混合液一般现用现配。注意事项小结1、葡萄糖氧化酶-过氧化物酶比色法测定血糖的原理。2、分光光度计的正确使用。3、实验操作中存在的问题。*方法评价：此方法特异性高、准确、简便，还可用于自动分析仪
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