null实验 4实验 4 维生素C含量测定 2,6-二氯酚靛酚法 实验目的
实验原理
实验器材
实验方法
实验结果
注意事项
思考题 实验目的 实验目的学习用2,6-二氯酚靛酚法测定维生素C的原理和方法。
进一步熟悉，掌握微量滴定法的基本操作技术 。 实验原理 实验原理 维生素C具有还原性,利用它的还原性可测定其含量. 还原型维生素C能被2,6-二氯酚靛酚氧化为脱氢型,染料本身被还原成无色的衍生物,该氧化性染料在碱性环境中呈蓝色,在酸性环境中呈红色.因此用2,6-二氯酚靛酚滴定含有维生素C的酸性溶液时,维生素C尚未全部被氧化时,则滴下的染料立即使溶液变成无色,当溶液中的抗坏血酸全部被氧化成脱氢抗坏血酸时,滴入的2,6-二氯酚靛酚立即使溶液呈淡红色,用这种染料滴定抗坏血酸至溶液呈淡红色为滴定终点,根据染料消耗量即可计算出样品中还原型抗坏血酸的量。 实验器材 实验器材材料 新鲜水果或蔬菜
试剂 1%草酸溶液:草酸1g溶于100ml蒸馏水中，2%草酸溶液:草酸2g溶于100ml蒸馏水中，抗坏血酸
标准
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溶液﹙0.1mg/ml﹚用1%草酸溶液配制，0.05%2,6-二氯酚靛酚溶液。
仪器或其他用具 天平，组织捣碎机，容量瓶﹙50ml﹚，微量滴定管﹙5ml﹚，刻度吸管﹙ml, 10ml﹚，锥形瓶﹙100ml﹚ 。
操作
步骤
新产品开发流程的步骤课题研究的五个步骤成本核算步骤微型课题研究步骤数控铣床操作步骤
操作步骤 ⑴ 1.2,6-二氯酚靛酚溶液的标定 准确吸取4.0抗坏血酸标准溶液（含0.4mg抗坏血酸） 于100ml锥形瓶中,加6ml 1%草酸溶液,用2,6-二氯酚靛酚溶液滴定至淡红色﹙15秒内不退即为终点﹚。记录所用染料溶液的体积，计算出1ml染料溶液所能氧化抗坏血酸的量。
⑵提取抗坏血酸取新鲜水果或蔬菜25g,加入25ml 2%草酸溶液,打成匀浆,用两层纱布过滤至100ml容量瓶中,滤饼用少量2%的草酸溶液洗几次,合并滤液,定容至100ml。
⑶样品滴定准确吸取样品提取液5ml和草酸15ml,放入50ml锥形瓶中,滴定方法同2,另取20ml1%草酸作空白对照滴定。样品提取液和空白对照各做两份。
结果处理 结果处理 维生素C mg/100g样品=﹙V1－V2﹚×V×M×100/V3×W
式中：
V1为滴定样品所消耗染料的平均毫升数.
V2为滴定空白对照所耗用染料的平均毫升数
V为样品提取液的总体积;
V3为滴定时所取的样品提取液的毫升数;
M为1ml染料所能氧化抗坏血酸的量﹙mg﹚
W为待测样品的重量﹙g﹚。
注意事项 注意事项1.用2%草酸制备提取液,可有效地抑制抗坏血酸氧化酶,
以免抗坏血酸变为氧化型而无法滴定,而1%的草酸无此作
用 。
2.市售的2,6-二氯酚靛酚质量不一,以标定货0.4mg抗坏
血酸消耗费2ml左右的染料为宜,可根据标定结果调整染
料的浓度
3.滴定过程易迅速,一般不超过2min。样品滴定消耗燃料
1～4ml为易如超出此范围,应增加或减少样品提取液用
量。 。 思考题 思考题1. 维生素C具有什么生理功能？
2. 为了在实验中得到准确的抗坏血酸含量应注
意那些问题？
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