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第3章 氨基酸.ppt

第3章 氨基酸

crocodile3358
2009-10-30 0人阅读 举报 0 0 暂无简介

简介:本文档为《第3章 氨基酸ppt》,可适用于高中教育领域

(AminoAcid,AA,Aa,aa)第章氨基酸蛋白质的构件分子蛋白质的构件分子ProteinArchitecture一、氨基酸(一)蛋白质水解(一)蛋白质水解蛋白质和多肽的肽键可被催化水解酸碱能将蛋白完全水解酶水解一般是部分水解得到各种AA的混合物得到多肽片段和AA的混合物氨基酸是蛋白质的基本结构单元蛋白质月示胨多肽肽AA***(二)氨基酸的结构地球上天然形成的AA种以上。构成蛋白质的AA只有余种且都是α氨基酸。什么是氨基酸?CCCCCOOHγβαCCCC(NH)COOHα氨基酸CCC(NH)CCOOHβ氨基酸CC(NH)CCCOOHγ氨基酸什么是α氨基酸?大多数AA在中性pH时呈兼性离子状态:除甘氨酸外种AA都具有旋光性。除胱氨酸和酪氨酸外其余AA都能溶于水。COONH二、氨基酸的分类二、氨基酸的分类(一)常见的蛋白质氨基酸按R基的化学结构分类:1、脂肪族aa(1)中性aa()含羟基或硫aa(3)酸性aa及其酰胺(4)碱性aa2、芳香族aa3、杂环aa按R基的极性性质分类:1、非极性R基aa2、不带电荷的极性R基aa、带正电荷的R基aa、带负电荷的R基aa(二)不常见的蛋白质氨基酸由常见aa经修饰而来。(三)非蛋白质氨基酸多种多是蛋白质中L型αAA衍生物有一些是βγδAA有些是D型AA鸟氨酸瓜氨酸三、氨基酸的酸碱性质三、氨基酸的酸碱性质(一)兼性离子(二)氨基酸的解离(三)氨基酸的等电点(三)氨基酸的等电点当溶液为某一pH值时AA主要以兼性离子的形式存在分子中所含的正负电荷数目相等净电荷为。这一pH值即为AA的等电点(pI)。在pI时AA在电场中既不向正极也不向负极移动即处于两性离子状态。Ka*Ka=……侧链不含离解基团的中性AApI=(pK’pK’)甘氨酸滴定曲线对于侧链含有可解离基团的AApI取决于两性离子两边pK’值的算术平均值酸性AA:pI=(pK’pK’RCOO)碱性AA:pI=(pK’pK’RNH)四、氨基酸的化学反应四、氨基酸的化学反应(一)α氨基参加的反应与亚硝酸反应与酰化试剂反应烃基化反应形成Schiff’s碱反应脱氨基反应NHOHRCHCOOHHNORCHCOOHHONVanSlyke法测氨基氮(体积)的基础。N中的为氨基氮。氨基酸定量和蛋白质水解程度的测定。弱碱性DNP氨基酸(黄色)DNFBSanger法测定N末端氨基酸基础pH无水HF苯异硫氰酸酯PITC苯氨基硫甲酰衍生物苯乙内硫脲衍生物Edman降解法基础R’COOHR’COOC=OHNCHC=NCHHRHR醛氨基酸Schiff’s碱HH在生物体内经AA氧化酶催化即脱去α氨基而转变为酮酸。(二)α羧基参加的反应成盐或成酯反应成酰氯反应脱羧基反应叠氮反应()成酯NH干燥HClRCHCOOHCHOH回流RCHCOOCHHO()成酯NH干燥HClRCHCOOHCHOH回流RCHCOOCHHONH·Cl保护羧基()与NaOH等形成盐HN保护基RCHCOOHPClHN保护基RCHCOOClPOClHCl保护氨基活化羧基NH脱羧酶RCHCOOHRCHNHCOYNHONHNHRCHCOCHYNHOHNORCHCNHNHYNHORCHCNNNHO酰化氨基酸甲酯肼酰化氨基酰肼酰化氨基酰叠氮肽的人工合成(三)α羧基和α氨基都参加的反应、与茚三酮反应、成肽反应弱酸加热(四)侧链R基参加的反应、Tyr、碱性AA、碱性AA、带硫AATyr酚基在和位上易发生亲电取代反应如碘化和硝化黄色反应Pauly反应His侧链咪唑基与重氮苯磺酸生成棕红色化合物Pauly反应Arg侧链胍基与环己二酮生成缩合物Trp侧链吲哚基能被N溴代琥珀酰亚胺氧化分光光度法测定Trp含量Met侧链上甲硫基:强亲核基团与烃化试剂成锍盐保护巯基与二硫硝基苯甲酸发生硫醇二硫化物交换pH时nm最大光吸收分光光度法测定SHCys的巯基不稳定易被氧化成二硫键巯基在有痕量的金属离子如:CuFeCo或Mn时易被氧化Cys中的二硫键可被氧化剂(过甲酸)以及还原剂(巯基化合物)打开。磺基丙氨酸五、AA的光学活性和光谱性质五、AA的光学活性和光谱性质(一)AA的光学活性和立体化学(二)氨基酸的光谱性质(二)氨基酸的光谱性质可见光区:无吸收远紫外和红外区:都吸收近紫外区(nm):TyrTrpPhe原因:C=CC=CC=CC=C、紫外吸收光谱TrpnmTyrnmPhenm蛋白质含量测定nm2、核磁共振波谱六、氨基酸混合物的分析分离六、氨基酸混合物的分析分离利用AA成分分配系数的差异(一)分配层析法的一般原理{层析系统固定相{流动相附着在固相上的液体固体按两相所处状态分:按操作形式分:按层析原理分:固定相各组分对固定相(二)分配柱层析(二)分配柱层析填充物为亲水性的不溶物质如纤维素、淀粉、硅胶等收集的组分用茚三酮显色定量。(三)纸层析(三)纸层析(四)薄层层析(五)离子交换层析(五)离子交换层析(六)气液层析(六)气液层析(七)高效液相层析(七)高效液相层析固定相支持剂颗粒细表面积大采取高压洗脱速度快。

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