香菇多糖提取工艺的研究综述
学生： 指导教师：
香菇营养丰富，味道鲜美，被视为“菇中之王”。其中含有的香菇多糖在保健食品领域有广泛的应用。通过对多糖的构效和量效关系的研究，人们将会利用我国丰富的多糖资源，生产出高附加值的多糖为主要成份的保健食品，以提高人民身体素质、增进健康、提高生活质量。本研究以香菇为原料提取香菇多糖。目前香菇的深加工方法虽然较多，但科技含量不高，而且大多不能规模化生产。从香菇中提取香菇多糖可大大提高香菇的附加值,如何改进工艺，提高得率具有非常重要的意义。
1、多糖的提取工艺
2.1水提法
用水作为溶剂提取多糖是最常用的方法之一，分为热水浸提和冷水浸提。一般植物多糖的提取多数采用热水浸提，该法提到得多糖溶液可接或离心除去不溶物；或者采用高浓度的乙醇沉淀提出多糖；还可以按多糖的不同性质在粗分阶段利用混合溶剂提取法对植物中不同的多糖进行分离。
冷水浸提相对于热水浸提法不常用，在此就不不做说明。
2.2超声波提取法
超声波作为一种先进的提取方法，具有时间短、耗能低、效率高等特点，在生产中得到了广泛的应用。原理是：超声波产生的空化作用，这种空化作用能够产生局部的高温高压，并形成强大的冲击波或高速射流，这种强大的高速射流能够有效的减少、消除与水相之间的阻滞带，加大了传质效率。同时，高速射流对植物细胞组织产生一种物理剪切力，使之变形、破裂并释放出内含物，这就加大了萃取过程。另外，超声波的许多次级效应、溶化、扩散、击碎、化学效应、生物效应、凝聚效应等也能加速植物有效成分在溶剂中的扩散释放，促进有效成分与溶剂的混合，有利于萃取。
2.3微波萃取法
微波是频率介于300MHz和300GHz之间的电磁波。其原理是：微射线辐射于溶剂并透过细胞壁达到细胞内部，由于溶剂及细胞液吸收微波能，细胞内部温度升高，压力增大，当压力超过细胞壁的承受能力时，细胞壁破裂，位于细胞内部的有效成分从细胞中释放出来，传递转移到溶剂周围被溶剂溶解。对微波技术的应用，它具有穿透能力强、选择性高、加热效率高等特点，近年来得到了广泛的应用。尤其是应用于植物细胞破壁，有效地提高了收率。影响微波浸提的因素为浸提时间、其次为微波功率和液固质量比。与热水浸提法比较。微波提取具有提取时间段，提取率高，是强化固液提取过程颇具发展潜力的新型辅助提取技术。
2.4酶解法
酶解法就是指在浸提过程当中加入相应的酶来水解纤维素、果胶、蛋白质分子等，以使多糖从细胞中分离出来。影响得率的主要因素有：酶用量、酶作用时间、作用温度和PH.由于温度和PH会极大地影响酶的活性，高温、过酸、过碱，都会使酶失活。因此，具体的环境我们应该通过实验找出最适条件。这样不仅可以增大最后的得率，而且省时、省力。
2.5酸提法
植物多糖一般采用热水浸提法，而有一些多糖适合用烯酸提取。在试验中，尽量避免在强酸中进行，否则极易造成多糖中糖苷键断裂及构象变化而形成较多单糖，影响多糖得率。
2.6碱提法
有些多糖在碱液里有更高的提取率，尤其是提取含有糖醛酸生物多糖及酸性多糖。碱液提取时，多为0.1mol/l的氢氧化钠或氢氧化钾，以防多糖的降解，常通以氮气或硼氢化钠或硼氢化钾。值得注意的是碱的浓度应得到有效控制，因为多糖在碱性较强时会水解。另外，烯酸、稀碱的提取液应迅速中和或透析，浓缩与醇沉得到多糖沉淀。
2、多糖提取工艺的优化（水提醇沉法）
2.1 料液比的影响
料液比是影响香菇多糖提取的主要因素，料液比过小，提取不完全；料液比太大，溶剂用量大且回收、过滤、转移困难，造成浪费。
精确称取10.0g的香菇粉末4份，料液比分别为1：10、1：15、1：20、1：25。提取剂为无水乙醇，浓度为80%，提取温度为95℃，提取时间为2h，计算多糖含量，确定最佳料液比。
2.2 提取时间的影响
提取时间对多糖含量的影响主要
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现为，随着加热时间的增加可以促进多糖的溶解,但加热时间若过长多糖提取率反而下降,这可能使多糖发生部分水解。
精确称取10.0g的洋葱粉末4份，料液比为1：20，提取剂为乙醇，浓度为80%，提取温度为95℃，提取时间分别为1.5h、2h、2.5h、3h。计算多糖含量，确定最佳的提取时间。
2.3 提取温度的影响
提取溶剂对多糖提取的影响主要表现在一定温度范围内提取量呈增长趋势，当达到一定温度后又开始下降，所以需找合适的提取温度也是提取的关键。
精确称取10.0g的洋葱粉末4份，料液比为1：20，提取剂为的80%乙醇，提取温度分别为80℃、85℃、90℃、95℃提取时间为2h，计算多糖含量，确定最佳的提取温度。
2.4 乙醇浓度的影响
提取溶剂的浓度会对多糖的提取量产生影响。
精确称取10.0g的洋葱粉末4份，料液比为1：20，提取温度为95℃，计算多糖含量，确定最佳的提取溶剂浓度。
正交试验
由于各个因素的不同组合方式对香菇多糖的得率有不同的影响。为了减少试验次数，故本试验采用正交试验法。
3、Sevega法脱蛋白
Sevage 法：利用蛋白质在三氯乙烷等有机溶剂中变性的特点，将提取液与 Sevage试剂[氯仿：正丁醇=4：1（V/V）]4：1 混合，振荡，离心，变性后的蛋白质介于提取液与 Sevage 试剂交界处。此法的优点是条件温和，不会引起多糖的变性[13]。值得注意的是操作过程要正确使用试剂以防中毒。
4、DNS法测多糖
DNS法即3，5．二硝基水杨酸比色法的英文简称。其原理是3，5．二硝基水杨酸在中性或偏碱性条件下与多糖水解的还原糖共热后被还原成棕红色的氨基化合物3一氨基一5一硝基水杨酸，在一定范围内，还原糖的量和反应液的颜色呈正比[12]。由于DNS法具有准确性高、重现性好、尤其适用于大批量样品的测定等特点，而被广泛采用。需要注意的是酸水解时间的控制，时间太短多糖水解不完全，时间太长则单糖和盐酸发生反应生成糖醛，不能和3，5-二硝基水杨酸反应，因此，要严格控制水解反应时间，提高实验的准确性。
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