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实验5——粗蛋白质的测定.ppt

实验5——粗蛋白质的测定

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2013-12-13 0人阅读 举报 0 0 暂无简介

简介:本文档为《实验5——粗蛋白质的测定ppt》,可适用于工程科技领域

实验五:粗蛋白含量的测定(微量凯氏定氮法)实验五:粗蛋白含量的测定(微量凯氏定氮法).实验原理样品与浓硫酸、催化剂一同加热消化使蛋白质分解其中碳和氢被氧化为二氧化碳和水逸出而样品中的有机氮转化为氨与硫酸结合成硫酸铵。然后加碱蒸馏使氨蒸出用硼酸吸收后再以标准盐酸或硫酸溶液滴定。根据标准酸消耗量可计算出蛋白质的含量。消化:NH(CH)COOHHSO→COSOHONHNHHSO→(NH)SO蒸馏:(NH)SONaOH→HONaSONH吸收:NHHBO→NHHBOHO滴定:NHHBOHClHO→NHClHBO实验材料、仪器与试剂材料:豆奶粉仪器:消化炉mL容量瓶微量凯氏定氮蒸馏器mL三角瓶酸性滴定管移液管。试剂:浓硫酸硫酸铜硫酸钾氢氧化钠硼酸溶液molL盐酸溶液溴甲酚绿甲基红混合指示剂。实验步骤()消化:准确称取豆奶粉样品g左右置于消化管中加入g硫酸钾、g硫酸铜再加mL浓硫酸摇匀待剧烈反应结束后在消化炉上消化待溶液澄清透明后再消化min然后将消化液无损地转移到mL容量瓶中定容。样品gg硫酸铜g硫酸钾mL浓硫酸摇匀小火炭化至泡沫完全停止大火加热保持液体微沸消化液蓝绿色并澄清透明继续消化h冷却后定容至mL()蒸馏、吸收与滴定:装好微量定氮装置准确移取消化稀释液mL于反应管内经漏斗再加入mL氢氧化钠溶液用少量蒸馏水洗漏斗数次夹好漏斗夹进行水蒸汽蒸馏。冷凝管下端预先插入盛有mL硼酸吸收液的液面下。蒸馏至吸收液中所加的混合指示剂变为绿色开始计时继续蒸馏min后将冷凝管尖端提离液面再蒸馏min用蒸馏水冲洗冷凝管尖端后停止蒸馏。然后用molL盐酸滴定吸收液。微量凯氏定氮蒸馏装置(凯氏)微量凯氏定氮蒸馏装置(凯氏)半微量凯氏定氮蒸馏装置(马氏)结果计算

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