正丁醇相的分离

正丁醇部位的分离一向是分离工作中的难点，但由于其出新率远高于小极性部位，所以还是值得下一番功夫的。 一般来说，正丁醇部位往往含有单糖、二糖等小分子糖，多种酚类化合物，以及苷类化合物，极性较大，在硅胶柱上吸附较多，成点性差，分离效果不好。因此，一般说来，对于正丁醇部位可采取以下方法： 1. 大孔树脂柱分段。 水溶后上样，依次用水，30%、60%、95%乙醇溶液洗脱，分别合并、收集。一般说来目标化合物多在60%段，水，30%段多为一些水溶性单糖、二糖及多酚类化合物，可以考虑弃去。而95%部分多和乙酸乙酯部位大极性段重叠，可以乙酸乙酯部位合并处理。 2. 反相硅胶分段。 如果正丁醇部位量不是太大，或者课 题 快递公司问题件快递公司问题件货款处理关于圆的周长面积重点题型关于解方程组的题及答案关于南海问题 组有大反相柱，可以考虑用反相柱砍段。唯一需要提醒注意的是，由于我们一般是用正相硅胶板检测化合物分离情况，所以反相柱 砍段后往往各组份在硅胶板上看起来比较混乱，不如硅胶柱砍段后那么直观，一定要小心对比，否则会越分越乱。 3.正相柱分配色谱层析。 如果正丁醇部位量太大，或者课题组没有大的反相柱用来分段，那么可以考虑氯仿：甲醇：水体系来砍段。我一般用8：2：1、7：3：1以及6.5：3.5：1依次洗脱，效果不会很好，但两到三次反复上柱后各部分还是可以看得到点的。这时再会反相柱细分，拿十到二十个点应该没问题的。 正丁醇在提取分离这一块是难度最大 1.正丁醇层部分极性大，容易变化，譬如，皂苷类发生水解，变成次级皂苷和苷元。 2.化合物稳定性差，容易变化，往往导致重复性差，譬如，上柱子前可以看见一个很好的点，准备分离这个目标点，但是从柱子上下来以后，点比上柱子前还多。 3.薄层条件难于摸索，一般用到氯仿甲醇水系统，但是，这不是绝对的，有时候，展开系统就难于选择了，比如，极性最小三相氯仿甲醇水系统中的一般最小的是9：1：0.1，但是如果用这个比例还是展到了最上面，你肯定想把极性调小，比如，换成20：1，或者是15：1，跑出来就是一条线，想往其中加水，但是水加多少呢？加多了，三相就变成分层的了，1％不算多吧，可是，还是分层，真是不好处理。 4.溶解性也不好，遇到一些东西，说什么也不溶解，实在没有 办法 鲁班奖评选办法下载鲁班奖评选办法下载鲁班奖评选办法下载企业年金办法下载企业年金办法下载 ，有时候1克的东西，全部溶解都需要50-80ml的溶剂，你想想用这么多的溶液来拌样，是个什么样的工作量，推荐系统有：氯仿甲醇水系统，正丁醇醋酸水系统，乙酸乙脂甲醇水系统，分极性大的部分，不能拘泥于硅胶柱，应结合多种色谱分离手段，应多尝试用ODS柱，凝胶柱，还可以考虑制备薄层，有时此法效果极其好，有条件的可以考虑制备液相进行分离 可以先考虑用树脂，甲醇-水系统 然后再用硅胶，氯仿-甲醇-水 然后再用别的方法进一步分离 运气好的时候从甙元到糖都能得到 一篇文献的一部分 The n-BuOH-soluble fraction was separated first by column chromatography on a highly porous synthetic resin, Diaion HP-20 (¼ ) 5.0 cm, L ) 60 cm) (Mitsubushi Chemical Co., Ltd., Tokyo, Japan), with MeOH-H2O [(1:4, 8 L), (2:3, 8 L), (3:2, 8L), and (4:1, 8 L)]; 500 mL fractions were collected. The residue(26.6 g in fractions 13-18) of the 40% MeOH eluate obtained on Diaion HP-20 column chromatography was subjected to silica gel (500 g) (70-230 mesh; Merck Co., Ltd., Darmstadt,Germany) column chromatography with CHCl3 (2 L) and CHCl3-MeOH (99:1, 3 L), (49:1, 3 L), (97:3, 3 L), (24:1, 3 L),(19:1, 3 L), (47:3, 3 L), (23:2, 3 L), (9:1, 4.5 L), (7:1, 4.5 L),(17:3, 4.5 L), (33:7, 3 L), (4:1, 3 L), (4:1, 3 L), and (7:3, 3 L),fractions of 500 mL being collected. The residue (2.26 g in fractions 35-41) of the 6% MeOH eluate was separated by reversed-phase silica gel (Cosmosil) column chromatography to give 1.14 g of a residue, which was then purified by DCCC to give 563 mg of a residue in fractions 175-232 and 313 mg of 6 in fractions 233-261. The former was purified by DCCC again, followed by recrystallization from MeOH, to afford 11.0 mg of 7. 整个过程基本上就是： 树脂（甲醇-水）-->硅胶（氯仿-甲醇-水）-->ODS（甲醇-水，梯度）-->DCCC（上行） 应该是挺成熟的方法 但是具体要怎样做，还要根据自己的样品的情况以及实验室的条件决定 目前我正在做正丁醇部位的分离，好难啊现在接了许多流份，在合并一些流份之后，发现有些上面漂了一层白色的物质，有点像蜡状，问了下同学说是可能是油脂类的东西，但是我觉得正丁醇部位的东西怎么会含有这类东西呢？ 答：萃取不完全有可能出现少量的油脂。你提到流份，那就不是油脂，我也碰到过，应该是样品中的灰尘或硅胶的碎沫沫，不是好东西，当溶液挥干后，它就干吧在小瓶壁上，再用溶剂洗也洗不下来。 1、挥干后用不同极性的溶剂洗（极性从小到大），最好是一种不能溶解结晶能溶解杂质的溶剂。——限于各种系统跑都是一个主斑点。 2、两个点以上的样品就得再上柱子分离啦，凝胶，硅胶等等。 问：但是我的东西可以用溶剂溶解，我试过了， 由于用的是二氯甲烷/甲醇系统洗脱，这些物质溶于二氯甲烷不容于甲醇，再说我接的流份都是中间的了，不会有你说得样品中的灰尘或硅胶的碎沫沫吧，希望没有！那应该是什么类的东西呢？我还有一个问题想请教下，在我合并的其中几个流份里有白色的沉淀出现，溶剂挥干后，我把这些沉淀转移了，发现不溶于甲醇，但溶于二氯甲烷，因此我把这些沉淀用二氯甲烷溶解了，但发现溶剂挥干后，里面是一层没有形状的物质，请教一下大家，我下部该如何进行？重结晶吗？ 答：第一：有liuhai99995 说的那种可能哦，样品种灰尘下来也是需要点时间的呀！另外，你可以用什么溶剂溶解了，点在板子上，不用展开，直接看荧光，然后喷通用显色剂，如果发现有荧光或有颜色变化，就说明不是灰尘喽，恭喜你，下一步，就是展开，看有几个斑点啦！ 第二：那样的情况最好是沉淀析出一定量就把剩余的溶剂吸出来，转入另一个瓶子种继续析出沉淀。否则，溶剂挥干其他杂质又和沉淀混在一块啦。建议点板，看有几个点，一般一个点、两个点（其中一点的 含量很大）才能看到漂亮形状哦。 正丁醇层的成分极性比较大 不适合用硅胶来分离 反相比较适合，建议先上中低压ODS，或者开放ODS砍个断 之后制备液相进行分离