初识稀土元素

Dionex 中国有限公司应用研究中心 2002年4月15日 目录 工贸企业有限空间作业目录特种设备作业人员作业种类与目录特种设备作业人员目录1类医疗器械目录高值医用耗材参考目录 1第一章 引言 11. 什么是色谱？ 12. 色谱的发展 13. 液相色谱 3第二章 色谱柱理论 31. 分离度 42. 柱效 53. 传质影响 54. 纵向扩散 65. 溶质传递动力学 66. 选择性 77. 保留特性 78. 总结 8第三章 离子色谱的优点 9第四章 分离模式 91. 离子交换 102. 离子排阻色谱法（ICE） 103. 反相色谱法 114. 离子对 115. 离子抑制 12第五章 检测方法 121. 电化学检测 142. 分光光度检测法 16第六章 抑制作用 20第七章 分离方式和检测方式的选择 231. 分离度的改善 30附 录 30 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 1. 电化学检测器测定的组分 31表2. 用于化学抑制的典型淋洗液 32表3. 常见电化学活性化合物的施加电压 33表4. 常见无机阴离子的紫外线吸收波长 34表5. 国际现行的离子色谱标准分析方法（环境与高纯水分析） 36表6. 离子色谱法中的中国国家标准（GB） 第一章 引言 本文讲述有关离子色谱法的基本知识和分离和检测方面的理论。 1. 什么是色谱？ 色谱法是一种物理化学分析方法。它利用混合物中组分在两相间分配系数的差别，当溶质在两相间作相对移动时，各组分在两相间进行多次分配，从而使各组分得到分离。 2. 色谱的发展 色谱这一概念是由俄国植物学家Tswett（茨维特）1903提出的，他在一根细长的玻璃管中装入碳酸钙粉末，然后将植物绿叶的石油醚萃取液倒入管中，萃取液的色素就被吸附在管上部的碳酸钙上，再用纯净的石油醚洗脱这些被吸附的色素，于是在碳酸钙上形成了一圈一圈的色带，这些色带被称为色谱。 经过许多年的发展，“色谱”一词已涵盖许多技术领域。新型固定相的发展和气体、液体以及超临界流体作为可动相的使用，色谱逐渐成为最为有效的分离分析手段。 本文仅限于离子色谱。不过涉及到的概念与所有其他色谱方法是一样的。 3. 液相色谱 液相色谱一词指使用的流动相是液体的色谱方法。可以分为四类： 1. 反相色谱：固定相为非极性物质（疏水性），流动相为极性溶液（如甲醇或乙腈水溶液）。分离方式基于多次吸附-解吸的重复过程，非极性化合物较极性化合物在柱中具有较强的保留。 2. 正相色谱：固定相是极性物质，流动相是非极性或弱极性的溶液（如正己烷或四氢呋喃），如前所述，分离过程也是基于被分离组分在流动相与固定相之间的分配平衡。 3. 分子排阻色谱：固定相由一些起分子筛作用的多孔材料组成，较大的分子被较快地从色谱柱中洗脱，较小分子则滞留在填充材料的细小孔径中，保留较长的时间。 4. 离子色谱：离子色谱法基于三种分离机理 A. 高效离子交换色谱法（HPIC）：分离是基于发生在流动相和键合在基质上的离子交换基团之间的离子交换过程，也包括部分非离子的相互作用。这种分离方式可用于有机和无机阴离子和阳离子的分离。 B. 高效离子排斥色谱（HPICE）：分离是基于固定相和被分析物之间三种不同的作用-Donnan排斥、空间排斥和吸附作用。这种分离方式主要用于弱的有机和无机酸的分离。 C. 流动相离子色谱法（MPIC）：分离是基于被分析物在分析柱上的吸附作用。分析柱的选择性主要取决于可动相的组成和浓度。流动相除了加入有机改进剂之外，还需加入离子对试剂。这种分离方式可用于表面活性阴离子和阳离子以及过渡金属络和物的分离。 第二章 色谱柱理论 本章将简要描述色谱柱性质的术语和概念。 1. 分离度 任何分离的目标都是使两个相邻的峰完全分开。分离度定义为两个相邻色谱峰的峰中心之间的距离与两峰的平均峰宽的比值。 方程1给出了一个衡量分离好坏的尺度，但它并没有告诉我们如何获得一个较好的分离。为了搞清这个问题，我们将分离度表示为含有3个色谱分离参数的函数，这三个参数分别为柱效、选择性和保留时间，这些参数与固定相和流动相性质有关。 方程2 保留时间 式中， 分离初始，在零时间，样品位于色谱柱的顶端。被分析的样品随流动相进入固定相，样品组分基于对两相亲和力的不同而被分离。一般地讲，固定相与流动相之间化学性质的差别应该足够大，被分析物才能与其中一相发生较强作用。正是由于保留时间的不同，使得分离得已实现。 2. 柱效 柱效是指色谱柱保留某一化合物而不使其扩散的能力，柱效能是一支色谱柱得到窄谱带和改善分离的相对能力。我们可以通过一根柱子的理论塔板数来衡量色谱柱柱的柱效，在色谱柱中，理论塔板数N定义为： 式中，T是色谱峰中心与进样起始点间的距离，W1/2是峰高一半处峰的宽度。 理论塔板是指固定相和流动相之间平衡的理论状态。在一个塔板的平衡完成之后，分析物进入下一个平衡塔板，这种传送过程重复不断，直到分离完全。分子根据自身的性质（分子大小和电荷）进行转移或迁移，基于它们对固定相和流动相的亲和力的不同进行分离。分子移动并形成一条带状，以正态分布（高斯）的色谱峰流出。 理论塔板数可以用于衡量整个色谱系统谱带的扩散程度。谱带扩散程度越小（即色谱峰越窄），理论塔板数N 越大。 理论塔板数N与色谱柱长度成比例；也就是说，色谱柱越长，理论塔板数N 越大。 理论塔板高度HETP一词是单位长度色谱柱效能的量度，可以用于比较不同长度的色谱柱的理论塔板数N。 这个方程表明高效率的色谱柱具有较大的理论塔板数。也就是说，具有较小的理论塔板高度。 影响理论塔板高度的因素有： 1. 多流路 2. 纵向扩散 3. 传质影响 3. 传质影响 传质影响是描述由于柱子装填不均，造成流路分叉而引起的扩散。分析物在色谱柱中的流路受到柱子装填和树脂等许多因素的影响。填料颗粒的直径直接影响柱效。一般来说，粒径越小，分离效率越高。同时，颗粒大小和装填的均匀度越好，柱效也越高。如果一根柱子由大小不均匀的颗粒填充，溶质分子将由于相遇颗粒粒径大小的不同而以不同速度移动。这样造成溶质分子的流出谱带变宽。在一些装填不均匀的柱子中，溶质分子经过一些未填满的空隙或溶质分子或与树脂颗粒的相互作用将导致谱带扩散。因此，提高颗粒的均匀度和减小粒径可以减小谱带的扩散。 4. 纵向扩散 用于描述任何气体和液体扩散或分散的内在趋势。这种情况可以发生在整个色谱系统中的任何地方。最初，在窄的谱带中的溶质分子向周围的溶剂扩散，使谱带变宽。理论上讲，纵向扩散也可以在流动相和在固定相中发生。结果表明，扩散问题在离子色谱填充柱中并不象在气相色谱中那样普遍。 5. 溶质传递动力学 是描述溶质分子在固定相和流动相之间运动的速率。理想状态下，与填充柱作用的溶质分子不断出入固定相中。当分子在固定相中时，分子被保留而位于谱带中央的后面。当分子在流动相中时，由于液体流动速率总是大于谱带的速率，则它的速率总是大于谱带中心的速率。这种在两相之间的随意出入引起谱带扩散。如果不发生流动，溶质分子就会在两相之间达成平衡。正因为存在流动，在流动相中真实的溶质浓度无法与相邻的固定相中浓度达到平衡。色谱峰的扩散可以通过减小不平衡程度和增加交换速率来降低。溶质传递的动力学经常是谱带扩散的主要原因，因此对柱效的影响也是最大的。 6. 选择性 是交换过程的一个热力学函数。色谱柱的选择性是两个化合物的调整保留时间的比值，也等于两个化合物在固定相和流动相之间平衡常数的比值。 其中T2 和T1是两峰峰中心与进样点的时间差值，T0是死体积保留时间。当保留时间的比值等于1时，没有任何分离度或或称共洗脱。选择性越好或比值越大，对于两个化合物的分离越容易。公式中相对较小的改变，就会使分离度发生较大的改变。较高选择性可以在柱效相对较低的柱子上得到较好的分离。一般来说，流速和柱压的改变，对选择性没有影响。 7. 保留特性 用容量因子k’描述化合物保留性质，其定义如下： 方程6 容量因子 式中，T是色谱峰中央到进样起始时间点的差值，T0是死体积时间。本质上，容量因子给出了分析物在固定相的时间超过在流动相中时间的数量。k值小说明化合物被柱子保留弱，化合物洗脱体积与死体积相近。k，值大的说明被分析物与固定相作用较强而具有好的分离，但是较大的k，值导致较长的分析时间和色谱峰的展宽。一般来说，k，的最佳范围在2~10之间；可以通过改变流动相来获得最佳的k，值。 8. 总结 分离度表示为一个与柱效、选择性、保留特性有关的函数。利用这些参数可以获得一个较好的分离度。其中每一项都可以用于改善分离效果。 · 当建立一个得方法时，柱子的选择性是十分重要的，因为它对分离的影响是最大的。 · 柱效与流速有关。流速越慢，柱效越高。这是由于流动相中的被分析物可以有更多的时间与固定相作用。不幸的是这样会导致峰形的扩散。 · 作为容量因子的一个函数，保留特性是确定柱子的状态最有用的参数，因此需要适当清洗和恢复柱子。 第三章 离子色谱的优点 1 速度：一般10min即可分别完成阴、阳离子的剖面。 2 灵敏度：直接进样可达ppb级，用浓缩柱可达ppt级；限制的因素是对普遍存在离子如Cl-和Na+的高灵敏度，由此而存在的污染。 3 选择性：Dionex已有多种成熟的固定相，以及选择性的检测器。 4 多组分同时测定，但对样品成分之间的浓度差太大的样品（如半导体级化学试剂中杂质的测定）有一定的限制。 5 运行费用非常低，勿需特殊试剂。 6 柱填料在广的PH范围内和对有机试剂的稳定性，广的应用范围及对复杂基体分析的可行性。 第四章 分离模式 1. 离子交换 离子交换是用于分离阴离子和阳离子常见的典型分离方式。在色谱分离过程，样品中的离子与流动相中对应离子进行交换，在一个短的时间，样品离子会附着在固定相中的固定电荷上。由于样品离子对固定相亲和力的不同，使得样品中多种组分的分离成为可能。 如图所示，Cl-和SO42-对固定相具有不同的亲和力。SO42-被较强地保留并且在Cl-之后洗脱。 与前述相似，由于Na+和Ca2+对固定相具有不同的亲和力。Ca2+比Na+较强地被保留，在较长时间时被洗脱，易于与Na+分离。 最佳的应用是在不同基质中对常见阴离子（F-、Cl-、NO3-、Br-、PO43-等），和常见阴离子（Li+、Na+、NH4+、K+、Ca2+等）的分离测定。一些碳水化合物也可以用离子交换法进行分离分析。 2. 离子排阻色谱法（ICE） 这种分离模式包括Donnan排斥、空间排斥和吸附过程。固定相通常是由总体磺化的聚乙烯/二乙烯基苯共聚物形成的高容量阳离子交换树脂。ICE可以用于从完全离解的强酸中分离有机弱酸和硼酸盐的测定。 在上面的保留模式中，带有负电荷的Donnan膜允许未解离的化合物通过而不允许完全解离的酸如盐酸通过，因为氯离子带负电荷。 一元羧酸的分离主要由发生在固定相表面的Donnan排斥和吸附决定。而对于二元、三元羧酸的分离，空间排斥则起主要作用。在这种情况下，保留主要取决于样品分子的大小。 3. 反相色谱法 反相色谱法应用中性、非极性大孔的填充材料和极性流动相。分离基于被分析物质与固定相之间的相互作用，换句话说，也就是样品的疏水性。 4. 离子对 在流动相中加入一种与被分析物相反电荷的疏水性离子，与样品离子形成离子对。这种方法适用于分离金属络和物和表面活性阳离子/阴离子。 5. 离子抑制 是用于反相色谱法的一种技术。加入一种特殊离子改变溶液的PH，抑制化合物如羧酸或胺类化合物的解离。得到的中性化合物与固定相相互作用，化合物得以分离。 第五章 检测方法 Dionex的检测方式可以分为以下两类： 1. 电化学 A. 电导检测 B. 安培检测 2. 光度法 A. 吸收光度法 B. 发射光度法 1. 电化学检测 电导检测法 电导率是在阴极和阳极之间的离子化溶液传导电流的能力。溶液中的离子越多，在两电极间通过的电流越大。在低浓度时，电导率直接与溶液中导电物质的浓度成正比。 ----------------------------------------------------------------------------------------------------- 欧姆定律 R = V / I Resistance Voltage Current (Ohm) (Volt) (Ampere) ----------------------------------------------------------------------------------------------------- 电导 G = I / R Conductance (Siemen) ----------------------------------------------------------------------------------------------------- 浓度 C = c × G Concentration Constant Conductance ----------------------------------------------------------------------------------------------------- 欧姆定律表明电阻等于电压与电流的比值。电导用西门子(S)作单位表示，定义为电阻的倒数，直接与溶液的浓度和电导池的常数有关。这个常数与电极之间的距离和池子的体积有关。如果电导池中电极之间的距离越近，离子流遇到的电阻越小，检测器的灵敏度也就越高。（Dionex采用惰性的316不锈钢微电极和1微升的池体积）。 经过对电导池校正之后（1mM KCl显示电导为147mS），测定不同浓度的标准溶液，得到浓度和响应值的线性关系。在浓度非常低或高时，线性关系存在一定的偏差。甚至在理论上，由于溶液中离子的性质也会产生非线性关系。 温度对电导率的影响 温度是严重影响电导的另一个因素。一般来说，温度和电导率在一定范围内存在线性关系。因此，必须消除和减弱温度对电导测定的影响。这些可以通过保持电导池温度的恒定或通过电导率乘以一个与温度有关的校正因子，将测定值修正到温度为25℃时的电导率。这个常数为温度补偿因子，以每摄氏度改变的百分率表示。 ----------------------------------------------------------------------------------------------------- Gnorm = (CT) × (G measured) Normalized Conductivity (Siemens) Temperature Compensation Factor CT = ek(25-T) where: k = Solution temperature coefficient (%/°C) T = solution temperature (°C) ----------------------------------------------------------------------------------------------------- 在CRC化学手册中，对几种缓冲溶液中得到的数据进行回归分析，发现在18℃~25℃之间，具有很好的线性。当温度在25℃以上时，盐类具有很好的线性，碱类继续保持基本的线性，酸类则表现为非线性。 抑制作用 电导检测器测定的离子型成分，离子交换和离子对色谱法是广泛采用的分离方法。这些方法用高电导的流动相。化学抑制通过降低流动相的背景电导值，提高被测物的电导值，使信噪比得到显著的提高。有关抑制的作用和技术将在抑制一节中详细介绍。 安培检测 安培检测用于测定在一个施加电位下能够进行电化学反应的电活性物质。在单电位安培法中，一个固定电位连续施加到电化学检测池上。测量样品物质在工作电极表面的氧化或还原作用所产生的电流。产生电流的大小与进行电化学反应的被测物浓度成正比。 单电位时，由于一些反应产物使电极表面“中毒”，导致测定重现性差和检测的灵敏度迅速降低。用多电位时，选择第二电位、第三电位、甚至第四电位（在特定的时间内）形成电化学清洗电极表面的依次重复的电位。这样就可以得到好的重现性和测定那些无法用单电位安培法测定的组分。当采用脉冲安培法时，施加电位、脉冲时间和工作电极的材料都可以根据被测物进行选择优化以达到高的灵敏度和选择性。 2. 分光光度检测法 吸收法 光度检测法是基于某些分子对光的吸收。被吸收的能量激发外层价电子由基态到较高的能级态。吸收能量的波长取决于分子内的化学键。 当样品中的分子吸收部分紫外或可见光时，检测器检测光线的强度减小。光强度的减小与样品中吸收光的分子的浓度成正比。 --------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- Beer's Law A = a × b × C Absorbance molar cell path length concentration of absorptivity (cm) absorbing species (moles/L) --------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- 摩尔吸光度与分子的结构有关，对任何一种特定的物质，其值是常数。检测池的长度b由检测池的物理尺寸决定，因此也是一个常数。由于a和b都是常数，一旦吸光度已知，就可以容易地测定被测物C的浓度。在大多数的定量分析中，通过测定已知浓度的被测物溶液的吸收度，作出吸光度与浓度的工作曲线，然后就可以求出未知样品的浓度。 因为任何检测方式都存在吸光度和浓度之间线性关系的限制。比尔定律的偏差主要由以下的因素造成： 化学的 仪器的 1. 络和反应 2. 与溶剂的反应 3. 温度的变化 1. 电源不稳定 2. 散射光的影响 3. 单色光的纯度 4. 检测器的误差 5. 仪器噪音 偏差是普遍的，但是可以通过工作曲线或标准加入的方法减少。 发射光度法 关于痕量分析，有一些检测器可以检测柱流出物中p克和f克水平。普通的吸光度检测器可以在p克范围测定具有很强生色基团的物质，但是测定经常受样品基体的干扰。 荧光检测具有较高选择性和灵敏度。不是所有能吸收光的化合物都产生荧光。因此有高的选择性。灵敏度的增加是由于较弱的荧光容易在非常低的背景条件下检测到的缘由。 自身具有荧光性质的化合物大多数含有一个环状的结构功能基。如果化合物不具备这样的功能基，可以将化合物或分子进行柱前或柱后衍生转变为具有荧光的化合物。 第六章 抑制作用 Kohlraush，s定律表明在稀溶液中溶液的电导率是溶液中每个离子电导率乘以它们各自的离子浓度之和。也就是说溶液的电导率直接与离子浓度成比例。简单地说，在整个溶液中每种离子的电导率对整个溶液的电导率的贡献中与其他离子无关。 Equivalent Conductances, 25°C Cations Anions H+ 350 OH- 198 Li+ 39 F- Na+ 50 Cl- 76 K+ 74 Br- 78 NH4+ 73 NO3- 71 Mg2+ 53 PO43- 80 Ca2+ 60 SO42- 80 抑制是通过弱酸和弱碱盐的离子交换中和作用。抑制的结果是：1）降低流动相的背景电导值，2）增加被测物的响应值。化学抑制的结果是改善被测物的灵敏度和检测限。例如，在常见阴离子分析中，以Na2CO3/NaHCO3 为淋洗液，Cl- 以盐的形式存在。NaCl的总的电导是126μS（50uS/cm Na++76uS/cm Cl-）。在抑制器中，盐经过离子交换后，待测离子Cl-变为强酸，其电导值为426μS（350μS/cm H+ +76μS/cm Cl-）。 自身再生抑制器 化学抑制的发展如上图所示。第一个化学抑制器是树脂填充抑制装置。但是为了重复使用需要经常离线再生。 1981年，出现了纤维薄膜抑制器。其明显的优点是连续再生。这种抑制技术的缺点是较低的抑制容量和机械脆性。 1985年微膜的引入，化学抑制器的发展又进入了另一个发展阶段。使用一种非常薄而耐用的膜，这种抑制器不仅可以连续抑制，而且具有很高的抑制容量，能够满足梯度洗脱和等度洗脱的要求。 第四代化学抑制器是自动再生抑制器（SRS）。SRS是第一个利用水的电化学反应产生氢和氢氧根离子，因此不再需要再生液。 在自动再生抑制器中，阴极和阳极之间施加一个直流电流，在施加电场下，在阳极水被氧化产生H+和氧气，同时在阴极水被还原为OH-和氢气。抑制器产生的氢离子和氢氧根离子用于抑制背景电导。 连续抑制较非连续抑制具有以下几处优点： · 无需周期性再生 · 稳定的基线 · 易于操作 · 适于常规梯度分析 · 可与高容量的柱子相匹配 第五代电抑制器是自动电解再生抑制器，简称AESTM。用离子交换叠片代替微膜。采用连续电解再生抑制的单一循环模式。可应用于碳酸盐溶液或MSA淋洗液的IC方法。有三种尺寸可选用，即4-mm，3-mm以及2-mm。该抑制器具有低噪音、快速启动、耐久性和可靠性等优点。 第七章 分离方式和检测方式的选择 分析者对待测离子应有一些一般信息，首先应了解待测化合物的分子结构和性质以及样品的基体情况，如无机还是有机离子，离子的电荷数，是酸还是碱，亲水还是疏水，是否为表面活性化合物等。待测离子的疏水性和水合能是决定选用何种分离方式的主要因素。水合能高和疏水性弱的离子，如Cl-或K+，最好用HPIC分离。水合能低和疏水性强的离子，如高氯酸（ClO4-）或四丁基铵，最好用亲水性强的离子交换分离柱或MPIC分离。有一定疏水性也有明显水合能的pKa值在1与7之间的离子，如乙酸盐或丙酸盐，最好用HPICE分离。有些离子，既可用阴离子交换分离，也可用阳离子交换分离，如氨基酸，生物碱和过渡金属等。 很多离子可用多种检测方式。例如测定过渡金属时，可用单柱法直接用电导或脉冲安培检测器，也可用柱后衍生反应，使金属离子与PAR或其它显色剂作用，再用UV/VIS检测。一般的规律是：对无紫外或可见吸收以及强离解的酸和碱，最好用电导检测器；具有电化学活性和弱离解的离子，最好用安培检测器；对离子本身或通过柱后反应后生成的络合物在紫外可见有吸收或能产生荧光的离子和化合物，最好用UV/VIS或荧光检测器。若对所要解决的问题有几种 方案 气瓶 现场处置方案 .pdf气瓶 现场处置方案 .doc见习基地管理方案.doc关于群访事件的化解方案建筑工地扬尘治理专项方案下载 可选择，分析方案的确定主要由基体的类型、选择性、过程的复杂程度以及是否经济来决定。表1和2总结了对各种类型离子可选用的分离方式和检测方式。 离子色谱柱填料的发展推动了离子色谱应用的快速发展，对多种离子分析方法的开发提供了多种可能性。特别应提出的是在pH 0-14的水溶液和100%有机溶剂（反相高效液相色谱用有机溶剂）中稳定的亲水性高效高容量柱填料的商品化，使得离子交换分离的应用范围更加扩大。常见的在水溶液中以离子形态存在的离子，包括无机和有机离子，以弱酸的盐（Na2CO3/NaHCO3, KOH、NaOH）或强酸（H2SO4、甲基磺酸、HNO3、HCl）为流动相，阴离子交换或阳离子交换分离，电导检测，已是成熟的方法，有成熟的色谱条件可参照。对近中性的水可溶的有机“大”分子（相对常见的小分子而言），若待测化合物为弱酸，则由于弱酸在强碱性溶液中会以阴离子形态存在，因此选用较强的碱为流动相，阴离子交换分离；若待测化合物为弱碱，则由于在强酸性溶液中会以阳离子形态存在，选用较强的酸作流动相，阳离子交换分离；若待测离子的疏水性较强，由于与固定相之间的吸附作用而使保留时间较长或峰拖尾，则可在流动相中加入适量有机溶剂，减弱吸附，缩短保留时间、改善峰形和选择性。对该类化合物的分离也可选用离子对色谱分离，但流动相中一般含有较复杂的离子对试剂。此外，对弱保留离子可选用高容量柱和弱淋洗液以增强保留，对强保留离子则反之。表1，2列出了离子色谱中常用的两种主要检测器:电化学检测器（包括电导和安培）和光学检测器。在水溶液中以离子形态存在的离子，即较强的酸或碱，应选用电导检测。具有对紫外或可见光有吸收基团或经柱后衍生反应后（IC中较少用柱前衍生）生成有吸光基团的化合物，选用光学检测器。具有在外加电压下可发生氧化或还原反应基团的化合物，可选用直流安培或脉冲安培检测。对一些复杂样品，为了一次进样得到较多的信息，可将两种或三种检测器串联使用。 表1 分离方式和检测器的选择（阴离子） 分析离子 分离（机理）方式 检测器 无机 阴离子 亲水性 强酸 F-、Cl-、NO2-、Br-、SO32-、NO3-、PO43-、SO42-、PO2-、PO3-、ClO-、ClO2-、ClO3-、BrO4-、低分子量有机酸 阴离子交换 电导、UV SO32- 离子排斥 安培 砷酸盐、硒酸盐、亚硒酸盐 阴离子交换 电导 亚砷酸盐 离子排斥 安培 弱酸 BO3-、CO32- 离子排斥 电导 SiO32- 离子交换、离子排斥 柱后衍生/VIS 疏水性 CN-、HS-（高离子强度基体） BF4-、S2O32-、SCN-、ClO4- I- 离子排斥 阴离子交换、离子对 阴离子交换 安培 电导 安培/电导 缩合磷酸剂 未络合 阴离子交换 柱后衍生/VIS 多价螯合剂 已络合 阴离子交换 电导 金属络合物 Au（CN）2-、Au（CN）4-、Fe（CN）64-、Fe（CN）63- EDTA-Cu 离子对 阴离子交换 电导 电导 有机 阴离子 羧酸 一价 脂肪酸，C〈5（酸消解样品，盐水，高离子强度基体） 离子排斥 电导 脂肪酸，C〉5 芳香酸 离子对/阴离子交换 电导，UV 一至三价 一元、二元、三元羧酸+无机阴离子 羟基羧酸、二元和三元羧酸+醇 阴离子交换 离子排斥 电导 电导 磺酸 烷基磺酸盐、芳香磺酸盐 离子对，阴离子交换 电导，UV 醇类 C〈6 离子排斥 安培 表2 分离方式和检测方式的选择（阳离子） 分 析 离 子 分离方式 检测器 无机阳离子 Li+、Na+、K+、Rb+、Cs+、Mg++、Ca++、Sr++、Ba++、NH4+ 阳离子交换 电导 过度金属 Cu++、Ni++、、Zn++、Co++、Cd++、Pb++、Mn++、 Fe2+、Fe3+、Sn2+、Sn4+、Cr3+、V4+、V5+、 UO22+、Hg++ Al3+ Cr6+(CrO42-) 阴离子交换/ 阳离子交换 阳离子交换 阴离子交换 柱后衍生/VIS 电导 柱后衍生/VIS 柱后衍生/VIS 镧系金属 La3+、Ce3+、Pr3+、Nd3+、Sm3+、Eu3+、Gd3+、 Tb3+、Dy3+、Ho3+、Er3+、Tm3+、Yb3+、Lu3+ 阴离子交换， 阳离子交换 柱后衍生/VIS 有机阳离子 低分子量烷基胺，醇胺，+碱金属和碱土金属 阳离子交换 电导、安培 高分子量烷基胺，芳香胺，环己胺，季胺，多胺 阳离子交换，离子对 电导、紫外，安培 1. 分离度的改善 （一）决定保留的参数 与高效液相色谱不同，离子色谱的选择性主要由固定相性质决定。Dionex公司有数十种不同选择性的柱子可供选择，对我国的多数用户，选购多种柱子有一定困难。本节主要讨论固定相选定之后的一些主要参数。对于待测离子而言，决定保留的主要参数是待测离子的价数，离子的大小，离子的极化度和离子的酸碱性强度。 1 价数 一般的规律是，待测离子的价数越高，保留时间越长，如二价的SO42-的保留时间大于一价的NO3-。例外是多价离子，如磷酸盐的保留时间与淋洗液的PH有关，在不同的PH，磷酸盐的存在形态不同，随着PH的增高，磷酸由一价阴离子（H2PO4-）到二价（HPO32-）和三价（PO43-），三价阴离子PO43-的保留时间大于一价的H2PO4-。 2 离子大小 待测离子的离子半径越大，保留时间越长。例如，下列一价离子的保留时间按下列顺序增加：F-〈Cl-〈Br-〈〈I-。 3 极化度 待测离子的极化度越大，保留时间越长，例如二价SO42-的保留时间小于极化度大的一价离子SCN-。因为SCN-在固定相上的保留除了离子交换之外，还加上了吸附作用。 （二）改善分离度 1 稀释样品 对组成复杂的样品，若待测离子对树脂亲合力相差颇大，就要作几次进样，并用不同浓度或强度的淋洗液或梯度淋洗。对固定相亲合力差异较大的离子，增加分离度的最简单方法是稀释样品或作样品前处理。例如盐水中SO42-和Cl-的分离。若直接进样，其色谱峰很宽而且拖尾表明进样量已超过分离柱容量，在常用的分析阴离子的色谱条件下，30min之后Cl-的洗脱仍在继续。在这种情况下，在未恢复稳定基线之前不能再进样。若将样品稀释10倍之后再进样就可得到Cl-与痕量SO42-之间的较好分离。对阴离子分析推荐的最大进样量，一般为柱容量的30%，超过这个范围就会出现大的平头峰或肩峰 2 改变分离和检测方式 若待测离子对固定相亲合力相近或相同，样品稀释的效果常不令人满意。对这种情况，除了选择适当的流动相之外，还应考虑选择适当的分离方式和检测方式。例如，NO3-和ClO3-，由于它们的电荷数和离子半径相似，在阴离子交换分离柱上共淋洗。但ClO3-的疏水性大于NO3-，在离子对色谱柱上就很容易分开了。又如NO2-与Cl-在阴离子交换分离柱上的保留时间相近，常见样品中Cl-的浓度又远大于NO2-，使分离更加困难，但NO2-有强的UV吸收，而Cl-则很弱，因此应改用紫外作检测器测定NO2-，用电导检测Cl-，或将两种检测器串联，于一次进样同时检测Cl-与NO2-。对高浓度强酸中有机酸的分析，若采用离子排斥，由于强酸不被保留，在死体积排除，将不干扰有机酸的分离。 3 样品前处理 对高浓度基体中痕量离子的测定，例如海水中阴离子的测定，最好的方法是对样品作适当的前处理。除去过量Cl-的前处理方法有：使样品通过Ag+型前处理柱除去Cl-，或进样前加AgNO3到样品中沉淀Cl-；也可用阀切换技术，其方法是使样品中弱保留的组分和90%以上的Cl-进入废液，只让10%左右的Cl-和保留时间大于Cl-的组分进入分离柱进行分离。对含有大的有机分子的样品，应于进样前除去有机物，较简单的方法是用Dionex的前处理柱OnGuard的RP或P柱或在线阀切换除去有机基体。 4 选择适当的淋洗液 离子色谱分离是基于淋洗离子和样品离子之间对树脂有效交换容量的竞争，为了得到有效的竞争，样品离子和淋洗离子应有相近的亲合力。下面举例说明选择淋洗液的一般原则。用CO32--HCO3-作淋洗液时，在Cl-之前洗脱的离子是弱保留离子，包括一价无机阴离子、短碳链一元羧酸和一些弱离解的组分，如F-、甲酸、乙酸、AsO2-、CN-和S2-等。对乙酸、甲酸与F-、Cl-等的分离应选用较弱的淋洗离子，常用的弱淋洗离子有HCO3-、OH-和B4O72-。由于HCO3-和OH-易吸收空气中CO2，CO2在碱性溶液中会转变成CO32-，CO32-之淋洗强度较HCO3-和OH-大，因而不利于上述弱保留离子的分离。B4O72-亦为弱淋洗离子，但溶液稳定，是分离弱保留离子的推荐淋洗液。中等强度的碳酸盐淋洗液对高亲和力组分的洗脱效率低。对离子交换树脂亲合力强的离子有两种情况，一种是离子的电荷数大，如PO43-、AsO43-和多聚磷酸盐等；一种是离子半径较大，疏水性强，如I-、SCN-、S2O32-，苯甲酸和柠檬酸等。对前者以增加淋洗液的浓度或选择强的淋洗离子为主。对后一种情况，推荐的方法是在淋洗液中加入有机改进剂(如甲醇、乙腈和对氰酚等)或选用亲水性的柱子，有机改进剂的作用主要是减少样品离子与离子交换树脂之间的非离子交换作用，占据树脂的疏水性位置，减少疏水性离子在树脂上的吸附，从而缩短保留时间，减少峰的拖尾，并增加测定灵敏度。 在离子色谱中，可由加入不同的淋洗液添加剂来改善选择性，这种淋洗液添加剂只影响树脂和所测离子之间的相互作用，而不影响离子交换。对与树脂亲合力较强的离子，如一些可极化的离子，I-和ClO4-，以及疏水性的离子，苯甲酸和三乙胺等，在淋洗液中加入适量极性的有机溶剂如甲醇或乙腈，可缩短这些组分的保留时间并改善峰形的不对称性。为了减少样品离子与树脂之间的非离子交换作用，减少树脂对疏水性离子的吸附，在阴离子分析中，可在淋洗液中加入对氰酚。如测定1% NaCl中的痕量I-和SCN-时，加入对氰酚占据树脂对I-和SCN-的吸附位置，从而减少峰的拖尾并增加测定的灵敏度。IC中，一价淋洗离子洗脱一价待测离子，二价淋洗离子洗脱二价待测离子，淋洗液浓度的改变对二价和多价待测离子保留时间的影响大于一价待测离子。若多价离子的保留时间太长，增加淋洗液的浓度是较好的方法。 （三）减少保留时间 缩短分析时间与提高分离度的要求有时是相矛盾的。在能得到较好的分离结果的前提下分析的时间自然是越短越好。为了缩短分析时间，可改变分离柱容量、淋洗液流速、淋洗液强度，在淋洗液中加入有机改进剂和用梯度淋洗技术。 以上方法中最简便的是减小分离柱的容量，或用短柱。例如用3×500mm分离柱分离NO3-和SO42-，需用18min，而用3×250mm的分离柱，用相同浓度的淋洗液只用9min。但NO3-和SO42-的分离不好，若改用稍弱的淋洗液就可得到较好的分离。 大的进样体积有利于提高检测灵敏度，但导致大的系统死体积，即大的水负峰，因而推迟样品离子的出峰时间。如在Dionex的AS11柱上用NaOH为淋洗液，进样量分别为25、250和750μL时，F-的保留时间分别为2.0、2.5和3.6分。为了减小保留时间，最好用小的进样体积。 增加淋洗液的流速可缩短分析时间，但流速的增加受系统所能承受的最高压力的限制，流速的改变对分离机理不完全是离子交换的组分的分离度的影响较大，例如对Br-和NO2-之间的分离，当流速增加时分离度降低很多，而分离机理主要是离子交换的NO3-和SO42-，甚至在很高的流速时，他们之间的分离度仍很好。 增加淋洗液的强度对分离度影响与缩短分离柱或增加淋洗液的流速相同。用较强的淋洗离子可加速离子的淋洗，但对弱保留和中等保留的离子，会降低分离度。当用弱淋洗液（如B4O72-）分离弱保留样品离子时，弱保留离子，如奎尼酸盐、F-、乳酸盐、乙酸盐、丙酸盐、甲酸盐、丁酸盐、甲基磺酸盐、丙酮酸盐、戊酸盐、一氯醋酸盐、BrO3-和Cl-等得到较好分离。但一般样品中都含有一些对阴离子交换树脂亲合力强的离子，如SO42-、PO43-、草酸盐等，如果用等浓度淋洗，它们将在一小时之后甚至更长时间才被洗脱。对这种情况，应于3-5次进样之后，用高浓度的强淋洗液作样品进一次样，将强保留组分从柱中推出来，或者用较强的淋洗液洗柱子半小时。 在淋洗液中加入有机改进剂，可缩短保留时间和减小峰的拖尾。 （四）改善检测灵敏度 首先是按说明书操作，是仪器在最佳工作状态，得到稳定的基线，才可将检测器的灵敏度设置在较高灵敏档，这是提高检测灵敏度的最简单方法，但此时基线噪音也随之增大。 第二种方法是增加进样量。直接进样，进样量的上限取决于保留时间最短的色谱峰与死体积（IC中一般称水负峰）之间的时间，例如用IonPac CS12A柱，12mmol/L硫酸作淋洗液。进样体积1300μl，可直接用电导检测低μg/L的碱金属和碱土金属，见图1。图中，Li+（保留时间最小的峰）的保留时间为4.1min，水负峰在1.6min，Li+峰与水负峰之间相隔达2.5min，因此可直接用大体积进样。而在阴离子分析中，若用CO32-/HCO3-作流动相，由于F-峰（保留时间最短的峰）靠近水负峰，若增加进样体积，水负峰增大，F-的峰甚至与水负峰分不开；另一方面由于F-的保留时间一般小于2min，若进样量大于1ml，流速为1-2ml/min，F-没有足够的时间参加色谱过程，因此峰拖尾定量困难。若用亲水性强的固定相，以NaOH为淋洗液，特别是梯度淋洗时，由于梯度淋洗开始时NaOH浓度低，又由于通过抑制器之后的背景溶液是低电导的水，几乎无水负峰，这种情况可适当增大进样量，图2表明，若进样量为750uL可直接测定10-1μg/L的常见阴离子。 图1 大体积进样（1300μL）测定低含量（μg/L）的阳离子 分离柱：IonPac CS12A,2mm; 淋洗液：12 mmol/L H2SO4; 进样体积：1300μL ; 检测器：抑制型电导； 色谱峰（μg/L）：1— Li+(1)；2— Na+(4)；3—NH4+（5）；4—K+(10)； 5—Mg++(5)；6—Ca++(10) 图 2 大体积(750μl )进样测定低μg/L的阴离子 分离柱： IonPac AS11 (2 mm)；淋洗液：NaOH 梯度(0.5-26 mmol/L)；检测器：抑制型电导；色谱峰（μg/L）：1—F－(0.5)；2—乙酸(0.20)；3—甲酸(0.10)；4—Cl－(0.25)；5—NO2－(0.25)；6—Br－(0.75)；7—NO3－(0.50)；8—未知；9—CO32－；10—SO42－；11—草酸(0.50)；12—PO43- 第三种方法是用浓缩柱，但一般只用于较清洁的样品中痕量成分的测定，用浓缩柱时要注意，不要使分离柱超负荷。柱子的动态离子交换容量小于理论值的30%。用浓缩柱富集F-时，若样品中同时还含有保留较强的离子，如SO42-或PO43-等，F-的回收不好。其原因是样品中的SO42-或PO43-也起淋洗离子的作用，可将弱保留的F-部分洗脱下来。对弱保留的离子，若浓缩柱的柱容量不是足够大，则用加大进样量方法所得到的结果较用浓缩柱好。除此之外，用浓缩柱时还应考虑样品的基体。例如，动力厂冷凝水中Cl-和SO42-的含量只有1-10μg/L。用浓缩柱后，SO42-的测定结果很好，而Cl-的结果则很不正常。其原因是工厂为了防止腐蚀，在水中加氨以降低水的pH值。氨与水作用生成的氢氧化铵中，OH-对树脂的亲合力与Cl-相近，其浓度则远大于Cl-，因而起了淋洗离子的作用。而SO42-对树脂亲合力较大，因而受OH-的影响小。 第四种方法是用微孔柱。离子色谱中常用的标准柱的直径为4mm，微孔柱的直径为2mm。因为微孔柱较标准柱的体积小4倍，在微孔柱中进同样（与标准柱）质量的样品，将在检测器产生4倍于标准柱的信号。而且淋洗液的用量只为标准柱的四分之一，因而减少淋洗液的消耗。 附 录 表1. 电化学检测器测定的组分 电导检测器 直流安培检测器 积分安培检测器 无机阴离子 儿茶酚胺 碳水化合物 无机阳离子 苯酚 脂肪胺，1o，2o，3o 羧酸 芳香胺 氨基酸 磺酸 硫醇 醇类 膦酸 氰化物 醛类 胺，1o，2o，3o，4o 硫化物 S类，除S（Ⅵ） 碘化物 亚硫酸盐 表2. 用于化学抑制的典型淋洗液 淋洗液强度 Tetraborate Na2B4O7 Boric Acid H3BO3 Hydroxide NaOH Bicarbonate NaHCO3 Carbonate Na2CO3 增强 · 通常，作为淋洗剂使用的化合物在水溶液中的pH大于8时为阴离子，pH在5－8之间为中性分子，其阴离子对固定相亲和力与待测离子相近，这类化合物可作为阴离子分析的淋洗液 表3. 常见电化学活性化合物的施加电压 化合物 工作电极 氧化电位 HS-，CN- Ag 0 Br-，I-，SCN-，S2O32- Ag 0.2 SO32- Pt 0.7 OCl- Pt 0.2 AsO2- Pt 0.85 N2H4 Pt 0.5 Phenols Pt 1.2 NO2- CP 1.1 ClO2- CP 1.1 S2O32- CP 1.1 表4. 常见无机阴离子的紫外线吸收波长 阴离子 波长（nm） 溴酸盐 200 溴化物 200 铬酸盐 365 碘酸盐 200 碘化物 227 金属氯化物 215 金属氰化物 215 硝酸盐 202 亚硝酸盐 211 硫化物 215 硫氰酸盐 215 硫代硫酸盐 215 表5. 国际现行的离子色谱标准分析方法（环境与高纯水分析） 方法编号① 方法名称 测定对象 样品基体 200.10(a) 在线螯合预富集感应等离子体-质谱测定海水中的痕量元素 Cd、Co、Cu、U、V、Ni 海水，河口水 200.13(a) 螯合预富集石墨炉原子吸收法测定海水中的痕量元素 Cd、Co、Cu、Pb、Ni 海水，河口水 218.6(a) 离子色谱法测定饮用水、地下水、工业废水中的可溶性六价铬 Cr(Ⅵ) 饮用水、地下水、工业废水 300.0(a) 300.1(a) 离子色谱法测定水中的无机阴离子 NO3-、NO2-、SO42-、F-、Cl-、ClO2-、ClO3-、Br-、BrO3-、PO43- 饮用水、地下水工业废水及纯净水、地表水、生活废水 300.6(a) 化学抑制型离子色谱法测定湿沉降物中的阴离子 NO3-、Cl-、PO43-、SO42- 雨水、露水、雪水、冰雹、冻雨 300.7(a) 化学抑制型离子色谱法测定湿沉降物中的可溶性碱金属和碱土金属 Na+、NH4+、K+、Mg2+、Ca2+ 雨水、露水、雪水、冰雹、冻雨 6060(a) 离子色谱法测定过渡金属 Cd2+、Co2+、Cu2+、Ni2+、Fe3+、Mn2+、Cr(Ⅵ) 水溶液 7199(a) 离子色谱法测定饮用水、地下水、工业废水中的六价铬 Cr(Ⅵ) 饮用水、地下水、工业废水 9056(a) 阴离子色谱法 F-、Cl-、NO2-、NO3-、Br-、PO43-、SO42- 氧瓶燃烧的固体样品及水样 EPA Method 7A 1994，p626 离子色谱法测定固定污染源排放的氮氧化物 NO2- 空气样品 EPA Method 7A 1944，p637 离子色谱法测定固定污染源排放的氮氧化物-碱处理 NO2- 空气样品 5173(b) 甲酸 甲酸 空气样品 2008(b) 氯乙酸 氯乙酸 空气样品 3509(b) 氨基乙醇化合物 乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺 空气样品 5022(b) 有机胂 甲胂酸、二甲胂酸、氨基苯胂酸 空气样品 6004(b) 二氧化碳 SO32-、SO42- 空气样品 6005(b) 碘 I- 空气样品 6011(b) 溴、氯 Br-、Cl- 空气样品 6701(b) 氨 NH4+ 空气样品 7604(b) 六价铬 Cr(Ⅵ) 空气样品 7903(b) 无机酸 F-、Cl-、NO3-、Br-、PO43-、SO42- 空气样品 D4327-91(c) 化学抑制型离子色谱法测定水中的阴离子 F-、Cl-、NO2-、NO3-、Br-、PO43-、SO42- 饮用水、废水 D4896-88(c) 离子色谱法测定车间空气中的硫酸雾 SO42- 空气样品 D5080-90(c) 化学抑制型离子色谱法测定大气湿沉降物中的3中离子 Cl-、NO3-、SO42- 湿沉降物、雨水、雪水、冻雨 D5281-92(c) 室外环境、工作场所和室内空气中六价铬的采集与分析 Cr(Ⅵ) 空气样品 D5542-92(c) 离子色谱法测定高纯水中的阴离子 F-、Cl-、NO3-、SO42- 高纯水 D5257-93(c) 水中六价铬的采集与分析 Cr(Ⅵ) 饮用水、地表水、废水 D2036-9(c) 水中氰化物 CN- 饮用水、废水 ID-104(d) 车间空气中的二氧化硫（气泡器） SO42- 空气样品 ID-108(d) 车间空气中的溴 Br-、BrO3- 空气样品 ID-177(d) 车间空气中的碘（固体吸附剂） I- 空气样品 ID-180(d) 车间空气中的磷化氢 PO3- 空气样品 ID-182(d) 车间空气中的二氧化氮 NO2- 空气样品 ID-188(d) 车间空气中的氨（固体吸附剂） NH4+ 空气样品 ID-190(d) 车间空气中的氧化氮 NO2- 空气样品 ID-202(d) 车间空气中的二氧化氯 ClO2- 空气样品 4410(e) 离子色谱法测定阴离子 F-、Cl-、NO3-、Br-、PO43-、SO42 饮用水、地下水、废水、地表水 G29-86(f) 模塑件中痕量玷污物的测定 Cl-、NO3-、Br-、PO43、 SO42-、Na+、NH4+、K+、 模塑件 G52-90(f) 半导体leadframes上离子玷污测定 Cl-、NO3-、SO42- Leadframes IDEMA方法(g) 磁盘驱动器组件表面可提取离子玷污物的测定（建议） Cl-、SO42- 磁盘驱动器组件 IDEMA方法(g) 阳离子分析（建议） Na+、K+、Mg2+、Ca2+ 高纯水、半导体零部件等 表6. 离子色谱法中的中国国家标准（GB） 方法编号 方法名称 测定对象 样品基体 GB 13580.