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土壤硝态氮的测定[整理]

土壤硝态氮的测定[整理]土壤硝态氮的测定[整理] 土壤硝态氮的测定 A 紫外分光光度法 1、方法提要 -土壤浸出液中的NO，在紫外分光光度计波长210nm3 -2-处有较高吸光度，而浸出液中的其它物质，除OH、CO、3 --HCO、NO和有机质等外，吸光度均很小。将浸出液加酸32 -2---、HCO的干扰。NO一般中和酸化，即可消除OH、CO323 含量极少，也很容易消除。因此，用校正因数法消除有机质 -的干扰后，即可用紫外分光光度法直接测定NO的含量。3 待测液酸化后，分别在210nm和275nm处测定吸光度。 -A是NO和以有机...

土壤硝态氮的测定[整理] 土壤硝态氮的测定 A 紫外分光光度法 1、方法提要 -土壤浸出液中的NO，在紫外分光光度计波长210nm3 -2-处有较高吸光度，而浸出液中的其它物质，除OH、CO、3 --HCO、NO和有机质等外，吸光度均很小。将浸出液加酸32 -2---、HCO的干扰。NO一般中和酸化，即可消除OH、CO323 含量极少，也很容易消除。因此，用校正因数法消除有机质 -的干扰后，即可用紫外分光光度法直接测定NO的含量。3 待测液酸化后，分别在210nm和275nm处测定吸光度。 -A是NO和以有机质为主的杂质的吸光度;A只是有机2103275 -质的吸光度，因为NO在275nm处已无吸收。但有机质在3 275nm处的吸光度比在210nm处的吸光度要小R倍，故将A校正为有机质在210nm处应有的吸光度后，从A中减275210 -去，即得NO在210nm处的吸光度(?A)。 3 2、适用范围本方法适用于各类土壤硝态氮含量的测定。 3、主要仪器设备 3.1紫外—可见分光光度计; 3.2石英比色皿; 3.3往复式或旋转式振荡机，满足180r/min?20r/min的振荡频率或达到相同效果; 3.4塑料瓶:200mL。 4、试剂 4.1HSO溶液(1:9):取10mL浓硫酸缓缓加入90mL24 水中。 -14.2氯化钙浸提剂[c(CaCl)=0.01mol?L]:称取2.2g氯2 化钙(CaCl?6HO，化学纯)溶于水中，稀释至1L。22 -14.3 硝态氮标准贮备液[ρ(N)=100mg?L]:准确称取0.7217g经105~110?烘2h的硝酸钾(KNO，优级纯)溶于水，3 定容至1L，存放于冰箱中。 -14.4硝态氮标准溶液[ρ(N)=10mg?L]:测定当天吸到10.00mL硝态氮标准贮备液于100mL容量瓶中用水定容。 5、操作步骤称取10.00g土壤样品放入200mL塑料瓶中，加入50mL氯化钙浸提剂，盖严瓶盖，摇匀，在振荡机上于20?~25?振荡30min(180r/min?20r/min)，干过滤。吸取25.00mL待测液于50mL三角瓶中，加1.00mL1:9 HSO溶液酸化，摇匀。用滴管将此液装入1cm光径的石英24 比色槽中，分别在210nm和275nm处测读吸光值(A和210 -A)，以酸化的浸提剂调节仪器零点。以NO的吸光值(?2753A)通过标准曲线求得测定液中硝态氮含量。空白测定除不加试样外，其余均同样品测定。 -NO的吸光值(?A)可由下式求得: 3 ?A= A- A×R 210275 式中R为校正因数，是土壤浸出液中杂质(主要是有机质)在210nm和275nm处的吸光度的比值。其确定方法为: -A是波长210nm处浸出液中NO的吸收值(A)与杂硝2103210质(主要是有机质)的吸收值(A)的总和，即A= A+ 杂硝210210210A，得出A= A- A。选取部分土样用酚二磺酸法杂杂硝210210210210 -测得NO—N的含量后，根据土液比和紫外法的工作曲线，3 即可计算各浸出液应有的A值，即可得出A。硝杂210210 A是浸出液中杂质(主要是有机质)在275nm处的吸收275 -值(因为NO在该波长处已无吸收)，它比A小R倍，即杂3210A=R?A，得出校正因数R=A/ A。杂杂210275210275 各不同区域可根据多个土壤测定R值的统计平均值，作 -为其他土壤测试NO—N的校正因数，其可靠性依从于被测3 土壤的多少，测定的土壤越多，可靠性越大。 -1-标准曲线的绘制:分别吸取10mg?LNO—N标准溶3液0、1.00、2.00、4.00、6.00、8.00mL，用氯化钙浸提剂定容至50mL，即为0、0.2、0.4、0.8、1.2、1.6mg/L的标准系列溶液。各取25.00mL于50mL三角瓶中，分别加1mL1:9 -HSO溶液摇匀后测A，计算A对NO—N浓度的回归242102103 方程，或者绘制工作曲线。 6、计算结果 ,()NVD,,-1土壤硝态氮，mg?kg= m 式中:ρ(N)—查标准曲线或求回归方程而得测定液中 -1-NO—N的质量浓度，mg?L;3 V—浸提剂体积，mL(50mL); D—浸出液稀释倍数，或不稀释则D=1; m—土壤质量，g。 7、注释 ?土壤硝态氮含量一般用新鲜样品测定，如需以硝态氮加铵态氮反映无机氮含量，则可用风干样品测定。 --?一般土壤中NO含量很低，不会干扰NO的测定。如23 -果NO含量高时，可用氨基磺酸消除2 (HNO+NHSOH=N+HSO+HO)，它在210nm处无吸收，2232242 -不干扰NO测定。 3 ?浸出液的盐浓度较高，操作时最好用滴管吸取注入槽中，尽量避免溶液溢出槽外，污染槽外壁，影响其透光性。 ?大批样品测定时，可先测完各液(包括浸出液和标准系列溶液)的A值，再测A值，以避免逐次改变波长所产210275 生的仪器误差。 -1+?如需同时测定土壤NH—N，可选用2 mol?LKCl4 -1-1或1 mol?LNaCl溶液制备待测液。但2 mol?LKCl溶液 +本身在210nm处吸光度较高，因此同时测定土壤NH—N4 -1-和NO—N时，可选用吸光度较小的1 mol?LNaCl溶液为3 浸提剂。 ?如果吸光度很高(A,1时)，可从比色槽中吸出一半待测液，再加一半水稀释，重新测读吸光度，如此稀释直至吸光度小于0.8。再按稀释倍数，用氯化钙浸提剂将浸出液准确稀释测定。 ?根据北京和河北石灰性15个土壤样品的测定结果，校正因素(R)的平均值为3.6，不同土类的R值略有差异，各地可根据主要土壤情况进行校验，求出当地土壤的R值。

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