猪圆环病毒病研究进展

猪圆环病毒病研究进展 L|vEsTOCKANDPOOLTRY|NDUg豫?2'4 辖豳辉嫡藩溺辩究避廨 马力I杨丽梅2 (1.山东省滨州畜牧兽医研究院,山东滨州256618; 2.山东绿都安特动物药业有限公司1 中圈分类号:S858.28文献标识码:B文章编号:1008—0414(2007)02(N卜0026—03 猪圊环病毒(PCV)病是近几年新 发现的一种猪的传染病.由猪圆环病毒 (porcinecircovirus.PCV)引起猪的一种 多系统功能障碍性疾病.猪圆环病 毒病临床上以新生仔猪先天性脑震颤 和断奶仔猪多系统衰竭综合征postw— eaningmultisystemicwastingsyn—drome, PMWS)等为主要特征.该病原体已被 确认为圆环病毒fPCV一2),研究表明.? 型猪圆环病毒(PCV一2,不仅是断奶仔 猪多系统衰竭综合症(PMWS)的病原, 而且能够引起多种猪病.主要有 PMWS,猪皮炎及肾病综合征,猪增生 性坏死性肺炎,猪呼吸与繁殖障碍综 合征,猪细小病毒,传染性先天性震颤 等均与PCV一2感染有重要关联.随着 规模化养殖业的不断发展.由PCV一2引 起的疫病呈上升趋势.给全世界养猪业 带来了巨大的经济损失.为了探讨有 效控制本病的方法.特对该病的病原特 性,流行病学,临床症状,病理变化,诊 断及防制措施研究情况进行了综述. 1病原特性 收稿日期12006—12—17 猪阐环病毒(PCV)属于圃环病毒 科,阐环病毒属.是兽医学上已知动物 病毒中最小的病毒.无囊膜.直径17 22nm.含有1.76—2.3kb的单链环状 DNA,相对分子质量58ku,沉降系数为 52S.氯化铯中的浮密度为1+37g/mL 根据PCV的致病性,抗原性及核苷酸序 列,将其分为PCV一1和PCV一2两个型, 其中PCV一1无致病性,广泛存在于猪 体内及猪源传代细胞系.PCV一2则具 有致病性.在临床上主要引起断奶仔 猪多系统衰竭综合征(PMWS)..PCV埘 酸性环境(PH3),氯仿或者高温(56 和70)有抵抗作用.PCV在原代胎猪 肾细胞,恒河猴'肾细胞,BHK一21细胞 上小生长.可在PK—l5细胞中生长,但 不引起细胞病变.且需将PCV肓传多代 才能使病毒有效增殖.在接种PCV的 PK一15细胞培养物中加A.d一氨基葡萄 糖,可促进PCV复制,使得感染PCV的 细胞数量提高3O%感染PCV的细胞内 禽有许多胞浆内包涵体.少数感染细 胞内含有核内包涵体. 2流行病学 在我国虽然近几年来才对猪圆环 成熟.发挥仔猪最大的生产潜能.减少 断奶应激.增加采食量会提高生长速 度尤其是断奶前增加采食量不仅提 高断奶体重.而且断奶后很快适应同 体饲料.预防断奶应激而引起的生长 停止现象.再说仔猪增加采食量会减 少母乳的依赖程度.其结果减少母猪 体重损失.使母猪发情期来得早而且 哺乳期采食量越多.断奶体重越大.所 以应让哺乳期仔猪采食更多的饲料, 为了提高采食量.应供应给适口性好, 消化率高的优质饲料.补料时间一般 从57日龄开始,因为仔猪嗅觉灵敏. 开始料的适口性的和消化率比营养含 量更重要.可在乳猪料中加调味剂如 奶制品和甜味剂.让仔猪自南采食,补 料时要尽量少喂勤添.防止饲料浪费. 每天要将剩余的部分清出喂母猪.料 槽清洗消毒后再用在训练仔猪开食 的同时.应训练仔猪饮清洁水,否则仔 猪就会饮脏水或尿液.易致下痢. 8防疫治病 为了防止仔猪今后发生猪瘟.在 仔猪生后.尚未吃奶之前,可按常规 剂量接种猪瘟免化弱毒疫苗.2h后再 让仔猪自南吃奶..另外.乳头注意消 毒.以防止仔猪发生红,黄痢,亦可在 母猪妊娠后期.按耍求注射疫苗.另外 猪俞还应做好生消毒作. 病毒引起重视.但是.对于猪皿清中猪 圆环病毒?型(PCV一2)抗体所作的回 顾性检测以及对猪组织样本所作的回 顾性检测结果表明PCV2抗体至少从 1969年起就已经存在于猪群中了 2.1易感动物 本病主要侵害断奶后仔猪.哺乳 猪很少发病.如果采取早期断奶的猪 场,10—14El龄断奶猪亦可发病.一般 本病集中于断奶后2,3周龄的仔猪. 2_2传染源 该病毒分布广.猪群中m清阳性 率常达20%80%.病毒可随粪便,鼻腔 分泌物排出体外 2.3传播途径 通过消化道感染.胎盘垂直感染 可能性存在 2.4流行病学 发病率与死亡率不定,呈地方流 行性时,发病率死亡率较低.但猪繁殖 与呼吸综合症病毒(PRRV),细小病毒 (PPV),猪肺炎支原体(MH)多杀性巴 氏杆菌(PM),败皿型链球菌(DM)等混 合感染时,促进本病的发生流行.在我 国北京,LLJ东,河南,山西,湖北,湖南, 广西,东北等地均有 案例 全员育人导师制案例信息技术应用案例心得信息技术教学案例综合实践活动案例我余额宝案例 报道. 3临床症状 与圆环病毒?型感染有关的猪病 主要有以下5种疾病.其临床表现如 下: 3.1仔猪断奶后多系统衰竭综合征 断乳后全身多系统衰竭综合征 PMWS主要影响6,8周龄的猪.很少影 响吮乳的猪临床上表现为多系统进 行性功能衰弱为特征的症状.生长发 育不良.渐进性消瘦,体重减轻,皮肤 与可视粘膜苍白或黄疸,贫皿.肌肉萎 缩,衰弱无力,呼吸困难,呼吸过速.一 些不常见的症状有下痢,咳嗽和中枢 神经系统紊乱一般而肓,患病猪临床 表现为发热,精神不振,被毛粗乱,皮 肤苍白,进行性消瘦,发育障碍.而且 表现以咳嗽.喷嚏,呼吸加快及呼吸困 难为特征的呼吸器官障碍.体表淋巴 结.特别是腹股沟淋巴结肿大.部分病 例可见皮肤,可视粘膜黄疽,下痢,嗜 嵊再一个特征就是猪群的死亡率增 加.约20%的猪咳嗽,喷嚏,呼吸困难. 死亡率约为8%35%.10%20%猪皮 肤和可视粘膜可见黄疸.由于细菌,病 毒的二重感染.常常使PMWS的症状复 杂化,严重化临床上约有20%的病猪 呈现贫血与黄疸症状.具有诊断意义 3_2猪皮炎和肾病综台征 病猪发热,不食,消瘦,苍白,踱 行,结膜炎,腹泻等.特征性症状是会 阴部,四肢,胸腹部及耳朵等处的皮肤 .}:出现圆形或不规则形的红紫色病变 斑点或斑块.有时这些斑块相互融合 成条带状.不易消失. 3.3母猪繁殖障碍 发病母猪主要表现为体温升高达 4l,42?.食欲减退,出现流产,产死 胎,弱仔术乃伊胎.病后母猪受胎率低 或不孕.断奶前仔猪死亡率上升达 11%. 3.4猪间质性肺炎 临床上主要表现为猪呼吸道病综 合症.多见于保育期和育肥期的猪.咳 嗽,流鼻汁,呼吸加快,精神沉郁,食欲 不振,生长缓慢. 3.5传染性先夭性震颤 传染性先天性震颤的临床变化很 大.其震颤为从轻度到重度.在出生后 第一周.严重的震颤可因不能吃奶而 死亡.活1周的仔猪可以存活下来.但 多数在3周时间恢复震颇为双侧.影 响骨骼肌肉.当卧下或睡觉时震颤消 失.外界刺激可引发或加重震颤.如声 音或温度刺激.有的在整个生长和发 育期间都不断发生震颤主要是母猪 在怀孕阶段感染了病毒PCV病毒通 过胎盘感染胎儿的可能性很小.或者 感染发生在胎儿免疫功能形成以前. 曾有人报道母猪在不同的怀孕阶段感 染类似PCV病毒时.可引起震颤发生 此外.在临床上还能见到与圃环 病毒?型相关的中枢神经系统疾病, 肠炎和关节炎等这些情况多见于蓝 耳病阳性猪场继发感染所致实践证 明网环病毒病与蓝耳病同时流行的猪 场.其哺乳仔猪和育肥猪的死亡率明 显高于单个感染猪场. 4病理变化 最显着的剖检病变是全身淋巴 结.特别是腹股沟淋巴结,纵隔淋 结,肺门淋巴结,肠系膜淋巴结及颈下 淋巴结肿大2,5倍.有时可达10倍切 面硬度增加.可见均匀的白色有的淋 巴结有出血.在发生细菌感染时,淋巴 结则可见到炎症和化脓性病变.肺脏 肿胀,坚硬或似橡皮:部分病例形成同 化,致密的病灶.半数病例的肝脏肉眼 观察呈不同程度的花斑状.为轻度到 中度的肝萎缩肝小叶间结缔组织增 生明显,严重病例的肝小叶.结缔组织 非常明显严重病例肺泡出血.颜色加 深.整个肺呈紫褐色.有的肺尖叶和心 叶萎缩或实质性病变.脾脏常肿大.量 肉样变化.花斑肾.肾脏水肿,呈灰白 色.被膜下有时有白色坏死灶胃的食 管部黏膜水肿和非出血性溃疡.回肠 和结肠段肠壁变薄.盲肠和结肠黏膜 充血和出血另外.由继发感染引起的 胸膜炎,腹膜炎,心包炎(心包膜内有大 量炎性渗出物和关节炎也经常见到 5诊断 对PCV感染的诊断可以通过原代 猪肾细胞或猪肾细胞株培养分离病 毒.利用免疫染色确定病毒的存在检 测到PCV抗体水平提高也说明最近受 到感染对先天性震颤排除遗传性和 化学原因引起的震颤外.可以通过临 床症状进行诊断 5.1临床诊断 PMWS的临床症状具有特征性.有 较高的诊断价值在有PMWS发病史的 养猪场挑选出具有发育不良,皮肤苍 白及腹股沟淋巴结肿大症状的仔猪. 进行病理检查PCV抗原及核酸检验. 结果所有仔猪都患有PMWS.传染性先 天性震颤的震颤为从轻度到重度.在 出生后第一周.严重的震颤可因不能 吃奶而死亡.活1周的仔猪可以存活下 来+但多数在3周时间恢复.震颤为双 侧.影响骨骼肌肉.当卧下或睡觉时震 颤消失.外界刺激可引发或加重震颤. 如声音或温度刺激:有的在整个生长 和发育期间都不断发生震颤, 5.2病理学诊断 当发现全身淋巴结肿大.肺退化 不全或形成同:化,致密病灶肘.应怀疑 本病,病理组织学检查可见全身淋巴 组织的淋巴细胞减少.单核吞噬细胞 类细胞浸润及形成多核巨细胞.如在 这些细胞中观察到嗜碱性或两性染色 的细胞质内包涵体.则基本可以确诊 5.3病毒分离及电镜观察 将病料制成100g/L的组织悬液. 加青霉素(】OOIU,mL),链霉素(100 b~g/mL),4?3000r/rain离心2Orain,取 上清液接种于Dulac细胞.接种后6h用 300mmo儿葡萄糖胺37处理3Omin. 再培养72,96h.将增殖病毒的细胞冻 融3次.收集细胞病毒液.用细胞病毒 液再接种细胞传代6次第6代细胞病 毒液反复冻融3次.按5g/L加 Trition1】4.37?处理30min.10000g 离心30min.弃沉淀;将t清液加入盛 有300I蔗糖垫的离心管中,15000E 离心3h:弃上清,用0.Olmmol/LpH 8,0的TE缓冲液重悬并收集病毒.乙酸 双氧铀负染色后电镜观察. 5.4间接免疫过氧化物酶技术 将PK一15细胞在96-rE微量培养板 上长成单层后.加入1O倍稀释的待检 猪血清.作用一定时间后吸干洗涤.每 孑L加入50iLL1000倍稀释的HRP标记 的兔抗猪IgG.30oC孵育15min,吸干洗 涤后加入5OL底物溶液,然后.终止 反应.用星微镜读取结果,如观察到棕 色感染细胞即为阳性 5.5实验窒诊断 5.5.1病毒的分子鉴定:已经建立了许 多诊断PCV的PCR方法和原位杂交 试验方法.PCR实验方法有:常规PCR, 多重PCR.FLPCR.竞争性PCR及斑点 PCR:研究发现在病毒的反链上 设计 领导形象设计圆作业设计ao工艺污水处理厂设计附属工程施工组织设计清扫机器人结构设计 引 物所建立的原位杂交试验_方法比在病 毒的正链上设计引物所建立的方法敏 感? 5.5.2病毒的抗原鉴定:最常用于病毒 抗原鉴定的方法是间接免疫荧光试验 (IIn.免疫组织化学试验通过单克隆 抗体的应用.可以对PCV进行特异性鉴 定 5.5.3病毒的血清学检测:己经建立了 用于血清学检测的ELISA方法和免疫 荧光抗体检测方法由于PCV一1和 PCV一2之间存在抗原交叉反应.因此 已有的方法不能完全区分PCV—l和 PCV一2.需要制备特异性的单克隆抗 体.或者特异性的重组抗原来满足建立 特异性血清学方法的需要根据临床 症状.病理变化,流行病学,可以作出 初步诊断.确诊依赖病毒分离和鉴定. 还可应用免疫荧光或原位核酸杂交进 行诊断 6防治措施 6.1预防措施 6.1.1实施严格的生物安全措施.防止 PCV和使其感染恶化的二重因子.特别 是细菌,支原体及其他病毒侵入猪群. 对早期发现疑似感染猪进行检查,隔 离,淘汰.避免从疫医引进猪只,严格控 制来访者,车辆,货物进入猪场.同时 还要避免其它动物接近猪场.对老鼠 和飞鸟也荽进行严格控制PCV是没有 囊膜的DNA病毒.和环病毒科的其他病 毒一样.对理化因索也有较强的抵抗能 力.猪场廊定期使用有效的消毒剂进行 t肖毒 LIVESTOCKANDPQULTRF.tl8TRY}o:4 6.1.2购人种猪要严格检疫.隔离观 察.隔离饲养1个月,健康者方可进入 猪场生产区 6.1.3严格实行"全进全出" 制度 关于办公室下班关闭电源制度矿山事故隐患举报和奖励制度制度下载人事管理制度doc盘点制度下载 落实 生物安全各项措施猪舍要清洁卫生 保温.通风良好.降低氨气及有害气体 的浓度:饲养密度簧适中,不同日龄的 猪只应分群饲养不要混养:减少各种 应激因索.创造一个良好的饲养环境. 6.1.4定期消毒.杀死病原体,切断传 播途径.建独立的粪尿排放系统,粪尿 要发酵处理.生产中应用3%的火碱溶 液n3%的过氧乙酸溶液及0.5%的强 力消毒灵和抗毒威消毒效果最好. 6.1.5药物预防控制发病及继发感染 (1)妊娠母猪:产前7d与产后7d.接1t 饲料中加入80%支原净125g,15%金 霉素2.5kg,阿莫西林150g,拌料均匀, 连喂15d;(2)哺乳仔猪:1日龄,7日龄 和断奶时各肌注1次速解灵(头孢噻呋 500mmL,每头每次O.2mL);(3)断 奶仔猪:1t饲料中加80%支原净50g, 15%金霉素150g(强力霉索150g),阿 莫西林150g,拌料混匀连喂15d.也 可在每千克日粮中添加支原净50rng 强力霉素50mg,阿萸西林50mg.拌匀 后喂饲.连用7d.同时在饲料中注意 适当的添加电解质和维生素B维生 素C等 6.1.6帮助仔猪过好断奶关.仔猪断奶 时易发生心理应激,环境应激和营养 应激.所以仔猪28日龄断奶时,母猪下 床.仔猪应留在原产床上停留5d,并 给予优质全价饲料中拌人药物,以降 低其应激反应.断奶时以原窝仔猪组 群,不要与其他窝仔猪混群,合栏,以 免仔猪相互咬架,打斗.造成应激.保 育猪舍要保温通风.温度不能与产房 舍温度相差过大.否则易造成仔猪发 生死亡. 6.1.7发生滚病时应采取的措施发生 该病时要清除病猪.全群疫.淘汰阳性 猪.添加药物.控制疫情.全面消毒,改 善饲养环境温度,减少各种应激网索. 加强营养和饲养管理.防止继发其他 病的发生 6.1.8提高猪群机体抗病力疫情严重 猪场可取猪圈环病毒病感染病猪含毒 较多的脏器,如淋巴结,肺,脾等组织, 捣碎研磨灭活后制成组织灭活苗.给 全场猪只进行免疫注射.注射后12,15d 可使新发病例减少.并使疫情逐渐平 息. 6.2治疗措施 6.2.1治疗 方案 气瓶 现场处置方案 .pdf气瓶 现场处置方案 .doc见习基地管理方案.doc关于群访事件的化解方案建筑工地扬尘治理专项方案下载 :(1)对于刚断奶仔猪 的腹泻,消化不良,消瘦,皮肤苍FI机 体衰弱.免疫功能低下者.我们建议用 "重症王或"清开灵"注射.同时配合 红酒酵母多糖,板蓝根或大青叶浓缩 提取物,等拌料或饮水,并配合"氟苯尼 考油乳剂"注射,连用3d;(2)对疑似混 合染猪附红细菌体,弓形体,肺炎支原 体(MH),多杀性巴氏杆菌(PM),败血 型链球菌(DM)这种情况用黄芪多糖, 甘草浸粉拌料同时注射"方通精典 (高效复方六甲氧)"+威利宁;(3)在以 上2种情况混合感染时.我们建议在以 上(1)+(2)的基础上在加入VC磷酸酯 镁,复合VB等饮水或拌料连用57d. 同时配合补铁.生血的药物促进本病 的康复.间隔I周.再重复一次即可.并 配合"氟苯尼考油乳剂"注射.连用3d: (4)对疑似混合染猪附红细菌体,弓形 体,肺炎支原体(MH),多杀性巴氏杆 菌(PM),败血型链球菌(DM)这种情况 下用黄芪多糖,甘草浸粉拌料.同时注 射"方通精典(高效复方六甲氧)"+威 利宁;(5)在以上2种情况混合感染时, 我们建议在以上(1)+(2)的基础上在加 入Vc磷酸酯镁,复合VB等饮水或拌料 连用5,7d.同时配合补铁.生血的药 物促进本病的康复间隔l周.再重复1 次即可 6.2.2目前尚无特效的治疗方法.应早 发现,早确诊,早治疗.根据不同的临 床症状应用抗病毒与抗生索及磺胺类 药物进行对症治疗.以控制继发感染. 减少死亡.如应用金刚烷,支原净,卡 那霉索,强力霉索,庆大霉索,磺胺嘧 啶钠,庆增安,炎康注射液等治疗.肌 注维生素B12,维生索C,肌肝和静注葡 萄糖注射液等有一定的治疗效果. 7体会 PCV一2作为一种新发现的病毒 与其有关的疾病已经成为世界养猪业 的重要传染病.给养猪业带来氟大的 经济损失尽管世界许多实验室对PPV 和PRRSV与PCV一2在致病方面的协同 机制,该病毒对其所导致的各种疾病 及PMWS的人_丁复制等方面进行了大 量的研究.使我们获得了大量的相笑 知识.但我们对其分子生物学特性,病 毒对动物免疫系统的影响,致病机理, 有效的预防和控制该病毒引发的各种 疾病.以及一些潜在的问题等方面缺 乏全面而系统的了解.因此.还必须对 这些方面进行更详细,更深层的研究. 由于该病毒较广泛的存在于猪体内. 与猪的健康密切相关.尤其是考虑可 能用猪的器官进行人的异体移植时. 更应当进一步加强对此病原体的研 究另外.目前国内关于PCV:的分子生 物学和基因工程方面的研究鲜有报 道.这也给国内的兽医科技工作者提 出了一个新的课题但我们相信.通过 对PCV一2更深入的研究.将最终会发 现一种有效的疫苗来预防此病.这对 降低全球养猪业的经济损失起着很重 要的作用.. ?相关链接 猪常见病毒性疾病及治疗 猪的常见病毒性疾病包括:猪瘟,流行 性感冒,口蹄瘦,水疱病,断奶后仔猪多系 统衰弱综合症(圆环病毒病),繁殖与呼吸 综合症(蓝耳病),伪狂犬,传染性胃肠炎, 轮状病毒感染等 时病毒性疾病治疗的原则是:抗病毒 药+对症治疗+防止继发感染+辅助药物 l抗病毒药目前对病毒起作用的药物不 多.用得最多的是"病毒灵","病毒唑","板 兰根"等.大北农产品有"抗毒5号"和"新花 明l号": 2对症治疗病毒性疾病一般都伴有高 热高烧.而l且过度的高热,高烧还能促进病 情的恶化.,因此.退高烧为治疗病毒性疲病 的最主要措施之一.也是防止病情加剧的 措施之一在患富有高烧时.可采取以下药 物进行治疗.如"大救星","安尔康","宁 静","冷静"等: 3防止继发感染继发感染是增强病毒 性疾病危害的主要原因.也是加速痛盲死 亡的主要原因.因而.防止继发感染就显得 非常重要.所以,在治疗时应同时使用通 疗,大救星等抗全身感染,伴有支原体.胸 膜肺炎,附红细胞体,弓形体和链球茵时, 配夸应用"克喘黄金",氟笨尼考针剂(如 "30%呼诺玢","正气","泰诺康"),"德利 先","弓形康"等:粉刺有"呼诺玢2%","呼 肠舒","泰灭净"等 4辅助治疗补充营养.提高机体抵抗 力.一直是治疗病毒性疾病必不可少的措 施之一.大北农产品"雏力康","维多利", "lO%呼诺玢口服液"在饮水中举加.方便, 见效快: S加强消毒选择国际公认一流的产品. "农福"或"卫康".按1:500,l:1o0o的比例 稀释后.垒场喷霉消毒