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蛋白质含量检测方法 Lowry法检测蛋白质的含量.doc

蛋白质含量检测方法 Lowry法检测蛋白质的含量

王街才
2017-09-26 0人阅读 举报 0 0 0 暂无简介

简介:本文档为《蛋白质含量检测方法 Lowry法检测蛋白质的含量doc》,可适用于综合领域

蛋白质含量检测方法Lowry法检测蛋白质的含量Lowry法检测蛋白质的含量一、实验原理:首先在碱性条件下蛋白质与铜作用生成蛋白质铜复合物该复合物加入酚试剂后产生蓝色复合物。该蓝色复合物在nm处的吸光度值与蛋白质的含量成正比根据供试品的吸光度计算供试品的蛋白质含量。wwwwenkucom二、配液碱性酒石酸盐溶液:称取无水碳酸钠g氢氧化钠g酒石酸钾钠g加水至L溶解混匀。硫酸铜溶液:称取硫酸铜(CuSOHO)g加水至ml溶解混匀。碱性铜溶液(现用现配):量取溶液Aml溶液Bml混匀即得。标准蛋白质储备液(mgml):用纯化水将牛血清白蛋白对照品定量稀释至mgml混合均匀用ml离心管分装ml管贴好标签于或以下低温冰箱贮存。标准蛋白质工作液(μgml):将标准蛋白质贮备液用前倍稀释至μgml。阳性对照(约μgml的牛血清白蛋白溶液):精密称取牛血清白蛋白mg加纯化水溶解加入ml容量瓶中定容至刻度混合均匀冷冻管分装每管ml贴好标签于或以下低温冰箱贮存有效期两年。三、步骤:将标准蛋白质贮备液(mgml)稀释成μgml的标准工作液。量取标准工作液(双份)ml、ml、ml、ml、ml分别加入刻度试管中补水至ml。精密量取供试品和阳性对照ml(双份)于刻度试管中吸取ml纯化水作为空白对照。加碱性铜溶液(溶液Aml、溶液Bml混匀)ml到每一管中涡旋混匀室温条件放置分钟。加酚试剂(稀释至N)ml摇匀室温放置分钟。在nm处用空白对照调零后测定标准溶液的吸光度值以及供试品和阳性对照的吸光度值。根据标准蛋白浓度和其对应吸光度的标准曲线计算供试品和阳性对照的蛋白含量。百度搜索“就爱阅读”,专业资料,生活学习,尽在就爱阅读网tocom,您的在线图书馆

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