BDBDBDBDCHINAUnit02B,03,05,28/F,Tower3,ChinaCentralPlace北京市朝阳区建国路77号,No.77JianguoRoad,ChaoyangDistrict,华贸中心3号写字楼28层02B03,05室Beijing,100025Tel:86-10-58139000Fax:86-10-58139191www.bd.comBDAccuriC6PI染色染色染色染色DNA检检检检测细胞周期测细胞周期测细胞周期测细胞周期所需所需所需所需试剂试剂试剂试剂1.BDPI/RNaseStainingBuffer货号:5508252.70%冷乙醇样本制备样本制备样本制备样本制备操作步骤:以下步骤可以直接在流式管中操作1.收集细胞,加入PBS,500g离心5分钟洗涤细胞,弃上清。2.DropbyDrop加入70%冷乙醇(尽量多),固定18h以上,固定在试管中即可。3.以500g离心5分钟,小心弃取上清,试管小心倒扣在滤纸上,吸尽酒精,弹起细胞。4.加入0.5mlPI/RNase染色液(货号:550825),充分混匀细胞后,37oC孵育15分钟。5.
分析
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前4oC避光保存样本。1小时之内上流式细胞仪检测。注意:PI染色的样本在上机检测之前和之后都需要彻底清洗机器,以保证机器管路的干净。BDBDBDBDCHINAUnit02B,03,05,28/F,Tower3,ChinaCentralPlace北京市朝阳区建国路77号,No.77JianguoRoad,ChaoyangDistrict,华贸中心3号写字楼28层02B03,05室Beijing,100025Tel:86-10-58139000Fax:86-10-58139191www.bd.comBDBDBDBDCHINAUnit02B,03,05,28/F,Tower3,ChinaCentralPlace北京市朝阳区建国路77号,No.77JianguoRoad,ChaoyangDistrict,华贸中心3号写字楼28层02B03,05室Beijing,100025Tel:86-10-58139000Fax:86-10-58139191www.bd.comBDBDBDBDCHINAUnit02B,03,05,28/F,Tower3,ChinaCentralPlace北京市朝阳区建国路77号,No.77JianguoRoad,ChaoyangDistrict,华贸中心3号写字楼28层02B03,05室Beijing,100025Tel:86-10-58139000Fax:86-10-58139191www.bd.comBDBDBDBDCHINAUnit02B,03,05,28/F,Tower3,ChinaCentralPlace北京市朝阳区建国路77号,No.77JianguoRoad,ChaoyangDistrict,华贸中心3号写字楼28层02B03,05室Beijing,100025Tel:86-10-58139000Fax:86-10-58139191www.bd.com画实验模板画实验模板画实验模板画实验模板第一幅图选择散点图,X轴和Y轴参数分别设为FSC-A、SSC-A,圈定目的细胞群第二幅图选择散点图,X轴和Y轴参数分别设为FL2-A、FL2-H,去除粘联体细胞第三幅图选择直方图,X轴设为FL2-A,PI直方图,分析G0/G1期,S期,G2/M期细胞BDBDBDBDCHINAUnit02B,03,05,28/F,Tower3,ChinaCentralPlace北京市朝阳区建国路77号,No.77JianguoRoad,ChaoyangDistrict,华贸中心3号写字楼28层02B03,05室Beijing,100025Tel:86-10-58139000Fax:86-10-58139191www.bd.comBDBDBDBDCHINAUnit02B,03,05,28/F,Tower3,ChinaCentralPlace北京市朝阳区建国路77号,No.77JianguoRoad,ChaoyangDistrict,华贸中心3号写字楼28层02B03,05室Beijing,100025Tel:86-10-58139000Fax:86-10-58139191www.bd.com收集样本数据收集样本数据收集样本数据收集样本数据在CFlowWorkspace左侧界面选择RunSettings设置储存细胞总数。选择收集P1门内的数据。样本管上样,开始收集数据。当计算机成功地收取足够数据,会自动储存数据文件。点击下一个空样本孔继续收集其他样本数据,完成检测。结果例图: