甘草水制广地龙饮片质量标准研究

甘草水制广地龙饮片质量 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 研究 word格式论文 甘草水制广地龙饮片质量标准研究 作者,谭峻英,谢媛,柯晓燕,李钟 【摘要】 目的 建立甘草水制广地龙饮片的质量标准。方法 按XXXX年版《 中国 药典》附录?H水分测定法中的第一法、附录?K灰分测定法和附录?A浸出物测定法测定;采用HPLC法测定饮片中的次黄嘌呤和肌苷的含量。结果 甘草水制广地龙饮片质量标准为,水分含量?5.0%,总灰分含量?10.0%,酸不溶性灰分含量?5.0%,水溶性浸出物浓度?20.0%,乙醇浸提物浓度?8.0%;次黄嘌呤含量?0.006%,肌苷含量?0.40%。结论 建立了较完善的甘草水制广地龙饮片的质量标准,改变了过去仅依靠经验和感官判断的鉴定方法。 word格式论文 【关键词】 甘草水制广地龙;水分测定;灰分测定;浸出物测定;次黄嘌呤;肌苷 Abstract:Objective To establish a quality standard for the liquorice processed Pheretima aspegillum.Methods Samples were determined according to the procedures recorded in the Appendix ?H, ?K and ?A of Chinese PharmacopoEia(XXXX年版《中国药典》中“地龙”的[炮制]项下只收录了生地龙一种,且地龙的常规检查项目下没有收载醇溶性浸出物检查和有效成分的含量测定。目前尚未制定甘草水制广地龙的质量标准,现有 文献 多为对广地龙饮片中的琥珀酸[6]和次黄嘌呤等成分[7,9] 进行含量测定, 甘草水制广地龙饮片的质量控制仍停留在经验或古法的基础上。因此,为了保证甘草水制广地龙这种地方习用炮制品的质量,本实验采用常规检查结合HPLC法测定饮片中的次黄嘌呤和肌苷含量的方法,对甘草水制广地龙饮片进行质量标准研究。 1 仪器与试药 广地龙为博罗先锋药业广地龙GAP基地提供,经广东药学院刘基柱副教授鉴定为钜蚓科动物参环毛蚓Pheretima aspegillum(E.Pettier)的干燥体;甘草为市售药材,经广东药学院中药学院刘基柱副教授鉴定为豆科植物甘草 word格式论文 Glycyrrhiza uralensis Fisch.的干燥根。炮制品由本实验室加工,标本保存在广东药学院药用植物与中药鉴定学教研室。次黄嘌呤对照品(140661XXXX年版“地龙”药材项下[1]方法。 2.5 常规检查[1] 2.5.1 水分测定 甘草水制广地龙饮片中挥发性成分较少,故采用《中国药典》XXXX年版一部(附录? H第一法)测定。 2.5.2 总灰分、酸不溶性灰分测定 按《中国药典》XXXX年版一部(附录?K)方法测定。 2.5.3 浸出物测定 按《中国药典》XXXX年版一部(附录?A)浸出物测定法测定。包括水溶性浸出物测定和醇溶性浸出物测定。供试品需粉碎,使能通过二号筛,并混合均匀,醇溶性浸出物测定采用冷浸法,乙醇体积分数为95%。以上常规检查项目结果见 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 1。根据实验结果分析,建议在制定甘草水制广地龙饮片质量标准时,以含水量不超过5.0%,总灰分不超过10.0%,酸不溶性灰分不超过5.0%,水溶性浸出物不得少于20.0%,醇溶性浸出物不得少于8.0%为宜。 word格式论文 表1 甘草水制广地龙饮片常规检查项目结果 2.6 含量测定 2.6.1 色谱条件与系统适应性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(ODSEP,4.6 mm×250 mm, 5 μm,迪马公司);甲醇水(体积比95:5)为流动相;检测波长为249 nm[5];柱温30 ?。理论塔板数按次黄嘌呤峰 计算 ,不低于3 800,在此条件下测得次黄嘌呤、肌苷与相邻组分分离度良好。分别精密吸取次黄嘌呤对照品溶液、肌苷对照品溶液与供试品溶液各10 μL,分别进样,记录色谱图,见图1 2.6.2 对照品储备溶液的制备 分别精密称取次黄嘌呤对照品和肌苷对照品适量,加流动相配制成1 μg?mL-1 的次黄嘌呤对照品储备溶液、100 μg?mL-1的肌苷对照品储备溶液。 2.6.3 供试品溶液的制备[5] 精密称取样品2.0 g,置具塞锥形瓶中,加水50 mL,密塞,浸泡1 h,超声30 min,残渣再加水50 mL提取1次,合并 word格式论文 提取液,离心10 min(4 000 r?min-1)。精密量取提取液1 mL,用流动相定容至10 mL,滤过,即得。 2.7 方法学考察 2.7.1 线性关系考察 分别精密吸取次黄嘌呤对照品储备溶液0.2、0.4、1.2、1.6、2 mL置10 mL量瓶中,用流动相定容至刻度,摇匀;分别精密吸取肌苷对照品储备溶液0.4、0.5、0.6、1.0、1.2、1.5 mL置10 mL量瓶中,用流动相定容至刻度,摇匀。分别取上述溶液各10 μL,进样,按“2.6.1”项下色谱条件进行分析。以质量浓度(ρ)为横坐标,峰面积(A)为纵坐标,绘制标准曲线,得回归方程: 次黄嘌呤A =3×10-6ρ-0.0108,r=0.999 2,进样量在0.020 8,0.208 μg?mL-1范围内线性关系良好。肌苷A = 5×10-5ρ+0.2665,r=0.999 4,进样量在4.004,15.015 μg?mL-1范围内线性关系良好。 2.7.2 精密度试验 取同一对照品溶液,重复进样6次,每次10 μL,根据峰面积 计算 含量,次黄嘌呤和肌苷的RSD分别为1.53%、1.80%,结果表明本方 word格式论文 法精密度良好。 2.7.3 稳定性试验 按“2.6.3”项下方法制得供试品溶液,按“2.6.1”项下方法于0、2、4、6、8、12 h分别进样10 μL,根据峰面积计算含量,次黄嘌呤和肌苷的RSD依次分别为1.70%、1.80%,表明溶液在12 h内稳定性良好。 2.7.4 重复性试验 按“2.6.3”项下方法分别制得供试品溶液6份,按“2.6.1”项下方法进行测定,根据峰面积计算含量,次黄嘌呤和肌苷的RSD分别为1.5%和2.6%,表明本方法重复性良好。 2.7.5 加样回收率试验 取已知含量的广地龙粉末约1g,精密称定,共9份,分别精密加入次黄嘌呤和肌苷对照品溶液(次黄嘌呤质量浓度为0.100 2 mg?mL-1,肌苷质量浓度为2.003 μg?mL-1)适量,按“2.6.3”项下方法制备,依法测定。计算得到次黄嘌呤的平均回收率为96.8%,RSD值为1.78%(n=9);肌苷的平均回收率为103.2%,RSD值为1.43%(n=9)。结果见表2。表2 次黄嘌呤和肌苷加样回收率测定结果 2.8 样品测定 取甘草水制广地龙饮片5批,按“2.6.3”项下方法制备供试 word格式论文 品溶液,按 “2.6.1”项下条件测定样品中次黄嘌呤和肌苷的含量,结果见表3。5批样品次黄嘌呤的平均含量为0.0069%,肌苷的平均含量为0.4516%。结合不同批次药材质量存在差异进行考虑,暂定按干燥品计算,甘草水制广地龙中次黄嘌呤含量不得少于0.006%,肌苷含量不得少于0.40%。表3 甘草水制广地龙饮片中次黄嘌呤和肌苷的含量 3 讨论 肌苷在稀酸中易水解产生次黄嘌呤和D核糖,为考察炮制对次黄嘌呤和肌苷成分的影响,探讨其转化机制,故同时选用两者作为含量测定指标。在本试验色谱条件下,上述2种成分可得到有效分离。经方法学考察,本方法的重复性、稳定性、精密度、加样回收率试验均符合有关规定,为广地龙质量标准化提供了依据。 建议甘草水制广地龙饮片的质量标准为,水分含量?5.0%,总灰分含量?10.0%,酸不溶性灰分含量?5.0%,水溶性浸出物浓度?20.0%,乙醇浸提物浓度?8.0%,次黄嘌呤含量?0.006%,肌苷含量?0.40%。 word格式论文 【 参考 文献 】 [1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典:XXXX年版一部[M].北京:化学 工业 出版社,2005:80-81; 附录?H, ?K,?A. [2] 龙艳华.地龙的化学及药理研究概况[J].数理医药学杂志,2005,18(4):379-381. [3] 王筠默.中药研究与临床应用[M].上海:上海中医药大学出版社,2006:245. [4] 黄若干,宾祖焕,梁峰,等.HPLC法测定肌苷口服溶液中的有关物质[J]. 中国 药品标准,2008,9(5):369-372. [5] 李钟,黄艳玲,李文姗.炮制对广地龙次黄嘌呤和肌苷含量的影响[J].中药材, 2009,32(1):31-32. [6] 何琳,龙晓英.高效毛细管电泳法测定广地龙饮片中琥珀酸的含量[J].广东药学院学报,2007,23(2):124-125. [7] 李钟,李文珊,黄燕玲.广地龙炮制工艺研究[J].中医药导报,2008,14(7):81-83. word格式论文 [8] 李坚,龙晓英,何琳,等.HPLC测定不同产地广地龙中次黄嘌呤的含量[J].中药材,2006,29(5):448-449. [9] 李金屏.HPLC法测定广地龙中次黄嘌呤的含量[J].中国药品标准,2002,3(5):29-30.