[教学研究]实验59 抗生素产生菌分离筛选和抗菌谱的测定
实验59 抗生素产生菌分离筛选和抗菌谱的测定
一(综述(背景,原理,国内外研究进程)
药物和保健品是人类战胜疾病和提高生活质量的重要物质资源。随着人类人口的急剧增长环境恶化和人类无知地滥用药物使病原微生物的抗药性空前提高,人类面对的疾病威胁、疾病种类都在日益增多,甚至许多疾病前所未有,对许多疾病甚至一无所知,且无药可治。原有效的药物急剧变得低效甚至无效,也无药可替。另一些原已基本消灭的疾病近年又卷土重来。因此利用微生物及其产物提高人类的生存质量,减少疾病,和开发微生物药物资源,用于各种疾病的治疗,对于推动人类社会的文明进步具有重大意义。目前,国内外都在利用现代生物技术尤其是微生物技术,或对已知的各种药物进行改造,以提高疗效或适应更为广泛的疾病治疗,或开发新的药物和保健品,扩大药物资源。
抗生素是微生物的次生代谢产物,既不参与细胞结构,也不是细胞内的贮存性养料,对产生菌本身无害,但对某些微生物有拮抗作用,是微生物在种间竞争中战胜其他微生物保存自己的一种防卫机制。抗生素具有不同于化学药物的特点:
( 1 )抗生素则能选择性地作用于菌体细胞 DNA 、 RNA 和蛋白质合成系统的特定环节,干扰细胞的代谢作用,妨碍生命活动或使停止生长,甚至死亡。而不同于无选择性的普通消毒剂或杀菌剂。抗生素的抗菌活性主要表现为抑菌、杀菌和溶菌三种现象。这三种作用之间并没有截然的界限。抗生素抗菌作用的表现与使用浓度、作用时间、敏感微生物种类以及周围环境条件都有关系。
( 2 )抗生素的作用具有选择性,不同抗生素对不同病原菌的作用不一样。对某种抗生素敏感的病原菌种类称为该抗生素的抗生谱(抗菌谱)。例如淡紫灰链霉菌( Streptomyces lavadulae )产生的卮立霉素只对少数病毒有医疗作用,对细菌、真菌和其他多数病毒都没有作用。广谱抗生素对多种病原菌有抗生作用,例如青霉素对多种革兰氏阳性细菌都有良好药效,链霉素对多种革兰氏阳性和阴性细菌都有良好药效,对结核杆菌有特殊的疗效。 ( 3 )有效作用浓度。抗生素是一种生理活性物质。各种抗生素一般都在很低浓度下对病原菌就发生作用,这是抗生素区别于其他化学杀菌剂的又一主要特点。各种抗生素对不同微生物的有效浓度各异,通常以抑制微生物生长的最低浓度作为抗生素的抗菌强度,简称有效浓度。有效浓度越低,表明抗菌作用越强。
有效浓度在 100 mg/L 以上的属作用强度较低的抗生素,有效浓度在 l mg/L 以下是作用强度高的抗生素。
正根据《Journal of Antibiotics》(1984,1995)和《Japan Kokai Patent》(1983,1992)发表的数据,对这十年抗生素筛选方面的研究进行了回顾。在日本,新抗生素筛选研究非常活跃,这种回顾有助于掌握在这方面日本国内和国际的研究趋势。
二、 目的及意义
1.目的
(1)学会抗生素产生菌的分离
方法
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。
(2)学会抗生素产生菌活性测定方法。
2(测定意义
自然界中微生物多样性及其代谢产物的多样性,使得微生物成为新药以及先导化合物发现的重要来源。在众多的微生物代谢产物中,微生物产生的各种次级代谢产物因其具有各种不同的生理活性,而成为微生物来源药物的开发目标。
目前,从微生物的次级代谢产物中筛选的各种生理活性物质,除了抗生素、酶抑制剂和免疫调节剂外,在受体拮抗剂、抗氧化剂。细胞因子诱导剂等多个领域,都发现了具有药物开发价值的候选化合物。可以毫不夸张的说,在微生物的次级代谢产物中,存在着各种人类目前还无法想象的极好药物,有待于我们进一步开发。
三(实验研究
3.1
?设备
名称 型号
恒温培养箱
超净工作台
电炉
摇床
接种环
酒精灯
记号笔
试管架
?试剂
名称 规格
金黄色葡萄球菌 培养于TSA斜面培养基24h
大肠埃希菌 培养于TSA斜面培养基24h
铜绿假单胞菌 培养于TSA斜面培养基24h
枯草芽孢杆菌 培养于TSA斜面培养基24h
灭菌水 450.0ml
TSA 200ml
酒精 75%
?耗材
名称 规格 数量 灭菌试管 5ml 12 灭菌试管 1ml 12 灭菌三角瓶 250ml 5 灭菌三角瓶 500ml 1 灭菌培养皿 Φ9cm 15
烧杯 500ml 1
烧杯 250ml 1 酒精灯 1 接种环 1
3.2步骤
四(结论