银杏叶总黄酮脉冲缓释胶囊体外释放度实验研究_鄂蕴娟

收稿日期: 2009- 07- 27 作者简介:鄂蕴娟 ( 1959- ) ,女, 辽宁大连人,主任药师,主要从事 中药新药开发研究。 而欧前胡素为白芷的主要有效成分之一,含量较高且比较 稳定,以其作为指标能较好的反映暖脐膏的质量和疗效,试 验中也曾以当归中的阿魏酸、乌药中的乌药醚内酯为检测 指标,效果都不是很好, 因此最后确定以欧前胡素来作为优 选提取 工艺 钢结构制作工艺流程车尿素生产工艺流程自动玻璃钢生产工艺2工艺纪律检查制度q345焊接工艺规程 的定量 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 。 在色谱条件选择过程中, 曾以甲醇 -水为流动相,但测 定结果提取液中欧前胡素的含量远远大于白芷药材中欧前 胡素的含量,提示可能有干扰峰存在,经验证发现是由于暖 脐膏处方中当归的成分也在相同时间出峰, 因此不能采用 甲醇 -水流动相,故参考文献中以乙腈 -水为流动相,欧前 胡素分离效果好,阴性无干扰 ,最终选定流动相为乙腈 -水 ( 48 B52) [ 5- 6]。 在提取时间的选择中, 曾做过以提取倍数为 8倍量的 溶剂,提取浓度为 75%的醇浓度,提取次数为 3次, 考察提 取时间分别为 1h /次、1. 5h /次、2 h /次对提取效果的影响, 结果见 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 6。从表 6可以看出, 提取时间对偶前胡素的含 量以及干膏量影响很小, 综合 分析 定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析 后确定以 1h为每次提取 的时间。 实验中对处方的生产工艺进行了系统的考察: 在选定 表 6 不同提取时间对欧前胡素含量的影响 批次 提取时间 ( h ) 欧前胡素 ( mg) 干膏量 ( g) 1 2 3 平均值 RSD% 1 1. 5 2 ) ) 8. 615 8. 690 8. 674 8. 660 0. 46% 14. 538 14. 495 14. 620 14. 551 0. 44% 醇提法后 ,通过正交试验, 以干膏量和欧前胡素含量为考察 指标,对影响提取的主要因素溶媒用量、提取次数、乙醇浓 度和提取时间进行了考察,来选取最佳的提取工艺。最终 确定提取工艺为加 8倍量 75%的乙醇,提取 3次, 1h /次。 参考文献 [ 1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典 # 一部 [ S ]. 北京:化 学工业出版社, 2005: 69, 645. [ 2] 张涵庆.杭白芷根化学成分的研究 [ J] .药学 通报 工作完成情况通报公司开除员工通报员工辞退通报事故处理决定的通报监督检查情况通报 , 1980, 15 ( 9) : 386- 388. [ 3] 周继铭.白芷的研究 V.化学成分的研究 [ J] . 中草药, 1987, 18 ( 6) : 242- 246. [ 4] 梁明金,杨广德, 贺浪冲.白芷中欧前胡素的提取方法研究 [ J].中成药, 2000, 22 ( 12) : 829- 831. [ 5] 谭生建,狄海涛. RP- HPLC测定清眩丸中欧前胡素的含量 [ J].药物分析杂志, 1999, 19( 3) : 177- 178. [ 6] 马开,秦文杰. HPLC测定痛可停胶囊中欧前胡素和异欧前胡 素含量 [ J].中成药, 2003, 25( 10) : 801- 803. 第 27卷 第 12期 2 0 09年 12月 中 华 中 医 药 学 刊 CH INESE ARCH IVES OF TRAD IT IONAL CH INESE MED IC INE Vo.l 27 N o. 12 Dec. 2 0 0 9 中华中医药 2669 学刊 银杏叶总黄酮脉冲缓释胶囊体外释放度实验研究 鄂蕴娟,赵令竹,龙沛霞 (辽宁中医药大学,辽宁 沈阳 110032) 摘 要:通过建立了银杏总黄酮缓释胶囊体外释放度测定方法,确定该胶囊体外释放度测定条件为: 0. 2%吐 温 80的 2%盐酸溶液为溶剂,转速为每分钟 50转, 2h后向操作容器中补加磷酸盐缓冲液调节 pH值至 5. 8, 4h后 加磷酸盐缓冲液调节 pH至 7. 0;共计测定 5批样品 8h内银杏总黄酮释放量。规定本品每粒在 2h、4h与 8h银杏 总黄酮的释放量应为样品实测量的 15% ~ 45%、45% ~ 75%和 70%以上。 关键词:银杏叶总黄酮;缓释; 体外释放度 中图分类号: R285. 5 文献标识码: A 文章编号: 1673- 7717( 2009) 12- 2669- 02 Exper imentalResearch on the Release Degree in V itro of Pulse Sustained- Re lease Capsules of Total F lavonoids of G inkgo B iloba Leaf E Yun- juan, ZHAO L ing-zhu, LONG Pe-i x ia ( L iaon ing Un iversity ofT rad itional Ch inese M ed icine, Shenyang 110032, L iaon ing, Ch ina) Abstrac t: In th is paper, w e have estab lished a m e thod of to tal flavono ids o f G inkgo b iloba in v itro release o f sus- ta ined- release capsu le, a com firm a tive m ethod o f de term ine conditions of capsu le release in v itro: 0. 2% tw een 80 of 2% hydrochloric ac id as the so lvent, speed 50 perm inute, re info rced the phospha te bu ffer added to the operation o f con- ta iner a fter 2 hours and adjusted pH va lue to 5. 8, put in the phosphate buffer a fter 4 hours and ad justed pH va lue to 7. 0; determ ined 5 approved sam ple in tota l o f flavono ids of G inkgo b iloba release am ount in 8 hours. De fined any p ill to ta l fla- vono ids o f G inkgo release amoun t wh ich m easured up to 15% ~ 45% , 45% ~ 75% and 70% above of the sam ple fact measured a t 2 hour, 4 hour and 8 hour. Keyw ords: tota l flavono ids of G inkgo biloba; susta ined- re lease; release deg ree in v itro 2669 第 27卷 第 12期 2 0 09年 12月 中 华 中 医 药 学 刊 CH INESE ARCH IVES OF TRAD IT IONAL CH INESE MED IC INE Vo.l 27 N o. 12 Dec. 2 0 0 9 中华中医药 2670 学刊 银杏叶提取物 ( EGb)及其制剂已成为国内外预防和 治疗心脑血管疾病广泛应用的天然药物,其主要有效成分 为黄酮类和内酯类化合物。本文对银杏总黄酮脉冲缓释胶 囊体外释放度试验方法进行系统研究, 用以控制其产品质 量。 1 仪器与试药 岛津 UV260分光光度仪; ZRS- 12G溶出试验仪;银杏 叶总黄酮脉冲缓释胶囊 (辽宁省中医药研究院药学实验室 提供 ); 芦丁对照品由中国药品生物制品检定所提供批号 200206供含量测定用; 吐温 - 80、乙醇、亚硝酸钠、氢氧化 钠、盐酸、磷酸氢二钾等均为分析纯。 2 实验方法及结果 2. 1 介质中总黄酮含量测定方法确定 2. 1. 1 芦丁对照品溶液配制 精密称取在 120e 减压干 燥至恒重的芦丁对照品 20m g,置 100mL量瓶中, 加 60%乙 醇适量,超声使溶解 ,放冷,用 60%乙醇稀释至刻度, 摇匀, 精密量取 25mL, 置 50mL量瓶中, 加水稀释至刻度, 摇匀, 即得 (每 1mL含无水芦丁 0. 1mg ). 2. 1. 2 供试品溶液配制 取本品速溶微丸 0. 5g, 加入 0. 2%吐温 80的 2% 盐酸溶液 500mL, 超声提取 30m in, 离 心,取上清液, 既得。 2. 1. 3 溶液中总黄酮含量测定 精密吸取芦丁对照品溶 液 1. 0、2. 0、3. 0、4. 0和 5. 0mL, 分别置 10mL量瓶中, 各加 含 2% 盐酸的 30%乙醇溶液使成 5. 0mL, 精密加亚硝酸钠 溶液 ( 1y 20) 0. 3mL摇匀,放置 6m in,再加硝酸铝溶液 ( 1y 10) 0. 3mL, 摇匀,放置 6m in, 加氢氧化钠试液 4. 0mL, 再加 水至刻度,摇匀, 放置 15m in, 在 510nm波长处测定吸收度, 以吸收度为纵坐标, 浓度为横坐标,绘制标准曲线。芦丁标 准曲线方程为: C= 622. 71 @A– 0. 095, r = 0. 9995。 精密吸取供试品溶液适量, 称定重量, 水浴回流水解 2h,称定重量, 加水补足减失重量, 精密吸取 2mL, 按标准 曲线项下实验方法测定吸收度。从标准曲线上读出供试品 溶液中芦丁的重量 (Lg) ,计算总黄酮含量。 2. 2 溶出介质对不同包衣微丸总黄酮释放度影响 参照中国药典 2005年版规定, 分别以水、人工胃液、人 工肠液、0. 1% 吐温 80的 2% 盐酸溶液、0. 2% 吐温 80的 2%盐酸溶液、0. 3%吐温 80的 2%盐酸、高浓度的磷酸盐 缓冲液 (称取磷酸氢二钾 K2HPO4# 3H2O 10g、NaOH 4g加 蒸馏水 100mL搅拌使溶解,即得 )调 pH 5. 8的0. 2%吐温 80 的 2%盐酸溶液、高浓度的磷酸盐缓冲液调 PH 7. 0的 0. 2% 吐温 80的 2%盐酸溶液各 500 mL为介质, 转速 50 r/m in,考 察不同包衣微丸释放度, 平行 12份, 在 1、2、3、4、6h时, 每 次取样 5mL,同时补加相应介质 5 mL,测定总黄酮含量,分 别计算不同包衣微丸在不同时间的释药量。其在不同介质 中的释放度见表 1~ 3。 表 1 LE包衣微丸在不同介质中释放度 (% ) 水 人工胃液 人工肠液 0. 1%吐温 0. 2% 吐温 0. 3% 吐温 pH5. 8 介质 pH7. 0 介质 1 49. 2 53. 4 65. 2 76. 4 89. 2 90. 5 85. 6 88. 5 2 54. 3 57. 5 67. 9 79. 5 96. 8 93. 1 94. 1 98. 1 3 63. 6 62. 7 66. 4 83. 6 94. 7 97. 4 96. 3 94. 5 4 65. 7 59. 6 68. 2 85. 9 97. 2 95. 2 94. 7 93. 6 6 64. 5 64. 1 69. 3 90. 5 96. 1 98. 8 99. 2 96. 2 表 2 Eudrag it L- 30D55包衣微丸在不同介质中释放度 (% ) 水 人工胃液 人工肠液 0. 1%吐温 0. 2% 吐温 0. 3% 吐温 pH5. 8 介质 pH 7. 0 介质 1 2. 7 4. 6 45. 7 6. 2 7. 2 7. 4 94. 8 89. 2 2 3. 4 3. 9 43. 8 7. 3 8. 9 6. 9 93. 7 98. 1 3 4. 9 4. 1 56. 4 7. 4 10. 1 10. 7 96. 5 92. 1 4 6. 7 6. 9 59. 7 8. 9 12. 3 9. 9 97. 2 95. 4 6 5. 8 8. 2 62. 1 10. 7 10. 9 10. 7 94. 3 93. 7 表 3 Eudrag it L100和 S100混合 包衣微丸在不同介质中释放度 (% ) 水 人工胃液 人工肠液 0. 1%吐温 0. 2% 吐温 0. 3% 吐温 pH5. 8 介质 pH 7. 0 介质 1 - - 53. 4 - - - 6. 2 94. 6 2 4. 6 - 56. 7 - - - 12. 3 93. 4 3 7. 9 - 59. 2 - - - 14. 6 94. 9 4 9. 4 - 57. 6 - - - 13. 7 92. 8 6 10. 7 - 59. 8 - - - 13. 2 93. 7 2. 3 成品中总黄酮释放度实验研究 分别取本品 5批次样品, 每批次取样品 12粒,以 0. 2% 吐温 80的 2% 盐酸溶液 500mL为溶剂, 转速为每分钟 50 转, 平行 12份,于 2h取溶液 5mL, 滤过,并即时在操作容器 中补充水 5mL, 再向操作容器中补加磷酸盐缓冲液 65 ~ 75mL,调节 pH值至 5. 8,继续连续计时, 在 4h取溶液 5mL, 滤过,并在操作容器中补充水 5mL,再向操作容器中加相同 浓度磷酸盐缓冲液 15~ 25mL,调节 pH 至 7. 0, 并加水使容 器中总容积为 700mL,继续连续计时, 在 8h取溶液 5mL,滤 过, 精密量取上述 2、4、8h的续滤液各适量,照含量测定项下 条件测定续滤液中总黄酮的释放量。其实验结果见表 4。 表 4 不同批次样品总黄酮释放度测定结果 (% ) 060301 060302 060303 060304 060305 2 34. 2 29. 4 25. 7 36. 9 37. 2 4 62. 7 65. 4 54. 8 59. 1 49. 2 6 89. 6 85. 1 92. 3 82. 7 88. 9 3 讨 论 本品内容物中的 3种微丸其释放部位分别在胃、十二 指肠及小肠中下部,根据不同包衣微丸在不同介质中的释 放度实验研究, 确定选用 pH 1. 2、pH 5. 8和 pH 7. 0三种介 质。pH 1. 2的介质用 2%盐酸溶液, 其中加入 0. 2% 的吐温 80; pH 5. 8系在 pH 1. 2释放结束后加高浓度的磷酸盐缓冲 液调节 pH 至 5. 8; pH 5. 8介质中释放结束后再加同浓度磷 酸盐缓冲液调节 pH值至 7. 0, 加水至总容积为 700mL。 本品 5批次样品体外释放度试验结果表明: 以总黄酮 来计,在不同 pH条件下可以达到控制药品释放的目的, 可 以达到人体内缓释效果。同时根据实验测定结果, 限定本 品每粒在 2h、4h与 8h的总黄酮释放量应分别为样品实测 量的 25% ~ 40%、55% ~ 70%和 85%以上。 参考文献 [ 1] 马建民,李宏,王东风,等.中药缓释制剂的研究 [ J] .中成药, 2003, 25( 7 ): 581. 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