生物技术药物的免疫毒性和免疫原性研究[1]

毒理学杂志 2007年 8月第 2l卷第 4期 J Toxicol August 2007 Vo1．21 No．4 ·281 · 物安全性评价提供形态学依据和结论。 毒性病理学 在药 物安全评价 中占有重要 的地位 ，因为动物 的急性毒性试验 、长期毒性试 验 、致 畸试 验 、致癌 试验都离 不开 毒性病 理学 的检查 和诊 断 ，而且 试验 的 周期越 长 ，毒 性病 理学 检查的结果越为重要。它可回答药物造成病理性损伤部位、程 度 、性质 和预后等基本 问题 ，因此可 以说 ，毒性病 理学是 毒理学 中最为重要的组成部分，也是临床前安全性评价工作中最基本 的环节 。 毒性病理学研究的特点：(1)是对视觉图像所见的描述 ，依 赖视觉 的判 断 ，是 以肉 眼、光 学显 微镜 为 观察 基础 ；(2)根 据实 际 中观察到 的变 化 ，与未 变时 的情 况相 比较 ，推 断可 能 出现 的 病变；(3)能结合全身所见症状、各项检测指标，进行综合分析 和判断 ，病理学检查是 目前最合适 的 方法 快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载 ；(4)但 是动 物发生病 变的特点 和病理 组织学 与 人体有 很 大 的区别 ，因此 ，所 得结 果 不能简单外推于人；(5)病理组织学所见指标缺乏客观的定性 (定量)资料，如生化检测可依赖分析仪器得到数值。而毒性病 理学必 须借鉴前辈 形态 学 的经验 ，并不 断 总结 初级经济法重点总结下载党员个人总结TXt高中句型全总结.doc高中句型全总结.doc理论力学知识点总结pdf ，加 以提高 。尤 其是需要多学科的知识 ，相互结合 ，综合分析，因此是一门交叉 学科 。 本次介绍的重点是 围绕 着如何在 GLP体制 下 ，建 立系统 的 规 范的毒性病理学研究 和评 价体系 ，探 讨毒性 病理学 研究 的主 要 内容 ，包括 整个 毒性 病理学研究过 程中所 涉及到 的试验实施 的规范性{技术操作的 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 性 、诊断术语和评价的准确性 ，以及 专 业技 术人员培训 的重 要性 等一 系列 关键 问题 。并举 例说 明 药 物引起的重要脏 器 的病变 以及 自发 性病 变。 同时探 讨我 国 毒性病 理学组织 的建立 和交流体系 ，为提高 我国毒性 病理学 研 究 水平应采取 的措施 和方式。 因为毒性病理学的重要性和特殊性 ，所以我们需要不断努 力 ，在工作 中多进 行交 流 和探讨 ，不 断 总结 ，不 断积 累经 验 ，共 同为提高我 国的毒性病 理学研究水平 而努 力。 新认证检查办法中 Study Audit的 概念及方法 王秀文 (中国药 品生物制 品检定所 国家药物安全 评价监测 中心 ，北 京 100176) 中图分类号 iR99 文献标识 码 iA 文章 编号 ：1002— 3127(2007)O4—0281—01 关键词i认证检查；药物非临床研究；Study Audit 自1999年原国家药品监督管理局颁布《药物非临床研究 质量 管理规范 兽药经营质量管理仓库管理管理规范大数据运维管理规范关节镜诊疗管理规范医院气体运行管理规范 (GIJP)(试行)》以来 已过去 7个年头，在此期间经 过试 点认证 检查 ，积 累 了 GLP认 证检 查 的经验 。2003年 SFDA 颁布了《药物非I临床研究质量管理规范(实行)》和《药物非I临床 研究质量管理规范认证检查办法 (试行)》。在全国范围 内对 GLP实施机 构开展了认证检查 工作 ，如今 已形成 一套 规范 的认 证检查 程序 ，包括 认证 检查 办法 、GLP认 证标 准 及 申报资 料 要 求等，使我国的 GLP认证检查工作已日趋成熟。本文将重点介 绍 Study Audit概念和方法 。 Studv Audit是近年国际上在 GLP认证检查 中普遍采用的， 行之有效的一种方法。即针对某一专题研究的总结报告书，以 溯源的形式核对总结报告书与实验方案、方法及结果、原始数 据 之间的一致性 ，溯源试验 的全过程。国内 的新 GLP认证 检查 标 准中也采用这种办法 。它 有 以下优 点 ：(1)通 过 溯 源试 验 的 全过程可以全方位调查某一研究机构的软硬件、GLP的运转状 态 ；(2)核 实总结报告书 中的每 一句话 、每个 数据 的来 源是 否属 实；Study Audit方法是针对某一专题研究的总结报告书中的每 一 句描述、每个数据及结果的来源依据进行溯源。本文对主要 溯源对象及具体办法进行了较详细的描述。主要溯源对象包 括：专题负责人及实验人员、供试品及对照品、实验动物的接 受、饲养等、给药及症状观察、指标观察 、数据的统计处理方法、 原始数据与实验结果的一致性、质量保证相关的包括专项实验 检查及整体设施 检查等 。 我国增加 了 Study Audit的检 查办法 后 ，GLP认证 办 法基 本 与国际接轨，使 GLP认证检查包括了Inspection和 Study Audit二 部分 。 生物技术药物的免疫毒性和免疫原性研究 吕秋 军 (军事 医学科 学院放射与辐射 医学研 究所 药理毒理 室，北京 100850) 中图分类 号 ：R99 文 献标 识码 iA 文章编 号 ：1002— 3127(2007)O4—0281—02 关键词 ：生物技术药 物 ；免疫毒性 ；免疫原性 生物技术药 物 由于其结构 、生产工 艺 、保存条 件 、可能存 在 的内源性对等物和作用靶点明确等固有的特点，因此在临床前 与临床研究阶段有必要进行免疫毒性 和免疫原性研究，也是我 国申报生物技术药物临床试验常规需要进行评价的内容。免 疫毒性是指受试品引起免疫抑制或增强 、过敏反应或 自身免疫 反应 ，可能与药理活性 相关 (如抗排 斥药 物 )或 不 相关 (如部 分 抗肿瘤药物 )。免疫原性 指药物刺激机 体形成 特异性 抗或致 敏 淋 巴细胞 的性 质。免疫毒性 和免疫原性评 价意义 重大 ，如免 疫 抑制可能会导致感染或对肿瘤的防御能力降低；免疫增强可能 会放 大 自身免疫反应 或过 敏反 应 。免 疫 原性是 药物 本 身具有 的性质 ，评价生物技 术药 物 的免疫 原性 ，主要是 因为其诱 导 的 抗体反应 常可以影 响对 药物毒 性 的客 观评 价。免疫 毒性 和 免 疫原性 的评 价一般与动物重 复给药毒性试 验结合 在一起 进行 ， 但有 时需要 额外试验 ，以进一步研究其 对免疫 系统 的影响及 其 机制 。 免疫毒性研 究包括 常规 毒性 试验 中的免疫 毒性 指标 观 察 及额外 的免疫 毒性试验 ：(1)常规 的免疫毒 性指标 包括 ：白细胞 总数及其分类计数、球蛋白和白，球比值 、淋巴器官，组织的大体 解剖 、胸 腺和脾脏 的器官 重量 和组 织学 检查 (胸 腺 、脾 脏 、引 流 淋巴结和其他部位一个淋巴结 、骨髓 、Peyer’s结 、BALT、NALT)。 (2)额外 的免疫 毒性 试验 。从文 献报 道 、受 试 品的结 构 及 常规 维普资讯 http://www.cqvip.com · 282 · 毒理学杂志 2007年8月第 2l卷第4期 J Toxicol August 2007 Vo1．21 No．4 免疫毒性指 标检测结果提示有 免疫 毒性 时 ，应进 行额外 的免疫 毒性试验。部分额外的免疫毒性试验可以并入常规毒性试验 中，仅需要对常规毒性试验方案进行修改，如增设卫星组 、增加 免疫学指标或改变给药方案等。另外，在成年动物中发现免疫 抑制作用后 ，需要评价发育免疫毒性作用，如观察母代暴露于 药物后仔代的淋巴系统和血液系统的变化等。额外的免疫毒 性试验包括免疫功能检测(如 T细胞依赖的抗体反应、NK细胞 活性 、CTL活性 、细胞 因子 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 达 、巨噬 细胞／中性粒 细 胞功 能 、皮 肤超敏反应 、宿主抵 抗 力研 究)和 免疫 表型检 测 。试验项 目的 选择 则依赖于受试药 物的作用特点 、适 应症等 。 免疫原性研究包括 ：抗体滴度、抗体的出现时间、出现抗体 的动物数、剂量关系、抗体滴度的动态变化、抗体的中和活性、 同期的药效／药代／毒性反应的变化、补体激活与否、免疫复合物 在肝肾的沉积、终止给药的条件、临床意义分析等。抗体检测 需 要建立相应方法 ，并对方法学进行 考察 ，如灵 敏度 、血清样 品 中受试品的干扰等。如给药后出现中和抗体并影响了大多数 动物的药理和(或)毒性反应，则可以终止给药。 生物技术药物发展迅速，种类繁多 ，临床前评价需采用更 多的分子生物学技术，以全面和科学地评价生物技术的免疫毒 性 ，更好地预测生物技术药物的免疫毒性和免疫原性。 对《细胞毒类抗肿瘤药物非临床研究技术 指导原则》部分内容的说明 张若明 (国家食 品药 品监督管理局 药品审评 中心 ，北 京 100850) 中图分类号 ：R99 文献标识 码 ：A 文章 编号 ：1002— 3127(2OO7)04—0282—01 关键词 ：细胞毒类 ；抗 肿瘤药物 ；指导原则 细胞毒类抗肿瘤 药物 是指 能够 直接 抑制 肿瘤 细胞 生长 或 增殖的一类化疗药物 ，作用机制包括抑制肿瘤细胞核酸或蛋 白 质的合成、干扰微管系统、抑制拓扑异构酶等。细胞毒类抗肿 瘤药物作为 目前 治疗 恶性 肿瘤 的主要 手段之一 ，具 有以下不 同 于普通药物 的特点 ：(1)临床主 要用 于晚期恶 生肿瘤患 者 ，患 者 生存期通常较短 ；(2)在杀灭或抑制肿瘤细胞的同时，也会对机 体的正常细胞(尤其是代谢旺盛的细胞)产生影响，通常在药效 剂量下就会导致患者出现不 良反应；(3)目前l临床药物的治疗 现状不理想 ，亟需更加安全、有效的新药。细胞毒类抗肿瘤药 的上述特点决定了其非l临床研究与其他药物有所不同，具有一 定的特殊性 和灵活性 。 ． 2007年国家食品药品监督管理局颁布了《细胞毒类抗肿瘤 药物非临床研究技术指导原则》，这也是近年来国家食品药品 监督管理局颁布的第一篇综合某一作用机制药物非l临床有效 性和安全性研究的技术指导原则。 现将对《细胞毒类抗肿瘤药物非临床研究技术指导原则》 中部分技术要求的理论依据、现实背景等进行进一步的说明， 希望能够有助于研究者对该指导原则的理解和执行。 基于药物代谢酶的中药毒性研究 高 月 (军事医学科学院放 射与辐 射 医学研 究所 ，北京 100850) 中图分类号：Q-356 文献标识码：A 文章编号g1002 ． ． 3127(2007)04 —-0282．-01 关键词 ：药物代谢酶；中药毒性 ；配伍禁忌 近年来基于 P450酶的药物相互作用及对 P450酶调控机制 的研究越来越受到重视。我们以中药配伍禁忌 中的经典范例 “十八反”为研究对象 ，将现代药理学中药物相互作用的分子基 础 P450酶 引入 中药相互作 用的研究 ，通 过酶 活力分 析 、分子 生 物学技术和现代色谱技术等手段对十八反 中各组药物对药物 代谢酶的影响进行了较系统的研究。 本工作首先考察了中药丹参 、苦参、人参及其与藜芦合用 对大 鼠肝 P450酶活力及 mRNA表达 的影响 ，结 果显示这 3种 中 药与藜芦配伍合用后均不同程度的抑制了 P450酶含量和主要 的药物代谢酶 CYP3A及 CYP2E1的酶活力，提示可能正是由于 3种中药与藜芦配伍后对药物代谢酶的抑制作用减缓 了剧毒中 药藜芦中相关物质的代谢致毒性增加，产生了不期望的中药毒 性 。 中药乌头与半夏、贝母、白蔹、瓜蒌和 白及配伍对大 鼠肝 P450酶影响研究中发现瓜娄 、白及、半夏、贝母与乌头合用按作 用强度顺序对 CYP3A和 CYP1A2在基因、蛋 白和酶活力水平产 生抑制作用。LC／MS技术结合体外代谢实验鉴定了乌头碱的 6 个代谢产物 ，HPLC结合代谢抑制实验显示参与乌头碱代谢的 P450亚酶为CYP3A和 CYP1A2。综合结果表明配伍合用后抑制 了 CYP3A和 CYP1A2，故 对于心脏 和神 经 系统 的毒性 很 可能 是 由于对 CYP3A和 CYPIA2的抑制作用减缓 了乌头碱的代谢速 率并提高了其血药浓度，产生了不期望的中药毒性。 中药海藻 、大戟、甘遂、芫花及与甘草合用对大 鼠肝 P450 酶活力，mRNA表达的影响研究中显示甘草单用及其与这些药 物配伍均对 CYP3A的 mRNA表达和酶活力产生了诱导作用。 在细胞水平上甘草甜素能浓度依赖性的诱导 CYP3A mRNA及 蛋白的表达，报告基因实验显示甘草甜索对 PXR转录激活活力 的诱导作用与其对 CYP3A表达的诱导作用相一致，表明甘草甜 素正是通过核受体 PXR产生了其对 CYP3A的诱导 ，并且这一 过程受 PKC途径调节 。 综合以上结果，我们认为中药配伍中存在基于药物代谢酶 的 中药相互作用 ，这种 相互 作用模 式 表 现为 中 药对 P450酶 的 诱导或抑制，受调控的P450酶再作用于配伍的其他 中药，改变 这些中药中相关成分的代谢特征，产生中药间的相互作用或毒 性 苦参素的毒代动力学及其对 胆碱酯酶的作用 杨福伟，张玉昆，李春梅，朱晓音，刘志峰 (烟台大学药学院 ，山东 烟 台 264005) 中图分 类号 ：R991 文 献标 识码 ：A 文章编 号 ：1002— 维普资讯 http://www.cqvip.com