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临床免疫学与检验重要知识点汇总.doc

临床免疫学与检验重要知识点汇总.doc

上传者: 司隶校尉 2013-05-30 评分 4.5 0 89 12 405 暂无简介 简介 举报

简介:本文档为《临床免疫学与检验重要知识点汇总doc》,可适用于考试题库领域,主题内容包含免疫应答主要分为哪几个阶段?)识别阶段)活化和增值阶段)免疫效应中枢免疫器官和外周免疫器官有哪些器官组成?各有什么功能?)中枢免疫器官:免疫细胞发生符等。

免疫应答主要分为哪几个阶段?)识别阶段)活化和增值阶段)免疫效应中枢免疫器官和外周免疫器官有哪些器官组成?各有什么功能?)中枢免疫器官:免疫细胞发生、分化、成熟的场所如骨髓胸腺)外周免疫器官:免疫细胞产生应答的场所。如脾脏淋巴结黏膜扁桃体等。T细胞、B细胞和NK细胞的主要功能分别是什么?)T细胞:介导细胞免疫辅助体液免疫。)B细胞:产生体液免疫)NK细胞:介导天然免疫发挥细胞毒作用。根据作用方式及其特点的不同机体存在两类免疫简述各自的概念和特征?)先天性免疫或固有性免疫是个体出生是就具有的天然免疫可通过遗传获得是机体在长期进化过程中逐渐建立起来的主要针对入侵病原体的天然防御功能。其主要特征是反应迅速针对外来异物的范围较广不针对某个特定异物抗原也称非特异性免疫。)适应性免疫是个体出生后接触到生活环境中的多种异物抗原并在不断刺激中逐渐建立起来的后天免疫也称获得性免疫。其主要特征是针对某个特定的异物抗原而产生免疫应答开始的应答过程比较缓慢一旦建立清除该抗原的效率很高特异性很强也称特异性免疫。简述抗原抗体反应的原理。答:抗原与抗体能够特异性结合是基于抗原表位与抗体超变区分子间的结构互补性与亲和性这种特性是由抗原、抗体分子空间构型所决定的它们之间的结合是抗原表位与抗体超变区沟槽分子表面的结合简述抗原抗体反应的类型。答:抗原抗体反应分为五种类型:颗粒性抗原与相应抗体结合所产生的凝集反应可溶性抗原与相应抗体结合所产生的沉淀反应抗原抗体结合后激活补体所致的细胞溶解反应细菌外毒素或病毒与相应抗体结合所致的中和反应免疫标记的抗原抗体反应等。什么是带现象答:在抗原抗体反应等价带前后由于抗体或抗原过量(形成前带或后带)上清液中可测出游离的抗体或抗原形成的沉淀物少不出现可见反应这种现象在做血清学试验时称为带现象。影响抗原抗体反应的环境条件有哪些在实验中如何控制这些条件因素答:环境条件包括:电解质酸碱度和温度。稳定条件:电解质:常用O.%氯化钠或各种缓冲液作抗原及抗体的稀释液及反应液酸碱度:pH过高或过低都将影响抗原与抗体的理化性质抗原抗体反应一般在pH为~时进行温度:一般以为宜最佳反应温度为。简述单克隆抗体制备技术的主要步骤。单克隆抗体是应用B细胞杂交瘤技术进行制备的其主要操作步骤包括抗原免疫、亲本细胞的选择和制备、细胞融合、杂交瘤细胞的筛选和克隆化、杂交瘤细胞体内接种或体外增量培养、单克隆抗体的纯化与鉴定。试述免疫血清应如何进行纯化。免疫血清的纯化主要是指提纯免疫血清中的IgG并去除无关的杂抗体。提纯IgG类抗体的方法有:硫酸胺盐析法粗提、离子交换层析法和亲和层析法采用亲和层析法提取IgG时可使用纯化抗原或葡萄球菌蛋白A交联sephamseB制成层析柱。另外还可通过吸附法获得单价特异性抗血清。方法是将不含特异性抗原的杂抗原与戊二醛等双功能试剂混合制成固相吸附剂以吸附免疫血清中的杂抗体或将杂抗原交联于sephamseB上通过亲和层析去除杂抗体。叙述杂交瘤技术的基本原理。杂交瘤技术是在细胞融合技术的基础上将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤。这种杂交瘤细胞具有两种亲本细胞的特性即既能够分泌抗体又能在体外长期繁殖经过克隆化后成为单个细胞克隆分泌的抗体即为单克隆抗体。简述间接血凝试验的基本原理。间接血凝试验是将可溶性抗原(或抗体)吸附于人的型红细胞或绵羊、家兔的红细胞制成抗原致敏的红细胞与相应抗体(或抗原)作用在有电解质存在的条件下经过一定时间可出现肉眼可见的红细胞凝集现象又称被动血凝试验简述抗人球蛋白试验的原理(又称Coombs试验)、类型及其在临床上的应用。Coombs试验又称抗人球蛋白试验其原理是不完全抗体多半是S的IgG类抗体能与相应的抗原牢固结合但在一般条件下不出现可见反应利用抗球蛋白抗体作为第二抗体连接与红细胞表面抗原结合的特异抗体可使红细胞凝集。Coombs试验有二种类型:()直接Coombs试验:用于检测红细胞结合的不完全抗体。()间接Coombs试验:用于检测血清中游离的不完全抗体。抗球蛋白试验主要应用于那些方面?输血:对于“危险”受体(指曾经输血、肌肉注射过血液制品或母子间血型不合的妊娠而可能产生免疫性血型抗体的人)的配血试验必须包括各种不完全抗体的检查以抗球蛋白法最为可靠。血型抗原抗体的检查:主要检查Rh者其体内是否有抗D抗体应用抗球蛋白试验对外表为D阴性的供体血液作常规检查。最可靠和灵敏的方法是将待检D阴性的红细胞与高效价的不完全抗D血清混合然后加抗球蛋白血清检查细胞上有无致敏抗体。对新生儿溶血性贫血性疾病的诊断:母体产生的最常见的免疫性抗体为Rh抗体和ABO抗体一般为S的IgG可通过胎盘屏障作用于胎儿红细胞引起新生儿溶血性疾病可借抗球蛋白试验检出而采取预防性措施。对溶血性贫血的研究:获得性溶血性贫血患者大多数可借助该方法证实有自身红细胞的抗体存在。对细菌或立克次体的不完全抗体的检查。Coombs试验还可采用专一性特异性的抗球蛋白的血清如抗IgG血清、抗IgM、抗IgA以及抗补体血清等分析结合于红细胞上的不完全抗体免疫球蛋白的亚类。什么是协同凝集试验?主要用于何种检测?协同凝集试验与间接凝集反应的原理相类似但所用的载体为金黄色葡萄球菌。这种细菌的细胞壁中含有A蛋白(SPA)SPA能与特异性抗体IgG的Fc段结合(IgG除外)。抗体的F(abˊ)段暴露在葡萄球菌的表面仍保持与相应抗原特异性结合的特性。当这种葡萄球菌与IgG抗体连接时就成为抗体致敏的载体颗粒若与相应抗原接触即出现反向间接凝集反应。可用于细菌、病毒、毒素及各种可溶性抗原的检测。何谓间接凝集反应?将可溶性抗原(或抗体)先吸附或偶联于与免疫无关大小适当的颗粒表面使之成为致敏载体颗粒然后与相应抗体(或抗原)作用在适宜电解质存在条件下出现特异性的凝集现象称为间接凝集反应间接凝集反应如何进行分类?各试验的原理是什么根据致敏载体用的是抗原或抗体分为正向间接凝集试验和反向间接凝集试验根据载体种类分为间接血凝试验和胶乳间接凝集试验根据反应方式分为间接凝集试验、间接抑制凝集试验和协同凝集试验。间接凝集试验是用抗原致敏载体检测标本中的相应抗体。将可溶性抗原与载体颗粒结合再与标本中的抗体反应通过抗体桥联形成肉眼可见的凝集颗粒或凝集块为阳性反应。反向间接凝集试验选用已知特异性抗体致敏载体检测标本中的相应抗原。用特异性抗体致敏颗粒与样品中的待检抗原反应通过抗原桥联形成肉眼可见的凝集为阳性。临床上用于检测HbsAg、AFP等。间接凝集抑制试验诊断试剂为已知抗原致敏的颗粒载体及相应的抗体用于检测标本中与致敏抗原相同的抗原。将标本与抗体试剂相反应然后加入致敏抗原若出现凝集现象说明标本中不存在相应抗原如未出现凝集现象则说明待检标本中含有相应抗原凝集反应被抑制。同理用抗体致敏载体颗粒及相应抗原作为诊断试剂检测标本中的抗体称为反向间接凝集试验。协同凝集试验与间接凝集反应的原理相似但所用载体为金黄色葡萄球菌该菌细胞壁上的SPA能与特异性抗体的IgG的Fc段结合(IgG除外)抗体的F(abˊ)段暴露在葡萄球菌的表面仍能与相应抗原特异性结合。当这种葡萄球菌与IgG抗体连接时就成为抗体致敏的载体颗粒若与相应抗原接触即出现反向间接凝集反应。间接血凝试验是以红细胞作为载体的间接凝集试验用已知的抗原或抗体致敏红细胞然后与样品中的抗体或抗原在适宜条件下反应出现红细胞凝集者为阳性。根据红细胞凝集的程度判断阳性反应的强弱。胶乳凝集试验是以聚苯乙烯胶乳微粒作为载体的间接凝集试验。HAT培养基筛选杂交瘤细胞的机制是什么?答:淋巴细胞:不能生长到天死亡DNA的主要合成途径被A阻断骨髓瘤细胞:不能生长到天死亡HGPRT缺乏DNA合成的旁路途经受阻骨髓瘤细胞和脾细胞融合形成杂交瘤细胞可长期生长繁殖。利用淋巴细胞的HGRT将H合成为嘌呤碱并最终与T一起合成DNA从淋巴细胞获得产生某种抗体的遗传信息从骨髓瘤细胞获得不断繁殖的能力简述免疫系统的三个生理功能。答:免疫系统的三个生理功能为免疫防御、免疫自稳、免疫监视 免疫防御:是机体排斥外来抗原性异物的一种免疫保护功能。该功能正常时机体可抵御病原微生物及其毒性产物的感染和损害即抗感染免疫异常情况下反应过高会引起超敏反应反应过低或缺失可发生免疫缺陷。免疫自稳:是机体免疫系统维持内环境稳定的一种生理功能。该功能正常时机体可及时清除体内损伤、衰老、变性的细胞和免疫复合物等异物而对自身成分保持免疫耐受该功能失调时可发生生理功能紊乱或自身免疫性疾病。免疫监视:是机体免疫系统及时识别、清除体内突变、畸变细胞和病毒感染细胞的一种生理功能。该功能失调时有可能导致肿瘤发生或因病毒不能清除而出现持续感染。决定抗原抗体最佳配比的方法有几种()抗原稀释法:将可溶性抗原作一系列倍比稀释然后向各管中加入一定浓度的适量抗血清反应后产生的沉淀量随抗原量变化而不同以沉淀物最多的管为最适比例管。()抗体稀释法:是将恒定量抗原与不同倍比稀释的抗体反应出现沉淀物最多的管为抗体最适比例管。()棋盘格法:亦称方阵法。抗原抗体同时稀释可一次完成抗原和抗体的滴定并找出抗原、抗体的最适比。是前二法的结合简述单向免疫扩散试验的基本原理和技术要点。()原理:待测抗原从局部含有定量抗体的凝胶内自由向周围扩散抗原抗体特异性结合在两者比例合适的部位形成白色沉淀环沉淀环的大小与抗原的浓度呈正相关。()技术要点:将抗体和热融化琼脂(约%)混合倾注成平板。待凝固后在琼脂板上打孔孔中加入已稀释的抗原液和不同浓度的抗原标准品置~温箱~h后观察孔周围沉淀环。量取沉淀环直径通过抗原标准品计算待测抗原的浓度。在双向免疫扩散试验中如何判定结果双向免疫扩散中出现沉淀线表明存在相应的抗原、抗体不出现沉淀线则表明缺乏抗原或抗体。沉淀线的形成是根据抗原抗体两者比例所致沉淀线靠近抗原孔提示抗体含量高靠近抗体孔提示抗原含量较多免疫电泳技术的优点是什么免疫电泳有哪些用途)优点:免疫电泳技术是将免疫扩散和电泳相结合的一种免疫学分析技术既有抗原抗体反应的高度特异性又有电泳分离技术的快速、灵敏和高分辨力广泛应用于牛物医学领域。()用途:纯化抗原或抗体的成分分析分析其纯度正常及异常体液中蛋白质成分的分析如无丙种球蛋白血症、冷球蛋白血症、多发性骨髓瘤、白血病、系统性红斑狼疮、肝病等病人的血清蛋白成分的分析多发性骨髓瘤血清M蛋白的检测和鉴定免疫后不同抗体组分的动态变化研究对流免疫电泳时抗体为什么流向负极大部分蛋白质抗原在碱性溶液中带负电荷电泳时从负极向正极泳动而抗体IgG分子量大暴露的极性基团较少在缓冲液中解离的也少向正极的泳动速度较慢电泳时由电渗引向负极的液流速度超过了IgG向正极的泳动带动抗体流向负极使抗原和抗体定向对流并发生反应出现肉眼可见的沉淀线。简述火箭免疫电泳的原理和主要用途。()原理:火箭免疫电泳是将单向免疫扩散和电泳相结合的技术。抗原在电场作用下在含有适量抗体的琼脂糖凝胶中向正极泳动逐渐形成梯度浓度在抗原抗体比例适当时形成沉淀随着抗原量的减少沉淀带越来越窄形成火箭峰样沉淀峰形高低与抗原量呈正相关。用已知量标准抗原作对照绘制标准曲线根据检测样品沉淀峰的高度可算出待测抗原的含量。()主要用途:抗原蛋白定量如IgA、IgG、IgM和sIgA检测C、C及其裂解产物检测AFP等检测。免疫浊度测定的基本原理是什么有哪些类型()基本原理:免疫浊度测定是将液相内的沉淀试验与现代光学仪器和自动分析技术相结合的一项分析技术。当可溶性抗原与相应的抗体特异结合在二者比例合适、并有一定浓度的电解质存在时可以形成不溶性的免疫复合物使反应液出现浊度。这种浊度可用肉眼或仪器测知并可通过浊度推算出复合物的量即抗原或抗体的量。()类型:按测量方式可分为透射免疫比浊法和散射免疫比浊法。按测定速度可分为速率比浊法和终点比浊法。散射免疫比浊法的基本原理是什么沿水平轴照射的一定波长的光在通过溶液时光线可被其中的免疫复合物粒子颗粒折射发生偏转产生散射光。根据Rayle培h散射方程散射光强度与粒子(免疫复合物)的浓度和体积成正比通过测量散射光的强度可计算出待测抗原的浓度。速率散射比浊法中的“速率”是指什么所谓速率是指单位时间内抗原与抗体反应的速度。抗原与抗体结合形成免疫复合物的速度在每个单位时间内是不相同的在抗体过量的情况下随着反应时问的延长免疫复合物的总量逐渐增加通常在s时出现一个反应最快的速率峰。峰值与抗原量呈正相关。免疫浊度测定的反应体系中为什么必须始终保持抗体过量抗原和抗体的比例是浊度形成的关键因素抗原和抗体必须在一个适当的浓度才会出现最高结合率。当抗原过量时由于钩状效应形成的免疫复合物分子小而且会发生再解离使浊度下降光散射减少。当反应液中抗体过量时免疫复合物的形成随着抗原量的增加而递增光散射的强度也随之递增因此免疫浊度测定的反应体系中必须始终保持抗体过量以保证免疫复合物的生成量与浊度的改变一致这是免疫浊度测定的基本原则。单向琼脂扩散试验有那些影响因素?单向扩散试验有下列影响因素:抗血清的亲和力、特异性、及效价。要求亲和力强特异性好、效价高。注意存放的方法防止效价下降。标准曲线必须在每次测定时同时制作绝不可一次作成长期应用。测定时必须加测质控血清以保证定量的准确性。有时出现扩散环呈现两重的双环现象这是出现了抗原性相同的两个组分其扩散率不同例如α重链病血清中出现的α重链和正常的IgA两种成分并存皆与抗IgA抗体发生反应就形成内外两重环。在单扩试验时有时回出现结果与真实含量不符这主要出现在Ig测定中。如用单克隆抗体或骨髓瘤纯抗原免疫动物获得的抗血清都存在单一结合价的现象若用此作为单扩试剂测量正常人的多态性抗原则抗体相对过剩是沉淀圈直径变小测量值降低。测得假阳性升高现象与上面相反如用多克隆抗体测定单克隆病则抗原相对过剩(单一抗原决定簇)致使沉淀圈呈不相关扩大从而造成某一成分的伪性增加。沉淀反应可应用在那些方面?沉淀反应主要应用于体液内包括血液、尿液、脑脊液、胸水、泪液、关节腔液等内的蛋白质(如MW~标本浓度为mgL~gL)测定应用最广泛的是可以准确定量的免疫浊度法也可用于药物的测定。双向琼脂扩散试验的原理是什么?双向琼脂扩散试验的原理为可溶性抗原和抗体在含有一定电解质的琼脂凝胶板的对应孔中各自向对方扩散在最适当的比例处形成抗原抗体沉淀线根据沉淀线的位置、形状及对比关系可作出对抗原或抗体的定性分析试对沉淀反应各类试验方法进行评价。沉淀反应可分为单向免疫扩散试验、双向免疫扩散试验、絮状沉淀试验、免疫浊度测定等试验。单向免疫扩散试验是一种稳定、简便、不需要特殊设备、一般试验室都可使用的常规方法。双向免疫扩散试验简单易行结果可靠特异性高分辨率高于对流免疫电泳成本低廉结果可经染色干燥后长期保存缺点是敏感性较低、扩散缓慢不能精确定量。免疫浊度法快速、敏感最小检出量可达ng水平。检测范围广缺点是所用抗血清质量要求高仪器须装电脑价格较贵。絮状沉淀试验较实用、简便、不需要特殊设备一般试验室都可使用但须稀释标本比较麻烦。放射免疫分析技术有何应用?答:放射免疫技术由于其测定的灵敏度高特异性强精密度好而且可对半抗原和抗原测定以及测定仪器设备条件要求不高因此广泛用于生物医学检验。常用于各种激素、微量半抗原、肿瘤标志物、药物等微量物质的测定。由于大多数检验项目均有RIA或IRMA试剂盒供应目前仍是基层单位对超微量物质测定的主要手段。试述放射免疫分析与免疫放射分析。答:放射免疫分析(RIA)是放射免疫技术最经典的模式。它是以放射性核素标记抗原与反应系统中未标记抗原竞争性结合特异性抗体为基本原理来测定待检样品中抗原量的一种分析方法。而免疫放射分析(IRMA)是用放射性核素标记的过量抗体与待检测抗原直接结合采用固相免疫吸附载体分离结合与游离标记抗体的非竞争性放射免疫分析。二者的异同点如下:标记物RIA以放射性核素标记抗原IRMA则是标记抗体。反应速率IRMA反应速度比RIA快。反应原理RIA为竞争抑制性结合反应参数与待检抗原量成反相关IRMA为非竞争结合反应参数与待检抗原成正相关。特异性IRMA特异性较RIA高。灵敏度和检测范围IRMA测定的灵敏度明显高于RIAIRMA标准曲线工作范围较RIA宽~个数量级。其他RIA所用抗体为多克隆抗体对亲和力和特异性要求较高但用量很少IRMA为试剂过量的反应对抗体亲和力的要求不及RIA但用量大。此外RIA可以测量半抗原但IRMA只能测定至少有两个以上表位的抗原。试述用于标记的荧光素应具备什么条件DA用于标记的荧光素应符合以下要求:应具有能与蛋白质分子形成共价键的化学基团结合后不易解离而未结合者易清除荧光效率高与蛋白质结合后仍能保持较高的荧光效率荧光色泽与背景组织的色泽对比鲜明与蛋白质结合后不影响蛋白质原有的生化与免疫学性质标记方法简单、安全无毒与蛋白质的结合物稳定易于保存。试述荧光免疫显微技术基本原理。DA荧光免疫显微技术是以荧光显微镜为检测工具用荧光素标记特异性抗体或抗抗体检测固定组织细胞上的抗原或血清中的抗体常用于定性和定位检查的一门技术。试述荧光免疫显微技术的临床应用。DA临床常应用于:血清中自身抗体的检测各种微生物的快速检查和鉴定寄生虫感染的诊断白细胞分化抗原的检测。时间分辨荧光免疫测定法具有哪些优点DA时间分辨荧光免疫测定法具有特异性强灵敏度高标准曲线范围宽分析速度快标记物制备较简便、有效使用期长无放射性污染等优点因此是很有发展前途的超微量物质免疫分析技术。目前临床检验中常用的荧光物质有哪些?DA目前临床检验中常用的荧光物质有:四乙基罗丹明、异硫氰酸荧光素、四甲基异硫氰酸罗丹明、Eu的螯合物等。简述荧光抗体的制备及纯化方法。DA荧光抗体的制备方法纯化方法有透析法、凝胶过滤法、有撑搅拌法及透析法。荧光抗体技术有哪些优缺点在临床上有哪些应用?荧光抗体技术的优点:()能做到快速、敏感、定位。()Ag和Ab的特异性与形态的检查结合在一起缺点:对组织细胞进行微细结构的观察做不到标本不能永久保存荧光有自然消退现象需及时观察及对照相有非特异性荧光的干扰。荧光抗体技术的应用:病毒学方面:病毒鉴定和病毒在感染cell内的定位寄生虫学方面:用于寄生虫的诊断(鉴定、分型)免疫学方面:研究、用于自身免疫病的诊断细菌学方面:菌种鉴定和Ag结构的研究。用于标记的酶应符合哪些要求DA()酶活性高能对低浓度底物产生较高的催化反应率。()具有可与抗原、抗体共价结合的基团标记后酶活性保持稳定而且不影响标记抗原与抗体的免疫反应性。()酶催化底物后产生的信号产物易于判定或测量且方法简单、敏感和重复性好。()酶活性不受样品中其他成分(内源性酶、抑制物)的影响用于均相酶免疫测定的酶还要求当抗体与酶标抗原结合后酶活性可出现抑制或激活。()酶、辅助因子及其底物均对人体无危害理化性质稳定且价廉易得。简述酶免疫技术的分类。DA()酶免疫技术按实际用途分为酶免疫组化和酶免疫测定两大类。()按抗原抗体反应后是否需将结合的和游离的酶标记物分离分为均相酶免疫测定和异相酶免疫测定异相酶免疫测定又可分为固相酶免疫测定和液相酶免疫测定。简述均相酶免疫测定的原理。DA酶标抗原(AgE)与Ab结合形成AbAgE后其中的酶(E)活性将减弱或增强。因此不需对反应液中的AbAgE和AgE进行分离直接测定反应系统中总酶活性的变化即可推算出被测样品中Ag的含量。简述双抗体夹心法的原理。DA连接于固相载体上的抗体和酶标抗体与待检抗原上两个不同的抗原决定基结合形成固相抗体一抗原一酶标抗体复合物。由于反应系统中固相抗体和酶标抗体的量相对于待检抗原是过量的因此复合物的形成量与待检抗原的含量成正比。测定复合物中酶作用于加入的底物后生成的有色物质量即可确定待检抗原含量。斑点ELISA有哪些优点DA()NC膜吸附蛋白力强微量抗原吸附完全故检出灵敏度可较普通的EusA高~倍()试剂用量较EusA省倍()操作简便试验及结果判断不需特殊设备条件()吸附抗原(抗体)或已有结果的NC膜可长期保存(可达半年)。简述ELISA的基本原理、方法类型及应用。DA()基本原理:抗原或抗体预先结合到某种固相载体表面测定时将受检样品(含待测抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按一定程序与结合在固相载体上的抗原或抗体起反应形成抗原或抗体复合物反应终止时固相载体上酶标抗原或抗体被结合量(免疫复合物)即与标本中待检抗体或抗原的量成一定比例经洗涤去除反应液中其他物质加入底物进行显色最后通过定性或定量分析有色产物量即可确定样品中待测物质含量。()方法类型及应用:双抗体夹心法:用于检测抗原适用于检测两个或两个以上抗原决定基的多价抗原间接法:用于检测抗体竞争法:用于抗原和半抗原的定量测定也可对抗体进行测定捕获法:用于血清中某种抗体亚型成分(如IgM)的测定。简述酶增强免疫测定技术的原理。DA具抗原及酶活性的AgE与Ab结合形成AgAb后所标的酶(E)因与Ab接触紧密空间位阻影响了酶的活性中心酶活性受到抑制。加入未标记抗原(标准或样品中的Ag)后Ag即与Ab叫竞争结合反应系统中限量的Ab形成AgAb复合物从而使反应液中AgAb*(酶活性被抑制)的比例减少具酶活性的游离AgE增多。最终测得的酶活性随着反应体系中未标记抗原(Ag)浓度升高而增强。简述免疫印迹法的原理。免疫印迹法由SDSPAGE、蛋白质转印和酶免疫测定三项技术结合而成。抗原等蛋白样品经SDS处理后带负电荷SDSPAGE时从阴极向阳极泳动分子量小者泳动速度快将凝胶中已经分离的蛋白质条带在电场作用下转移至硝酸纤维素膜上将印有蛋白质条带的硝酸纤维素膜依次与特异性抗体和酶标第二抗体作用加入能形成不溶性显色物的酶反应底物使区带染色根据电泳时加入的分子量标准可确定各组分的分子量。何谓金免疫测定技术简述其技术类型及原理。DA金免疫测定技术是指用胶体金颗粒作为标记物进行抗原抗体反应的一类免疫学测定技术其主要技术类型有斑点金免疫渗滤试验和斑点金免疫层析试验。)斑点金免疫渗滤试验:在以硝酸纤维素膜为载体并包被了抗原或抗体的渗滤装置中依次滴加标本、免疫金及洗涤液因微孔滤膜贴置于吸水材料上故溶液流经渗滤装置时与膜上的抗原或抗体快速结合并起到浓缩作用达到快速检测目的阳性反应在膜上呈现红色斑点。)斑点金免疫层析试验:是将胶体金标记技术和蛋白质层析技术相合的以硝酸纤维素膜为载体的固相膜免疫分析技术滴加在膜一端的标本溶液受载体膜的毛细管作用向另一端移动犹如层析一般在移动过程中被分析物与固定于载体膜上某一区域的抗体或抗原结合而被固相化无关物则越过该区域而被分离然后通过胶体金的呈色条带来判读实验结果。免疫溶血试验的原理和用途。DA原理是补体能使已被抗体致敏了的红细胞发生溶血。免疫溶血试验所参与的成分有补体抗原(SRBC)及抗体(溶血素)这三种成分中如有两种是已知的就可测知第三个成分稀释该成分可测定其效价或含量。如溶血素的滴定溶血空斑试验CH试验补体结合试验抗补体试验等。如何进行补体单个成分的测定DA补体单个成分可测其溶血活性或含量。测定溶血活性应先制备缺乏该补体单个成分的“补体试剂"。而后利用免疫溶血试验的原理将致敏红细胞与“补体试剂”混合再加入待测血清孵育后溶血程度与待测血清中的该补体成分的溶血功能有关。测定含量可用已知抗体以单向琼脂扩散等方法进行。血清免疫球蛋白测定方法有那些?答:单向免疫扩散法:原理优点:简单条件要求低但抗体需要高效价高特异性灵敏度:mgml免疫比浊法:原理优点:检测结果准确精密度高耗时短灵敏度高ugml免疫球蛋白IgG、IgA、IgM测定有何意义?答:IgG、IgA、IgM均升高则慢性疾病IgG升高则多为细菌感染导致新生儿血清IgM升高则常为宫内感染。单一Ig显著升高则多为免疫增殖病:多发性骨髓瘤重链病、恶性淋巴瘤。Ig降低则体液免疫缺陷或联合免疫缺陷。某患者临床疑为细胞免疫功能缺陷应做哪些检查以协助诊断?答:从以下几个方面检测)皮肤试验显示有迟发超敏反应能力表示受试验者细胞免疫功能完善)T细胞及其亚群检测常采用荧光抗体检测T细胞表面标志分子CDCD等)T细胞功能检测利用PHA刺激淋巴细胞增殖转化来判断T细胞的功能简述原发性吞噬细胞缺陷病的发病机制主要包括哪几种?主要包括:吞噬细胞趋化和(或)粘附功能障碍。吞噬和杀菌功能障碍。单核吞噬细胞的特殊异常如IgGFc受体缺陷。简述AIDS的主要免疫学特征?免疫系统的CDT淋巴细胞受HIV感染使CDT细胞受损而减少。单核巨噬细胞、滤泡树突状细胞和朗格汉斯细胞亦可受HIV感染而受损。进行性细胞免疫缺陷继而体液免疫缺陷。B淋巴细胞可克隆激活伴免疫球蛋白增多。简述体液免疫缺陷的检测方法?有血清Ig的测定常用免疫扩散法和免疫比浊法。分泌型IgA的测定用单向免疫扩散或ELISA等。同种血细胞凝集素测定。特异性抗体产生能力测定疫苗接种后抗体产生的测定。抗IgA抗体的测定测自身抗体。SmIg测定检测B细胞数量和其成熟程简述细胞免疫缺陷的检测方法?有迟发性皮肤过敏反应试验常为初筛试验。T细胞及其亚群的检测为主要的试验测定CD、CD、CD分化抗原进行分类鉴定。E玫瑰花结试验现常用CD测定所代替。淋巴细胞增殖反应试验为体外免疫功能试验方法有形态法和同位素法。T细胞分泌产物功能测定测定激活的T细胞和单个核细胞分泌的细胞因子。简述IDD的共同临床特点?对病原体的易感性强、常发生反复感染、严重感染难以治愈。T细胞缺陷易发生病毒真菌和寄生虫感染。余缺陷病易发生细菌感染尤以化脓感染为主。易发生恶性肿瘤和并发自身免疫病。临床表现和病理损伤有明显的多样性症状各异复杂多样主要是累及多系统和多器官所致。简述IDD的常见发病原因?遗传基因异常常表现为X连锁隐性遗传和常染色体隐性遗传显性遗传亦有少见。中枢免疫器官发育障碍由遗传或其他原因所致。免疫细胞内在酶的缺陷如ADA、PNP、GPD缺乏所致。免疫细胞间调控机制异常辅助不足或抑制过剩均可导致免疫缺陷。简述原发性B细胞缺陷病的主要免疫学和临床特征?本组疾病有三种主要免疫学和临床特征:全部Ig缺失或极度降低如Bruton综合征。部分Ig缺失如选择性Ig缺陷。Ig量正常但在抗原刺激后无免疫应答功能缺陷。叙述AIDS三大标志的主要免疫学检测?AIDS检测主要是病毒标志、免疫标志和相关标志三大类。病毒标志主要是直接分离培养检测病毒或检出HIV组分P、gp和gp的免疫印迹检测免疫标志主要是检测HIV的抗原或抗体及T细胞HIV抗体用ELISA测定为初筛试验确认试验用免疫印迹法亦可用PCR法。我国判定标准为:HIV抗体阳性:至少有两条膜(gpgpgp)或至少有一条膜带与P带同时测定HIV抗体阴性:无HIV抗体特异性条带出现HIV抗体可疑:出现特异性抗体带但带型不足以确认阳性者T细胞检测减少常<L。CDT细胞绝对值下降至(~)LCDCD比值<还有Ig、免疫复合物等测定相关标志是指与HIV感染、AIDS病情有关的检测如有关微生物检测、白细胞、ESR等。叙述AIDS的主要发病机制?AIDS的主要发病机制:HIV感染后主要是损伤CDT细胞减少和功能缺陷而导致机体细胞免疫功能继而体液免疫功能全面障碍为其主要的发病机制。同时还损伤巨噬细胞、树突状细胞、B细胞和脑组织小胶质细胞导致相应的功能障碍。HIV损伤T细胞是通过HIV外膜蛋白gp和gp与T细胞发生拈附、溶解、使病毒核心进入靶细胞在靶细胞内进行复制繁殖最后以芽生方式破坏细胞膜而移出进行感染扩散从而破坏CDT细胞导致免疫缺陷。论述流式细胞术在免疫学中的应用。淋巴细胞及其亚型的分析淋巴细胞功能的分析淋巴造血系统及白血病免疫分型肿瘤耐药基因分析AIDS检测中的应用自身免疫病相关HLA分析移值免疫中的应用何谓重链病?重链病是由于浆细胞发生突变和异常增生致使血清和尿中出现大量游离的无免疫功能的免疫球蛋白重链所导致的疾病。何谓轻链病?轻链病是突变的单克隆浆细胞产生的大量轻链血浆中轻链含量异常增加增加的轻链从肾脏排泄血和尿中可查及大量的轻链蛋白。何谓免疫球蛋白异常增生性疾病?免疫球蛋白异常增生性疾病是指由于浆细胞的异常增殖而导致的免疫球蛋白异常增生造成机体病理损伤的一组疾病。何谓浆细胞异常增殖?浆细胞异常增殖通常是指单克隆浆细胞异常增生并伴有单克隆免疫球蛋白或其多肽链亚单位合成异常。何谓ANA简述荧光免疫组化法(间接法)检测血清总ANA的原理。ANA即抗核抗体指各种成分的抗体是一种广泛存在的自身抗体可与不同的细胞核反应无器官特异性和种属特异性间接法检测ANA原理:用小鼠肝切片或印片或HEP细胞作为细胞核基质抗原加待测血清若含有ANA则与细胞核基质抗原反应再加荧光素标记的抗抗体(二抗)结合一抗在荧光显微镜下见到细胞核有荧光着色为阳性反应。ANA有哪些种类它们在SLE诊断中的价值如何?答:抗核抗体是一种广泛存在的自身抗体主要包括抗DNP抗体抗DNA抗体抗ENA抗体抗组蛋白抗体。约(~)的活动期SLE病人ANA阳性ANA阴性几乎可除外SLE的诊断。你知道哪些自身抗体临床应用价值如何?答:)ANA:在未经治疗的SLE患者中阳性率可达以上其他自身免疫病也可阳性。可作为自身免疫病尤其是SLE的筛选指标。)抗Sm抗体:SLE的特征性标志抗体是SLE重要诊断指标。)抗dsDNA抗体:SLE的特征性标志抗体是SLE重要诊断指试述自身免疫病的防治原则。答:自身免疫病的防治原则大致为:()预防和控制病原体的感染避免因自身组织细胞的抗原性发生改变和交叉抗原诱发的免疫应答同时也避免感染引起的抗原提呈细胞和T细胞的激活。()使用免疫抑制剂如环孢霉素A、FK、皮质激素、中药雷公藤治疗主要以抗体引起的自身免疫病用Th因子治疗主要以T细胞引起的身身免疫病。()特异性抗体治疗如用抗CD单抗抗炎症性细胞因子单抗等。()疫苗激发免疫耐受。如口服II型胶原等自身预防和治疗类风温关节炎等试述系统性红斑狼疮自身抗体的检测。答:疾病诊断相关的主要自身抗体:.抗核抗体.抗DNA抗体.抗磷脂抗体和抗血小板抗体.抗红细胞抗体.RF.抗细胞质抗体自身免疫病的共同特征。多数病因不明有遗传倾向患者以女性居多并随年龄增加发病率有所增加患者血清中游多种自身抗体或自身反应致敏淋巴细胞存在疾病有重叠现象病程一般较长多迁延为慢性病损局部可发现淋巴细胞浆细胞中性粒细胞等浸润免疫抑制剂治疗可取的一定疗效。简单叙述Ⅰ型超敏反应的特点。答:Ⅰ型超敏反应的特点是:具有明显的个体差异和遗传背景反应发生快几秒至几十分钟内出现症状恢复也较迅速由结合在肥大细胞和嗜碱粒细胞上的IgE抗体所介导通常反应发生后效应器官出现功能紊乱而没有严重的组织细胞损伤补体不参与该反应。I型超敏反应的免疫学检验方法有哪些?)皮试检测变应原。)免疫球蛋白检测:总IgE和特异性IgE。)嗜碱性粒细胞和嗜酸性粒细胞检测。以血型不合引起的输血反应为例简述Ⅱ型超敏反应靶细胞损伤机制。答:抗ABO血型抗体多为IgM型(分)当血型不合进行输血时血型抗体可与红细胞表面相应的血型抗原物质结合(分)通过三个机制溶解红细胞:抗体和补体介导的红细胞溶解(分)免疫调理作用(分)ADCC作用试述III型超敏反应发生机制。答:III型超敏反应IC沉积引起组织损伤的机制如下:()激活补体 IC沉积可激活补体产生Ca、Ca等过敏毒素使趋化至局部的肥大细胞、嗜碱粒细胞脱颗粒释放组胺等活性介质造成血管通透性增加、渗出和局部水肿。同时吸引中性粒细胞聚集于IC沉积的部位。()中性粒细胞浸润 趋化至IC沉积部位的中性粒细胞在吞噬IC时释放多种溶酶体酶使血管基底膜和周围组织细胞民生损伤造成以上中性细胞浸润为主的炎症。()血小板活化 IC和Cb可使血小板在局部聚集并活化释放血管活性胺类物质使血管扩张、通盘性增加、加剧局部渗出和水肿并激活凝血系统形成微血栓造成局部组织缺血、出血和坏死。Rh血型不符引起的新生儿溶血症属于哪一种类型的超敏反应性疾病试述其发生机制。答:()Rh血型不符引起的新生儿溶血症为型Ⅱ超敏反应性疾病。()Rh血型不符引起的新生儿溶血症发生于Rh一母亲所怀的Rh+胎儿尤其多见于再次妊娠所分娩的新生儿。当首次妊娠分娩时胎儿的Rh+红细胞可进入母体剌激母体产生抗Rh抗体。当再次妊娠仍为Rh+胎儿时母体产生的抗Rh抗体(IgG)即可通过胎盘进入胎儿体内与胎儿Rh+红细胞结合导致胎儿红细胞的破坏。从而引起流产或出生后的严重溶血现象甚至死亡。试述Ⅰ型超敏反应的发生机制答:Ⅰ型超敏反应的发生机制:Ⅰ型超敏反应是由于变应原再次进入体内后引发的超敏反应其发生通常分三个阶段:()致敏阶段在此阶段变应原进入机体刺激机体特异的B淋巴细胞使其增殖分化为浆细胞浆细胞分泌产生针对特异变应原的IgE抗体此抗体吸附于肥大细胞和嗜碱性粒细胞上使机体处于致敏状态。()发敏阶段当有相同变应原再次进入机体时与致敏靶细胞表面的IgEFab段超变区特异性结合触发靶细胞的细胞膜活化使其脱颗粒及合成新的生物活性介质。()效应阶段颗粒中的生物活性介质及新合成的生物活性介质作用于相应的效应器官引起效应器官病理改变单克隆抗体:是指仅识别单一抗原表位的B细胞杂交瘤产生的同源抗体具有特异性强、效价高、生物活性单一、理化性状高度均一等特点。佐剂:是指先于抗原或与抗原一起注入机体能够增强机体对该抗原的免疫应答或改变免疫应答类型的物质。基因工程抗体:是指应用DNA重组及蛋白工程技术对编码抗体的基因按不同的需要进行改造和装配经导人适当的受体细胞后重新表达的抗体主要包括人源化抗体、小分子抗体、双价特异性抗体和抗体融合蛋白等类型。双特异性抗体:又称双功能抗体它不同于天然抗体其两个抗原结合部位具有不同的特异性可以同时与两种不同特异性的抗原发生结合。滴度(效价):血清标本进行一系列倍比稀释后进行反应以出现明显凝集反应的血清最高稀释度、即滴度(效价)。凝集反应:凝集反应是指细菌或红细胞等颗粒性抗原与相应抗体在适当条件下结合形成凝集的现象。现也指颗粒化抗原或抗体与相应抗体或抗原的反应。直接凝集反应:细菌、螺旋体和红细胞等颗粒抗原在适当电解质参与下可直接与相应抗体结合出现凝集称为直接凝集反应。凝集原:指凝集反应中的抗原。凝集素:指凝集反应中的抗体。试管凝集试验:是在试管内颗粒性抗原与相应抗体直接结合在一定条件下会出现肉眼可见的凝集现象。间接凝集反应:将可溶性抗原(或抗体)先吸附于适当大小的颗粒性载体表面然后与相应抗体(或抗原)作用在适宜的电解质存在的条件下出现特异性凝集现象称间接凝集反应或被动凝集反应(passiveagglutinationtest)。沉淀反应:沉淀反应是指可溶性的抗原和抗体特异性结合后所形成的复合物以沉淀的形式出现。凝胶内沉淀试验:又称凝胶扩散是将可溶性抗原与相应抗体分别放人凝胶内进行扩散两者在比例合适的位置形成肉眼可见的沉淀线或沉淀环。免疫电泳:是凝胶电泳和凝胶扩散相结合。在电场作用下位于琼脂凝胶中的抗原样品因各组分的电泳迁移率不同而彼此分开形成不同的区带。电泳结束后在琼脂板中间所挖的长形槽内加人相应的抗血清由于经电泳分离后的各种抗原成分在琼脂中呈放射状扩散而抗体呈直线扩散因而形成的沉淀线多呈弧状。对流免疫电泳:是在电场作用下的免疫双扩散。抗原向阳极移动而抗体向阴极移动在一定时间内相向移动的抗原和抗体在两孔间相遇在浓度比例适当处形成沉淀线。带现象:在抗原抗体特异性反应时生成结合物的量与反应物的浓度有关当抗原与抗体达到最适比时沉淀物形成最多。如果抗原或抗体极度过剩则无沉淀物形成这种现象称为带现象。出现在抗原过量时称为后带。出现在抗体过量时称为前带。放射化学纯度:指单位标记物中结合于被标记物上的放射性占总放射性的百分率一般要求大于。比放射性:指单位化学量标记物中所含的放射性强度也可理解为每分子被标记物平均所挂放射性原子数目常用CigmCimg或Cimmol等单位表示。放射免疫分析:是该类技术最经典的模式。它是以放射核素标记抗原与反应系统中未标记的抗原竞争特异性抗体的基本原理来测定待检样品中抗原量的一种分析法。荧光免疫技术:是将抗原抗体反应的特异性与荧光物质检测的敏感性和直观性结起来的一种免疫分析技术。荧光效率:是指荧光物质将吸收的光能转变成为荧光的百分率。荧光寿命:指荧光物质被一瞬时光脉冲激发后产生的荧光随时间而衰减到一定程度时所用的时间。荧光的淬灭:指荧光分子在某些理化因素作用下、荧光分子的辐射能力受到激发光较长时间的照射后会减弱的现象。荧光素:是能产生荧光并能作为染料使用的有机化合物。荧光抗体:荧光素与特异性抗体以化学共价键的方式结合而成是免疫荧光技术的关键试剂。非均相荧光免疫测定法:在抗原抗体反应后先把Ab*Ag与Ab*分离然后测定Ab*Ag或Ab*中的标记物的量从而推算出标本中的Ag量该方法称非均相荧光免疫测定法。均相荧光免疫测定法:在抗原抗体反应后Ab*Ag中的标记物失去荧光特性则不需进行Ab*Ag与Ab*的分离可以直接测定游离的Ab*量从而推算出标本中的Ag量该方法称为均相荧光免疫测定法。时间分辨荧光免疫测定:时间分辨荧光免疫测定是用镧系稀土元素螯合物(如螯合物)标记抗体或抗原检测标本中的相应抗原或抗体的荧光免疫测定技术酶免疫技术:是指利用酶的高效催化和放大作用与特异性免疫反应结合而建立的一种标记免疫技术。封闭:是指在抗原或抗体包被ELISA板后用%~%牛血清白蛋白或%~%小牛血清等再包被以防止非特异性吸附。异相EIA:是指在酶免疫测定中抗原抗体反应后需分离游离的和与抗原(或抗体)结合形成复合物的酶标记物然后对经酶催化的底物显色程度进行测定再推算出样品中待测抗原(或抗体)的含量。包被:是指将抗原或抗体固相化的过程。均相酶免疫测定:是指抗原抗体反应平衡后无需分离F和B直接根据反应前后酶活性的改变进行待检物质的测定。肿瘤抗原:肿瘤在发生、发展中产生的或过度表达的抗原物质。肿瘤相关抗原:非肿瘤细胞所特有的正常组织或细胞也存在的抗原含量在细胞癌变时明显增高。肿瘤特异性抗原:肿瘤细胞所特有的正常组织或细胞不存在的抗原。封闭因子:一种小分子的多肽,可存在于肿瘤患者的血清中。体外培养时,它可抑制非特异性致有丝分裂因子,如植物血凝素或刀豆素A对淋巴细胞的转化移植(transplantation):指健康细胞、组织或器官从其原部位移植到自体或异体的一定部位、用以代替或补偿机体所丧失的结构和功能的现代医疗手段。移植抗原:代表个体特异性的由MHC编码的HLA是引起排斥反应的同种抗原移植排斥反应(transplantationrejection):针对移植抗原产生的引起移植物功能或受者机体损害的免疫应答。宿主抗移植物反应(hostversusgraftreaction,HVGR):宿主针对供体组织或细胞的HLA抗原产生的移植排斥反应移植物抗宿主反应(graftversushostreaction,GVHR):一定条件下移植物中的过客(免疫)细胞针对移植物产生的排斥反应。免疫缺陷(immunodeficiency):由遗传因素或其他原因导致的免疫系统发育或免疫应答障碍而导致的一种或多种免疫功能不全免疫缺陷病:由免疫缺陷所致的各种临床综合特征的疾病获得性免疫缺陷综合征(AIDS):由HIV感染引起因CDT细胞质和量的缺失导致细胞免疫功能严重缺陷临床上以反复机会感染、恶性肿瘤和中枢神经系统退行性变为主要特征。流式细胞术:是指借助流式细胞仪精确、快速地对生物细胞的理化特性和生物学特性进行多参数定量分析并对特定细胞群体分选的新技术。细胞分选:是指从细胞群体中将选定的细胞分离出来。荧光补偿技术:是指利用已知标准样品或根据细胞样品的生物学意义合理设置各荧光信号之间的相互补偿值。M蛋白:单克隆免疫球蛋白是B淋巴细胞或浆细胞单克隆异常增殖所产生的一种在氨基酸组成及顺序上十分均一的异常单克隆免疫球蛋白冷球蛋白:一组低温下发生沉淀加温后又复溶的Ig。本周蛋白(benceJones):尿中游离的免疫球蛋白轻连。免疫增殖病(immunoproliferativedisease):LC异常增殖引起的疾病重链病(heavychaindisease):突变的浆细胞产生异常增多的重链或质量不能与L链装配的Ig重链血清和尿中H链过剩导致的疾病。轻链病:异常的LC产生大量的Ig的L链在肾脏和内脏组织导致肾损伤和淀粉样病变的疾病。自身免疫机体免疫系统对自身成分发生免疫应答的现象为生理性免疫应答的一部分。自身免疫病(AID)因机体免疫系统对自身成分发生免疫应答而导致的组织损伤或功能紊乱属于病理性免疫应答。抗核抗体(ANA):抗核酸抗原抗体是一组将自身真核细胞的各种成分脱氧核糖核蛋白(DNP)、DNA、可提取的核抗原(ENA)和RNA等作为靶抗原的自身抗体的总称。类风湿因子(RF):自身免疫病人体内表达的抗自身变性IgG的IgM类抗体。隐蔽抗原:指体内在解剖位置上某些与免疫系统隔绝的成分如眼组织、精子等。当外伤、手术和感染等情况下释放并与机体免疫系统接触可以引起免疫应答导致自身免疫病。超敏反应:又称为变态反应是指机体对某些抗原初次应答后再次接受相同抗原刺激时发生的一种以机体生理功能紊乱或组织细胞损伤为主的特异性免疫应答。变应原:是指能够选择性地激活CD+Th细胞及B细胞诱导产生特异性IgE抗体应答引起变态反应的抗原性物质。皮试:用少量抗原注射、挑刺或划痕等方法注入到受试者皮肤用于变应原的检测。免疫防御功能异常可导致(感染)和(免疫缺陷)疾病。抗原抗体反应的特点有特异性、比例性、可逆性抗原抗体反应的温度一般以~为宜最适温度.影响抗原抗体反应的环境因素主要有电解质、pH、温度.某些特殊的抗原抗体反应对温度有一些特殊的要求如冷凝集素在左右与红细胞结合最好%以上反而解离。.抗原抗体的结合分子间的引力包括静电引力、范德华引力、氢键引力和疏水作用力间接凝集反应的类型包括正向间接凝集、反应反向间接凝集反应、间接凝集抑制反应和协同凝集反应四种类型。参与凝集反应中的抗原称为(凝集原)抗体称为(凝集素)试验有(玻片法)(试管法)(玻片法)常用的直接凝集.在间接凝集反应中正向凝集反应是用(抗原)致敏载体以检测标本中相应的(抗体)而反向间接凝集反应是用(抗体)致敏载体以检测标本中相应(抗原).间接抗球蛋白试验可用已知抗原型红细胞检测血清中的(不完全抗体)可用于输血前的(交叉配血)试验。.免疫沉淀反应是(可溶性抗原)与(相应抗体)特异性结合.棋盘格法(抗原)和(抗体)同时稀释可一次完成(抗原)和(抗体)的滴定.单向琼脂扩散是待测抗原从含有定量(抗体)的(凝胶)内自由向周围扩散抗原抗体特异性结合在两者比例合适的部位形成(沉淀环)。.Maneini曲线适用于大分子抗原的测定在一定范围内沉淀环随时间延长而扩大抗原浓度与(扩散环直径的平方)呈线性关系常用(普通)坐标纸作图。.Fahey曲线适用于小分子抗原的测定在一定范围内沉淀环随时间延长而扩大沉淀环直径与(抗原浓度的对数)呈线性关系常用(半对数)坐标纸作图。双向琼脂扩散试验可对抗原或抗体的存在、含量和相对分子量进行分析沉淀线靠近抗原孔指示(抗体含量)较大靠近抗体孔则指示(抗原含量较高)不出现沉淀线则表明(无对应的抗原和抗体)免疫电泳是将(电泳)与(双向免疫扩散)相结合的一种免疫化学分析技术。火箭电泳是(电泳)与(单向免疫扩散)相结合的免疫技术。对流免疫电泳是(电泳)与(双向免疫扩散)相结合的免疫技术。对流免疫电泳中抗体流向负极是因为(抗体分子量大)(电泳)速度小(电渗)速度。l免疫浊度测定的基本原理是抗原抗体在特殊缓冲液中快速形成(免疫复合物)使反应液出现(浊度)并可根据其推算出抗原或抗体的量。根据Rayleigh方程散射比浊法中的散射光强度与入射光波长成(反)比与粒子的浓度和体积成(正)比。速率散射比浊法是测定单位时间内免疫复合物形成的(最快时间段)的散射信号值此时的散射信号最强速率散射信号值最大。免疫胶乳浊度测定的原理与透射比浊法相似。载体为大小适中、均匀的胶乳颗粒其直径应稍(小于)入射光波长目前多用()nm的胶乳颗粒。免疫浊度测定的基本原则之一是反应体系中必须始终保持(抗体)过量。凝胶内沉淀试验包括(单向扩散试验)和(双向扩散试验)抗原抗体最适比的基本测定方法为(抗原稀释法)和(抗体稀释法)。.标记免疫技术的示踪物有(酶)、(放射性核素)、(荧光素)、(化学或生物发光剂)(胶体金).放射免疫技术可分为(放射免疫分析)和(免疫放射分析)两种基

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