青风藤研究现状及展望3

青风藤研究现状及展望3 青风藤研究现状及展望 1～32陈曦王艳龙 (1.陕西理工学院生物科学与工程学院 陕西 汉中 723000,2.汉中市农业科学研究所 陕西 汉中 723000, 3.陕西省资源生物重点实验室 陕西 汉中 723000) 摘 要:近年来～随着风湿、类风湿病发病率的不断上升～对青风藤的研究越来越受到人们的重视。从活性成分提取工艺研究、化学成分研究、药理作用等方面的综述了青风藤研究进展～旨在为青风藤的进一步研究、开发利用等提供参考。 关键词: 青风藤,研究现状,展望 青风藤为防己科植物青藤及毛青藤的干燥藤茎，主要成分为青藤碱、双青藤碱、木兰花碱、尖防己碱等。具有止痛、通经络、抗风湿、类风湿性关节炎、关节肿大、肢体疼痛、麻木等多种功效。 近年来, 随着风湿和类风湿性关节炎、肢体疼痛、麻木等疾病的发病率的不断增多, 对青风藤需求量的不断增大，青风藤药理学研究日益受到人们重视。本文对青风藤的活性成分研究、提取工艺研究、药理作用及临床应用方面的研究状况做一概述。 1 活性成份研究 20世纪50年代，日本学者富田真雄等从日本产青风藤中分离得到青藤碱(Sinomenine)、双青藤碱(Disinomenine)、四氢表小檗碱(Sinacutine)、尖防己碱(Acutumine)和土藤碱(tuduranine)。佐佐木喜男等又从中分离出木兰碱(Magnoflorine)、异青藤碱(Isosinomenine)、尖防己定碱(Acummidine)。20世纪60年代佐佐木喜男等还分离得到白兰花碱(Michelalbine)、光下金藤碱(Stepharine)。我国学者朱任宏等首次从国产同种植物中分离得到青藤碱(Sinomenine)和青风藤碱(Sinoacutine)。陈雅研等分得8,14-二氢萨鲁塔里定碱(8,14-Dihydrosalutaridine)、千金藤宁(Stepharanine)、蝙蝠葛宁(Bianfugenine)和一种 [1][2]新生物碱青风藤定碱(Sinomendine)。任洁等用药典记载的提取方法提取药材青风藤的挥发油，采用气质联用仪分离出200多个峰，通过与软件中的质谱标准谱图库比较鉴定出其中101种化合物，且 [3]青风藤中主要物质为n-十六烷酸和(z,z)-9,12-十八烷酸。班小红等利用硅胶色谱柱、反相Rp-18色谱柱及重结晶等方法分离及纯化，结合1H-NMR、13C-NMR、EI-MS及理化常数鉴定了95,乙醇提取物中青风藤化合物活性成份，分别为青藤碱、(-)-DL-syringaresinol、胡萝卜苷、 收稿日期:2010-11-6 基金项目: 陕西理工学院资助项目(SLG0911) 作者简介:陈曦(1981-)，女，陕西汉中人，助教，硕士研究生，研究方向:为生物资源开发利用。 通讯作者:陈曦 (Email):baobeixiaoxi@sina.com;(电话):。 1 (+)-syringaresinol-4′-O-β-D -monoglucoside、syringaresinol-4′,4-O-bis-β-D-glueoside、syringin。黄筑艳[4]等以青风藤干燥藤茎为材料，95%乙醇加热回流提取，减压浓缩回收乙醇，所得浸膏利用硅胶柱色 113谱、反相RP-18色谱柱及重结晶等方法进行分离及纯化，并通过H-NMR、C-NMR、EI-MS及理化常数对分离化合物进行结构鉴定。从青风藤提取物中分离得到11个化合物，分别鉴定为尖防己碱、蝙蝠葛波酚碱、dauriporphinoline、dauricumine、acutuminine、6-O-demethyl2menisporphine、蝙蝠葛 [5]宁、(-)-8-oxotet rahydrothalifendine、(-)-oxoisocorypalmine、四氢表小檗碱、四氢巴马亭。周秋香等通过反复硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱和重结晶等方法进行分离纯化，研究了青风藤的化学成分，通过理化性质和波谱数据鉴定结构，首次从青风藤中分离鉴定了5个三萜类化合物:羽扇豆醇、 [6]羽扇豆酮、赤杨醇、赤杨酮、乙酰齐墩果酸。宋永彬等以干燥青藤茎为材料，以70,的乙醇溶液 113提取，采用ODS中低压柱色谱、制备型HPLC方法分离，并通过H-NMR、C-NMR、EI-MS及理化常数对分离化合物进行结构鉴定。结果:干燥青藤茎可分离鉴定得到5个化合物:青藤碱(sinomenine)、3-methoxy-6-hydroxy-l7-methyimorphinane、穆坪马兜铃酰胺(N-trans-feruloyl tyramine)、syringaresinol [7]mono-β-D-glucoside 1,2,4/3,5- cyclohexanepentol。李海滨以青藤干品为材料，开展了非生物碱部分的化学成分研究，经硅胶柱层析，以石油醚、乙酸乙酯为溶剂系统进行梯度洗脱，得到3个非生物碱成分及含量，分别为β-谷甾醇(43mg)、豆甾醇(67mg)、aquilegiolide(17mg)。 综上所述，目前已报道文献中青风藤的茎和根中分离提取化合物有41种，主要为生物碱成分。此外，对于青风藤活性成分的分析和比较研究报道较少。 2 提取工艺研究 青风藤中主要药用成分为青藤碱，但青藤碱提取受浸提时间、温度、料液比、溶剂、pH值等诸多因素的影响。为获得青藤碱提取的最佳工艺条件，已有不少学者对青藤碱的提取做了大量的研究 [8]工作。侯文峰采用正交实验法获得青风藤中青藤碱的提取工艺:70,乙醇、加8倍量70,乙醇、回流提取2次、每次1.5小时。结果表明:乙醇浓度对青藤碱提取率有极显著影响，提取次数和时间对 [9]青藤碱提取效率影响均不显著。潘娓婕等以苯为溶剂采用超声法从青风藤根中提取青藤碱，最佳 [10]提取条件下青藤碱的产率:2.12,，含量:98.73,。潘林梅等测定了一常用抗风湿性关节炎的验方中同时含有的青风藤、雷公藤、稀莶草等3种中药的含量，考察了复方中青风藤单提及与雷公藤、稀莶草共提时青藤碱提取率的变化。结果表明:不同药味与青风藤共提时对青藤碱提取率有不同影 [11]响。冯自立等采用Box-Behnken响应曲面分析法探讨了超临界CO_2萃取青风藤药材中青藤碱得率的关键因素。据统计模型进行了工艺参数的优选，以得率为指标，优化后所得青藤碱超临界CO_2萃 2 取工艺条件为萃取压力:27.63MPa，萃取温度:50.68?，萃取时间:120.24 min，该条件下得率: [12]1.372%。刘超英等研究比较了青风藤中青藤碱的提取分离方法。方法1:精密称取过60目筛的青风藤粉末0.5g，置具塞锥形瓶中，精密加入70,乙醇20rnl，密塞，称定、超声处理20rnin，放冷，再称定，用70,乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过。方法2:精密称取过60目筛的青风藤粉末0.5g，置圆底烧瓶中，精密加入70,乙醇20ml，回流提取30min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加盐酸溶液(1~50) 10 rnl溶解，滤过，滤液用氨试液调pH至碱性，加氯仿20rnl，振摇2次，每次10ml，氯仿液蒸干，残渣加甲醇溶解至20ml，摇匀。结果表明:两种方法的青藤碱均在0.519~2.595μg范围内具有良好的线 [13]性关系(r=0.9996);回收率为95,,101,之间，两种方法均可行、可靠、可控。王晓玲等得到的青藤碱提取工艺为以7.5~10%的熟石灰，1.8倍量水的碱化，15倍量乙苯回流提取，获得的粗品在 3ph=2.5~3.5，密度=1.05~1.10 g/cm的条件下进行精制，产品经UV法测定，含量大于95,。康红钰等[14]采用正交试验法提取青藤碱，以紫外分光光度标准曲线法测定青藤碱的含量。得青风藤中青藤碱的提取工艺:固液比1?20，碱化时间2h，提取液pH值为3，碱化pH值为8，青藤碱平均提取率为3.7%。 [15]张小红等在相同提取条件下，将青风藤单独提和与延胡索混提，采用高效液相法测定青藤碱含量。表明:混合提取青藤碱的提取率比单独提取高24.06,。说明青风藤与延胡索混合提取有利于提高青藤碱的提取率。 综上所述，为进一步提高青藤碱的得率。青风藤与其他药材混合提取青藤碱、辅助技术的应用都将大大提高青藤碱提取得率，但是混合提取青藤碱提取后的分离纯化技术、辅助技术(如酶制剂、微波、冷冻、超临界萃取和脉冲电场等)辅助技术的使用条件、能源消耗以及这些技术的工业化应用等问题急需深入研究。 3 药理学研究 青风藤及其有效成分青风藤碱具有多种药理学作用。目前，已经有许多的学者开展了这方面的研究工作。 3.1 抗炎作用 [16]方勇飞探讨中药青藤碱诱导类风湿关节炎患者滑膜细胞凋亡的发生机制。结果表明:青藤碱在一定浓度及作用时间内可诱导RA患者滑膜细胞凋亡。其作用机制可能与下调bcl-2蛋白表达及阻滞 [17]G1期细胞向S期移行有关。唐黎明等探讨了复方青风藤胶囊治疗类风湿性关节炎的主要药效作用。结果表明:复方青风藤胶囊可以对抗类风湿性关节炎这类免疫异常引发的疾病，作用机理可能与其免疫抑制作用与较好的抗炎镇痛作用有关。 3 3.2 对神经系统的作用 [18]朱秋双通过Y-迷宫观察青风藤对吗啡成矗小鼠学习与记忆能力的影响。结果表明:青风藤对吗啡戒断小鼠的分辨学习及记忆保持能力有极大提高，对吗啡戒断致小鼠海马CAl区神经元的损伤有 [19]研究了青风藤碱对海人酸所致神经毒性的抑制效应，用谷氨酸的受体激一定的治疗作用。晏浩等 动剂海人酸引起的神经损伤为动物模型探讨青风藤碱的抑制效应。结果表明:青风藤碱对海人酸所 [20]致神经毒性有抑制效应。王彩云观察青风藤对吗啡在离体豚鼠回肠中戒断反应的影响，以及对乙酰胆碱引起豚鼠回肠收缩的影响， 评价 LEC评价法下载LEC评价法下载评价量规免费下载学院评价表文档下载学院评价表文档下载 青风藤对吗啡依赖豚鼠回肠的作用。结果表明:青风藤能够 [21~23]抑制Mor依赖的戒断症状。莫志贤等探讨了青风藤及其有效成分青藤碱对吗啡诱导的小鼠条件性位置偏爱及脑内组胺水平的影响。结果表明:青风藤及青藤碱能消除吗啡诱导的小鼠条件性位置 [24]偏爱的形成，降低脑内的HA含量，对脑内组胺水平的改变具有调节作用。蔡红兵通过吗啡依赖豚鼠离体同肠实验及吗啡依赖小鼠催促戒断实验，观察青风藤醇提液及有效成份青藤碱在体外及体内对吗啡成瘾后催促戒断反应的影响。结果表明:青风藤醇提液能明显抑制吗啡依赖小鼠纳洛酮催促后产生的跳跃反应。 3.3 对肾脏及心脏的作用 [25]陈志强等探讨青风藤提取物青藤碱对实验性系膜增生性肾小球肾炎的肾功能保护和病理形态 青藤碱能够保护病鼠肾功能，有效减轻肾脏病理损害。杨学改善的作用及其可能机制。结果表明: [26]汝春等采用小鼠UUO模型，用不同剂量青藤碱进行干预，用血管紧张素转化酶抑制剂蒙诺作为对照。结果表明:青藤碱可显著抑制肾小管上皮细胞或间质细胞的表型转化，提示降低肌成纤维细胞 [27]的积聚是其防治肾间质纤维化的重要机制之一。王耐勤等通过药理实验研究发现青藤碱可缩短印防己毒素诱发家兔心律失常的持续时间，其抗心律失常以及延长心肌复极的离子机制可能是它对心 [28]室肌细胞膜钾离子通道以及钙离子通道的浓度依赖性有阻滞作用。王晓玉等综述了青风藤在急性 心肌梗死中的保护作用主要有:降血压作用、抗心律失常作用、保护心脏等。 3.4 对免疫抑制作用 [29]李天发等探讨了青风藤醇提取物对大鼠心脏移植急性排斥反应的作用及受体外周血IL-2、 [30]IL-10水平的影响。结果表明:青风藤醇提取物有抗心脏移植急性排斥作用。秦国庆等研究青藤碱对大鼠肾移植术后急性排斥反应的抑制作用及机制。青藤碱能下调肾移植模型大鼠外周血淋巴细胞PFP的表达水平，从而干预参与急性排斥反应的淋巴细胞发挥作用，对大鼠肾移植术后急性排斥反应 [31]起到免疫抑制作用，并与CsA有协同作用。田桂芝等采用高效液相色谱法和TLC色谱法鉴了定青风藤的有效成分、 检测 工程第三方检测合同工程防雷检测合同植筋拉拔检测方案传感器技术课后答案检测机构通用要求培训 了青藤碱的含量;并开展了动物毒理试验研究。结果表明:青风藤制剂具有 4 祛风除湿、活血化瘀、温经止痛、免疫等作用, 且毒性小, 副作用少。 动物学试验研究表明青风藤及其提取物青藤碱在抗炎、镇痛、祛风除湿、降血压、抗心律失常、保护心脏、免疫等方面都有显著治疗效果。 4 临床研究 4.1 治疗类风湿性关节炎 类风湿性关节炎是一种慢性全身性自身免疫性疾病。其临床特点是病程长，病情重，反复发作， [ 32]缠绵难愈，呈进行性损害。李春芬等认为清风藤与小剂量氨甲喋呤对对类风湿性关节炎是较理想 [ 33]的病情缓解药，是中西药结合治疗类风湿性关节炎的有益探索。沈瑞子等观察青风藤汤治疗85例患者类风湿性关节炎的疗效。将随机分为2组。治疗组口服青风藤汤(处方:青风藤、鸡血藤、络石藤、蜈蚣、全蝎、鸟梢蛇、秦艽、防己、防风、桂枝、杜仲、续断、狗脊、知母、白芍、炙甘草)治疗;对照组40例口服雷公藤多甙片治疗。2组均以3月为1疗程，连续治疗2疗程。结果表明:青风藤汤治疗组并能明显降低关节疼痛、肿胀、压痛及关节功能障碍指数，且无明显毒副作用。 4.2 治疗肾病综合症 [34慢性肾小球肾炎临床治疗的主要目的是降低尿蛋白，保护肾功能，孙建平等]采用青藤碱制剂(正清风痛宁)治疗86例慢性肾小球肾炎患者，发现其不仅具有明显的临床疗效，而且其安全性优于雷公藤多甙片。结果表明:正清风痛宁对慢性肾小球肾炎患具有明显的治疗效果，且不良反应发生率低，对肝功能无明显损害，未见明显心肌病理改变，是治疗慢性肾炎的较理想的药物。 4.3 其他应用 [35]青风藤制剂特别是复方制剂还被广泛的用于治疗各种疾病。王光晃等通过现代药理与中医病机的汇通思维，把青风藤开发试用于红斑性狼疮肾病综合征等疑难病症，均取得了显著的疗效。此外，青风藤制剂还被用于治疗骨质增生、脊椎炎的、心律失常等疾病以及海洛因依赖戒断症状的治疗。 .4 治疗心律失常 4 目前，临床上多用青风藤药理青风藤治疗风湿、类风湿性关节炎等中枢神经系统和免疫系统的疾病，而对于心血管系统的研究还不够深入，需要更多的药理研究作为基础，另外，其中药戒毒疗效研究及其新药研究开发也今后的热点。 5 展望 成分提取方面，青藤碱提取工业化技术问题还需解决和深入研究。药理学试验研究表明青风藤 5 提取物青藤碱和吗啡镇痛药具有一定的镇痛作用，为减少吗啡等易成瘾药物的使用，可将青藤碱和吗啡镇痛药二者混合药研制与开发，其作用机理、使用剂量等问题有待进一步深入研究。总之，青风藤作为一种常用中药，药理作用确切，可根据其特性，开发适宜剂型，使青藤碱更广泛地应用于临床治疗。 参考文献: [1]王岩,周莉玲,李锐.青风藤的研究进展[J].中药材,2002,25(3):209-211. 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